METODEDSSDSSDSS-a METODE DSS a

PELETIRANJE

PAJETE

AMPULE

PIPETE

SMRZAVANJE U SMRZAVANJE U PAJETAMA PAJETAMA

sperma u cjevicama, a kako su cjevice bile nalik slami nazvane pajetama (franc slami, (franc. la paille =slamka) sobzirom na dozu razrjeenog sjemena razlikuju se: minipajete od 0,25 mL, midipajete idi j t od d 0,450,45 0 45-0,50 0 50 mL Li makropajete od 11-1,2 mL

sve podjednake duljine duljine, ali im je razliita irina i zapremina

SMRZAVANJE U SMRZAVANJE U PAJETAMA PAJETAMA

Danas se sve vie prelazi na minipajete koje sadre 0 25 mL 0,25 L sjemena, j odnosno d 10-20, 1020 ili 1010-30 milijuna ilij spermija Prednost u tome da je sjeme pohranjeno na taj nain kvalitetnije, bre se smrzava - tanji sloj

spremaju se u posude s tekuim N2 250250 -600L tekueg N2

TRANSPORT SPERME TRANSPORT SPERME

transport DSS jednostavan DSS se mora drati u specijalnim posudama s tekuim duikom, a u njima i se i transportira moe na neograniene udaljenosti, treba PAZITI da u kontejneru ima dovoljno tekueg N2, (svaki 2. 2 dan kontrola) Za transport DSS danas se koriste manji kontejneri s tekuim N2 i na mjestu UO uzima se potrebni br. doza

UMJETNO OSJEMENJIVANJE UMJETNO OSJEMENJIVANJE

Ime je doslovni prijevod s njemakog udomaen u mnogim g jezicima. j

Umjetno j samo stavljanje j j sjemena j u enske spolne organe.

UMJETNOOSJEMENJIVANJE OSJEMENJIVANJE UMJETNO

UO je vaan nain rasplo l ivanja ivotinja, temelji l se na 3 osnovne pretpostavke: 1 da spermiji mogu preivjeti izvan tijela 1. 2. da se nakon toga mogu aplicirati u sp. organe enke na nain s prihvatljivim uspjehom koncepcije 3. da se moe otkriti plodni period enke

UMJETNO OSJEMENJIVANJE
- brzo b moe mijenjati mo ij j i pasminski i ki sastav - izravni izravni utj utje ee na selekciju i stvaranje hibrida (meso meso, , mlijeko itd.). itd .). - npr. bik godi godinje oplodi 80 80-120 krava, krava, dok se ejakulatom osjemeni isti br. krava - jednostavniji i jeftiniji transport - br bre progeno testiranje

ZOOHIGIJENSKI ZNAAJ Zoohigijenska gj metoda

onemoguuju razliite spolne zarazne bolesti: bolesti: genitalna kampilobakterijoza, g kampilobakterijoza p j , trihomonijaza, trihomonijaza j , bruceloza, bruceloza , TBC genitalija, genitalija, itd itd. . kontrola rasplodnjaka i plotkinja kontrola plotkinja, , bolesne ivotinje se izluuju iz rasploda rasploda. .

Medicinski zna aj MEDICINSKI ZNA AJ

ginekoloki pregledi ginekolo pregledi i na vrijeme se mogu dg. d dg g g. - eventualne sp. sp. bolesti i - patolo patoloka stanja (priroena ili
steena ena) )

poveava se plodnost -lijei se sterilitet oplo l uju j se samo plotkinje l tki j u estrusu estrusu, , izluuju se neplodne ivotinje ivotinje, , kontrolira se puerperij itd. itd.

DS samo sperma zdravih rasplodnjaka (progeni i ostali testovi). testovi ).

EKONOMSKI ZNA AJ Ekonomski zna aj j

poveava se ukupna stoarska proizvodnja. proizvodnja. potrebno je manje rasplodnjaka manji su tro tro kovi prehr prehrane ane, , dr dr anja anja, , lijeenja enja, , karantene karantene, , itd itd. .

UMJETNOGOVEDA OSJEMENJIVANJE GOVEDA

BIK UMJETNO OSJEMENJIVANJE

Poslije prirodnog pripusta pripusta, od ukupnog ejakulata

95% propada u rodnici zbog nepovoljnih uvjeta 5% dospijeva u cerviks svega oko 2% stigne u jajovode

ORGANIZACIJA UO-a UOOrganizacija osjemenjivanja

Organizacija g j osjemenjivanja j j j goveda g (DSS) ( ) organizirana je na 3 naina: 1. stacionarno u stanici ili ambulanti 2x dnevno ( (ujutro j i predveer). 2. na punktovima samo jednom dnevno 3. na poziv p i vlasnika l ik u optimalno pti l vrijeme ij

Postupak ODMRZAVANJA odmrzavanja DSS POSTUPAK DSS

Podizanje i vaenje sjemena iz k kontejnera j Otresanje ostataka vode sa pajete p j Prebacivanje u toplu vodu (39(3940oC) Odmrzavanje kroz 3030-60 sek

Priprema za U.O PRIPREMA ZA UO

Vaenje i brisanje pajete Stavljanje u pistolet Rezanje epa Stavljanje navlake i uvrivanje s pomou prstena

UO krava i junica UMJETNO OSJEMENJIVANJE

Estrus traje 22-30h

N trajanje Na j j utje j u: pasmina, i godinje di j doba, d b prisutstvo i bika, prehrana, proizvodnja mlijeka, prisutstvo drugih krava

Ovulacija 1010-12h nakon estrusa

UMJETNO OSJEMENJIVANJE

Sljedeih 6h j.stanica prolazi 1/3 puta kroz jajovod i pritom dolazi do oplodnje (30h nakon estrusa) Spermiji po dolasku u spolne organe k nisu odmah enke d h sposobni b za oplodnju l d Najbolje da spermiji budu u jajovodu u trenutku ovulacije j Idealno vrijeme za UO je 6 6-24h prije ovulacije.

UMJETNO OSJEMENJIVANJE

75% goveda poinje se tjerati nou i rano ujutro. Plotkinje P ot i je ije se tjeranje tje a je otkrije ot ije - ujutro UO poslije popodne - poslije podne UO sutradan ujutro Ako se ne zna toan poetak estrusa ili ako se UO samo 1x 1 dnevno d (npr. ( punktovi), k i) plotkinje l ki j treba b UO O odmah nakon to se uoe znakovi estrusa!

UMJETNO OSJEMENJIVANJE
PRIJE UO VANO PREGLEDATI KRAVE VAGINALNO I REKTALNO !!!

Odluka hoe li se plotkinja UO na osnovu nalaza na sp. organima: - hiperemija, otvorenost cerviksa,

- kvaliteta estrusne sluzi, - nalaz F3 na jajniku

UMJETNO OSJEMENJIVANJE
Ako se ustanovi da je folikul puknuo ve prije pregleda, plotkinja se moe UO, ali treba upozoriti vlasnika da e se, , najvjerojatnije, j j j j ,p pregoniti. pregoniti g .

Ako folikul p pukne tijekom j same p pretrage, g , izgled g za uspjeh je PUNO manji

UMJETNO OSJEMENJIVANJE
Ako se nau neke patoloke promjene na spolnim organima Prema opsegu promjena i dijagnozi odluka treba li plotkinju: l k - UO, , - UO i lijeiti ili - samo lijeiti

MJESTO UO GOVEDA MJESTO UO

1. Duboko intracervikalno - priblino 1 cm ispred j g (kranijalnog) ( j g) otvora cerviksa unutarnjeg 2 Plitko intracervikalno - u prednju polovicu 2. cervikalnog kanala (slabiji rezultati) 3. Intrauterino osjemenjivanje j j j - u tijelo j ili sve do bifurkacije rogova maternice 4. Vaginalno

TEHNIKE OSJEMENJIVANJA TEHNIKE UO

1. vizualno

osjemenjivanje

2. izvlaenje cerviksa Albrechtsenovim klijetima 3. manocervikalna tehnika osjemenjivanja 4 dvoruna metoda s fiksacijom cerviksa 4.

BIMANUALNA METODA UO
Prikaz bimanualne metode osjemenjivanja goveda ( (intracervikalno ntracerv kalno polaganje DSSDSS-a)

Doza za DOZA ZAUO UO

sjeme se polae u cerviks (duboko intracervikalno) ili u tijelo maternice

Doza za U.O. goveda mora sadravati najmanje 15 do 20 milijuna milij n progresivno p g pokretljivih p j spermija p j

PROVJERA USPJEHA UO Provjeravanje uspjeha UO

pregled krava na gravidnost (kliniki pregled: rektalni, ultrazvuni). anketom pomou koje se moe ustanoviti koliko se osjemenjenih krava otelilo. N -return metoda NonNon d (NR)

NON RETURN METODA NR metoda

- najjednostavnija, ali manje pouzdana

metoda od ostalih - Provodi se u podrujima s 100% -im obuhvatom UO UO-a NR =60 odnosno d NR =90 -10% 0% (prodane, lijeene ili uginule)

INDEKS OSJEMENJIVANJA Indeks osjemenjivanja (IP)

To je ukupan broj doza sjemena podijeljen s brojem steonih krava.

IP

do 1,4 do 2,0

- vrlo dobro, - dobro,

vie od 2,0 - loe!

UMJETNO OSJEMENJIVANJE OVCE OVACA

UMJETNO OSJEMENJIVANJE OVACA

u razdoblju merinizacije UO ovaca je kod nas g maha, , uzelo velikog d danas - rijetko. rijetko ij k . To T je j velika lik teta jer j omoguuje j ekonomino ovarstvo. sjemenom j j jednog d ovna godinje di j se moe osjemeniti 2.000 do 3.000 ovaca

Posebnosti U.O. U.O.a ovaca POSEBNOSTI UOUO-a OVACA

d t k ij estrusa detekcija t samo uz prisutstvo ovnova razlozi zbog kojih se U U.O. O ovaca u svijetu manje primjenjuje: skuplje od pripusta -trokovi manipulacije p j sa sjemenom j i postupka UO ovaca (prijevoz, boravak na panjacima panjacima, hvatanje ovaca, detekcija estrusa itd).

Organizacija UO ovaca ORGANIZACIJA J UO OVACA

Poslije j odbia j janjadi j iz stada izluiti bolesne i j jalove ovce Poboljati j prehranu p 30-60 d p 30prije j sezone mrkanja j iu srpnju treba odvojiti ovnove iz stada Organizirati manje stanice za U.O. gdje emo uzimati, ocjenjivati i razrjeivati sjeme ovnova, a ujedno pronalaziti ovce u estrusu i osjemenjivati p j j ih.

ORGANIZACIJA J UO OVACA

Da bi se tijekom j sezone mrkanja j UO moglo g nesmetao odvijati, treba osigurati dovoljno trave za hranu

Oko stanice za UO do sezone mrkanja zabraniti ispau Potrebno osigurati 2 ovnaovna-probaa na svakih 100 ovaca (najbolji ovnovi s izraenim libidom u dobi od 2-4 god.)

ORGANIZACIJA J UO OVACA
Ovan proba

P ib za U.O. Pribor U O ovaca

ORGANIZACIJA UO OVACA

prisutni znakovi estrusa, kroz otvoreni spekulum uvlai se pipeta za UO -v vrhom ho se ulazi u azi u vanjski va js i cervikalni ce vi a i otvor otvo 11 -2 c cm ili dublje (bolji % koncepcije)

Problem: - ulaz u portio vaginalis cervicis oteava divertikulum (pokri a ulaz (pokriva laz u cer cerviks) iks) - teko duboko i/cerv. UO

DOZE ZA UO OVACA
Doza za ovce: 0 1 mL 0,1 L nerazrije ij ene, ili 0,2 razrijeene svijee sperme sperme. . Dvizice: vrlo uzak ulaz u vaginu, teko im stavljamo spekulum UO intravaginalno veom dozom Doza: 0,2 0,2-0,3 nerazrijeene ili 0,4, -0,6 , razrije j ene sperme. p 0,4 DOZA ZA UO MORA SADRAVATI MIN MIN. 50-150 MILIJUNA SPERMIJA.

UO OVACA SVJEOM SPERMOM

Ovce u estrusu osjemenimo i oznaimo bojom. Ukoliko se i dalje mru ponavljamo UO za 24h Najbolji rezultati UO postiu se kada je u vagini vea koliina bistre sluzi. Oekivani uspjeh koncepcije razrjeenom svijeom spermom varira izmeu 65 i 80%.

UO OVACA DSS -om UO ovaca DSSDSS

U.O. ovaca DSSDSS-om aplikacija kroz cerviks: cerviks: - loa koncepcije i - Malo janjenja (25(25-40%). U praksi: Laparoskopska intrauterino aplikacija DSS u oba roga

UO OVACA DSS -om UO ovacaDSSDSS

ovce moraju biti bez hrane i vode najmanje 12h prije UO

postotak koncepcije p p j ij janjenja j j znatno j je bolji, j , ak 60 do 70%. Dakle, podjednako rezultatu ostvarenom uporabom svjee razrijeene ili nerazrijeene sperme. sperme

UMJETNO OSJEMENJIVANJE KOZE KOZA

UMJETNO UMJETNO OSJEMENJIVANJE OSJEMENJIVANJE KOZA KOZA

prirodno parenje: 1 jarac / 3030-tak koza ejakulatom j k l jarca j UO nekoliko k lik stotina koza Z UO k Za koza d danas se u svijetu ij t uglavnom upotrebljava DSS jareva aplicirana duboko intracervikalno.

ORGANIZACIJA UO koza ORGANIZACIJA J UO KOZA

vanjski znakovi estrusa su vidljivi estrus traje j due nego g kod ovaca UO se obavlja na poziv vlasnika slino kao UO goveda

UO KOZA

Postupak DSDS-a jarevog sjemena razlikuje od postupka smrzavanja sjemena ovna E i f Enzim fosfolipaza f li (b lb (bulbouretralne l lij lijezde) d ) - koagulira umanjani razrjeiva i - hidroliza lecitina do masnih kiselina i li l iti (tete lizolecitina (t t spermi) i)

UO KOZA

Prije razrjeivanja sjemena s razrje j i ivaem koji k ji sadri d i umanjak j k iz ejakulata se mora ukloniti! ili Razrje j ivai za j jarevo sjeme j se zasnivaju se na obranom mlijeku u kojem spermiji mogu preivjeti bez problema.

DOZE ZA UO KOZA
DSS smrzava se u: - minipajetama 0,25 mL ili - midipajetama 0,50 mL. DSS (1 doza) nakon postupka smrzavanjasmrzavanjaodmrzavanja mora sadravati najmanje 50 milijuna progresivno pokretljivih spermija. ij

ZNAKOVI ESTRUSA ZNAKOVI ESTUSA

Koze imaju izraenije znakove estrusa:

nemir meketanje nemir, meketanje, vrte repom, repom skau na druge koze, gubitak apetita smanjena proizvodnja mlijeka esto mokrenje i defeciranje

ZNAKOVI ZNAKOVIESTRUSA ESTUSA

stidnica hiperemina, edematozna i vlana iz rodnice se cijedi manja kol. bistre, viskozne ik sluzi, l i prema kraju k j estrusa postaje j sve gua i mutnija Estrus traje j 3030-40h,ovulacija , j 1212-36h od poetka Koze UO 1818-24h nakon to smo uoili vanjske znakova estrusa

UO KOZA
Za U U.O. O koza tekuom spermom koristimo: koristimo:
-

staklenu (plastinu) pipetu plastinu brizgalicu od 1 mL (meusobno spojene kratkom gumenom cijevi)

UO KOZA
-

Poslije svakog UO pipetu treba prebrisati vatom natopljenom p pj u 75%75%tnom etilnom alkoholu preporuuje se i zamjena pipete steriliziranom poslije svakih 5 UO

UO KOZA

izvor svjetla na glavi osjemenjivaa ili spekulumu. k l

osjemenjiva kroz otvoreni spekulum uvla l i pipetu i t kroz k vanjski j ki cervikalni ik l i otvor najmanje 11-2 cm u cervikalni kanal ili kranijalnije (bolja koncepcija) DOZA: Aplicira se 0,1 mL nerazrijeene ili 0,2 mL razrijeene sperme.

UO KOZA

Najbolji rezultati UO postiu se kada u rodnici ima vea koliina bistre sluzi. Za U.O. DSSDSS-om jareva upotrebljavamo pistolet krai od onog za U.O. krava

K Koncepcija ij nakon k osjemenjivanja j ji j k koza: - svjeom, razrijeenom spermom oko 75% - DS sjemenom oko 65%

UO KOZA

DSS smrznuto u mini ili midipajetama idi j aplicira li i se duboko intracervikalno. U j h UO ovisi Uspjeh i i o nizu i razliitih initelja, kvaliteta sperme. Smatra se da najkvaliteniju spermu imaju i j j jarevi i u dobi d bi izmeu 2 do 3 godine.

UMJETNO OSJEMENJIVANJE KONJI KONJA J

UO KOBILA UO KOBILA

U svijetu se provodi godinama. Neke konjogojske j g j udruge g dozvoljavaju j j U.O. samo sa svjeom razrijeenom spermom na mjestu j p poluivanja j druge dozvoljavaju i uporabu svjeeg transportiranog sjemena i DSS elitne udruge, engl. punokrvnjaka ne dozvoljavaju U.O. osim iznimno, u sluajevima kada je to medicinski indicirano

ORGANIZACIJA UO UO KOBILA KOBILA ORGANIZACIJA

tehniki zahtjevnija zbog kompliciranijeg postupka poluivanja ejakulata sjeme j nekih p pastuha ne p podnosi smrzavanje (individualna predispozicija) kobile bez pastuha ne pokazuju uoljive znakove k estrusa,estrus t t traje t j dugo d svakodnevni svakodnevn i rektalni rektalni pregled jajnik jajnika a

POSTUPAK SA SJEMENOM POSTUPAK S EJAKULATOM

Ejakulacija frakcionirana Procijeivanje ejakulata (samo 1. 1 frakcija) Nerazrijeeno odmah potroiti Razrjeeno na 4 4C do 48h (72h) Moe i DSS

UO KOBILA KOBILA UO

Veina se autora slae da je uporabom DSS uspjeh p j nii. koncepcije Doza razrijeenog sjemena za UO iznosi 10 do 20 mL s 200 do 400 milijuna spermija.

UO KOBILA TEHNIKA UO KOBILA

Kobile sputane p ili smjetene j u stojnicu. Stidnicu oprati i dezinficirati. Nakon pranja i dezinfekcije stavlja se vaginalni spekulum i kroz cervikalni kanal uvodi sterilan kateter u maternicu.

TEHNIKA UO UO KOBILA

Jednostaniji nain Kateter uvodimo rukom na kojoj je sterilizirana rukavica (lubrikant) Ruku u ijoj aci se nalazi vrh katetera guramo do pred cerviks cerviks. Prstom uvoaom pronalazimo P l i ulazak u cerv. kanal u koji guramo k kateter sve do d 10-tak 10 k cm u corpus

UO KOBILA KOBILA UO

UO intrauterino. Sjeme se aplicira pomou staklene ili plastine brizgalice zapremine 30-50 30 50 mL izravno u corpus kroz gumeni ili plastini kateter. Ejakulatom UO 8-40 kobila Poslije UO uz obaveznu kontrolu ovulacije folikula, primjenom - svjee razrijeene sperme gravidno preko 50%, - ohla hl ene 25-40%, 25 40% - uporabom DSS rezultati su 35-45%.

SVINJE UMJETNO OSJEMENJIVANJE SVINJA J

UO UO SVINJA SVINJA

U nas od 60-tih, a u svijetu od 30-tih godina 20 stoljea. 20. a Danas UO uglavnom D l jedini j di i nai in rasploivanja svinja na farmama Europe 2 problema: 1. otkrivanje estrusa, 2. kratko vrijeme ij preivljavanja i lj j sperme in i vitro i (osjetljivi ( j lji i smrzavanja/odmrzavanja) Za postizanje zadovoljavajueg uspjeha k koncepcije ij i veli liine i legla l l poeljna lj su viekratna UO razrijeenim sjemenom

ORGANIZACIJA ORGANIZACIJA UO UO SVINJA SVINJA

1 Nerasti u centru 1. centr za UO - sjeme se alje na teren. 2. Velike farme. Farma s vie od 500 krmaa sama organizira centar gdje se poluuje, uje ocjenjuje i razrjeuje ejakulat 3. Centri za razmnoavanje svinja pri vet. stanicama Sj Sjemenom nerasta moe se UO 8-14 8 14 krma k a.

POLU IVANJE EJAKULATA POLU IVANJE EJAKULATA

Ejakulacija traje dugo Poluivanje sjemena svakih 5 5-7 7d manualnom fiksacijom penisa Kad se frakcije pomijeaju u ml ejakulata j k l nalazimo l i 150-250 150 250 milijuna ilij spermija. DOZA mora sadravati najmanje j j 2 do 3 milijarde spermija u 100 ml

RAZRJE IVA RAZJE IVA II

helatonski razrjeivai (3dana) Zorolesco 5 dana, Beltsville 4 dana uz uvanje na temperaturama od 12 do 24C.

Postotak P t t k suprasnosti pr n ti nakon n k n UO svjeom spermom iznosi: za krmae 75% i vie, za nazimice i p prvopraskinje p j 70%,(9-11 ,( prasadi)

UO DS NERASTA UO DSS
Glavni problemi prilikom DS sperme nerasta su: a) razrjeivaima na bazi umanjka ili obranog mlijeka ne postie se razina zatite od temperaturnog oka b) glicerol najbolji krioprotektor sperme nerasta no toksini uinak izraeniji nerasta, nego na spermije drugih vrsta; c) postupkom DSS nerasta oteuje se 4060% akrosoma, akrosoma dok je u tekuoj spermi % neznatan

VRIJEME ZA UO UO VRIJEME ZA

Estrus traje u prosjeku 53 sata, ovulacija se odvija prosjeno 36 3644h nakon poetka vanjskih znakova estrusa. estrusa aktivni refleks opasivanja. pasivni i i refleks fl k opasivanja i j (najpovoljnije vrijeme za UO) Otkrivanje nerast proba i razli liiti i i testovi i

TEHNIKA UO SVINJA UO SVINJA

Dvokratno UO u razmacima od 16 do 24h

PSI UMJETNO OSJEMENJIVANJE PASA

UO KUJA UO KUJA
Indikacije za UO kuja su: partner visokovrijednih kuja ne moe obaviti koitus

partneri meusobno vrlo udaljeni (najee razliite drave), a vlasnik eli osjemeniti kuju iz uzgojnih g razloga mladi i neiskusni partneri steene malformacije vagine

OPIMALNO VRIJEME ZA OPTIMALNO VRIJEME ZAUO UO

Vaginalno-citoloki bris Vaginalno(min. 80% kornificiranih epitelnih i l ih stanica) i )

Odreivanje razine progesterona

DOZAZA ZA UO DOZA UO KUJA KUJA

najmanje 100 milijuna spermija (o tome ovisi uspjeh UO i br. tenadi)

koliine manje od 2 mL neprikladne p j , dio ostane na stijenkama j za aplikaciju, brizgalice i pipete

TEHNIKA UO KUJA UO KUJA

Intrauterino Nerazrjeeno odmah Razrjeeno za 48h DSS- skandinavskim DSSkateterom

DS SPERMA UO KUJA DSSDSS-om

Doza DSS za osjemenjivanje iznosi 2 do 2,5 mL s p p priblino 2 x 108 spermija. p j ukupno Ukoliko Uk lik je j progresivna i pokretljivost k lji preko k 50% sperma dobra, oko 50% sperma prosjene kvalitete, ispod 50% loa.

HVALA!!!