\ .

HUMANA GENETIKA
-REPETITORIJUM-


l
-. ·1 ....
N
·j
_
I · AZOTN-f!t-Mf'atqdze

E){!IS .
UN


o-J
>!NO


I! C.
·- C=O

Nil
Jll
e . . . N .
£i· ;;
hr..,..,'!:-. ? ..
t

-,
Humana genetika- Repetitorijum
· 1. Molekul DNK kao nosilac geneticke informacije
DNK molekul predstavlja naslednu osnovu svih zivih bica, osim nekih RNK virusa (slika 1).
U redo·sledu nukleotida (sekvenci nukleotida), determinisana je nasledna osnova koju obezbeduje DNK
Naime, nukleotidi koji su organizovani u grupe od po tri (tripleti . nukleotida), nose sifru (kod) za
odgovarajucu aminokiselinu. Neke aminokiseline kodirane su od strane samo jedhog 'tripleta. Metionin je kodiran
od strane T AC tripleta, a i triptofan od strane ACC tripleta. Ostale aminokiseline sli kodirane od strane dva ili vise
tripleta DNK nukleotida (arginin je kodiran sa sest tripleta DNK nukleotida). Grupisanjem vise tripleta nukleotida u
jedinstvenu DNK sekvencu obrazuje se gen. Gen je deo molekula DNK koji je odgovoran za sintezu odredenog
proteina preko razlicitih RNK molekula koje takode kodira (iRNK, rRNK, tRNK, snRNK). Nasledna osnova
ogleda se u principu osnovne dogme molekularne· biologije koja glasi da se ·sa molekula DNK, u procesu
transkripcije sintetise iRNK, koja procesom translacije u kome ucestvuju sve RNK, daje odgovarajuci
protein. Za ovaj princip postoji izuzetak koji je uocen kod porodice Retroviridae, pri cemu virusi iz ove porodice uz
pomoc enzil:na reverzne transkriptaze vrse sintezu DNK molekula na osnovu RNK matrice koja cini osnovu njihovog
genoma. Pretpostavka je da je RNK na pocetku evolucije vrsila ulogu i RNK i DNK molekula.
2. Struktura molekula DNK i RNK
Molekul DNK predstavlja jedan od najvecih makromolekula u prirodi Uedna celija sadr:Zi cak 2m DNK).
U sustini DNK je polimerni makromolekul, sacinjen od nukleotidnih monomera, koji su polimerizovani preko
fosfodiestarskih veza, i koji se teoretski mogu kombinovati u neogranicen broj varijanti.
Nukleotidi DNK molekula sastoje se od dva organska i jednog neogranskog jedinjenja medusobno povezanih
specificnim hemijskim vezama (slika 2). Organska jedinjenja u DNK. nukleotidu su pentozni secer
2-dezoksiriboza koja se nalazi u enolnom obliku kao a drugo jedinjenje je azotna
baza. Azotne baze klasifikova_rie su· u dve grupe prema tipu heterociklicnog prstena koji sadrie. Prva grupa je grupa
purinskih baza (sadrii purinski heterociklicni sistem), kojoj pripadaju adenin (A) i guanin (G) (slika 3). Druga grupa
je grupa pirimidtnskih baza kojoj pripadaju timin (T) i citozin (C) (slika 4). Azotne baze se za C-atom secera na
polozaju jedan povezuju glikozidnom vezom, pri cemu se kod purinskih baza za prvi ugljenikov atom
2-dezoksiriboze, vezuje azotov atom na polozaju 9 azotne baze, a kod pirimidinskih baza za prvi ugljenikov atom 2-
dezoksiriboze, vezuje azotov atom na polozaju 1 azotne baze, Kompleks secer-azotna baza naziva se nukleozid.
Neorgansko jedinjene koje ulazi u sastav DNK nukleotida je fosforna kiselina koja preko svoje -OH grupe, sa
. vodonikovim atomom na polozaju 5, 2-dezoksiriboze gradi estarsku vezu, _pri cemu je esterifikacija ·pracena
oslobadanjem jednog molekula vode. U okviru molekula DNK postoje cetiri tipa nukleotida (nukleotid adenina,
- timina, . .,.gtlanina, .. dtozina), ..• • .medus.obno.,.p.t)v . .ezuju .. losfodi.estarskiJ:n, N.ezama ..• Fosfodlastarska .. v.ez.?-
nastaje kada ·fosforna kiselina esterifikovana za 5C-atom .secera, otpusti koja ce sa -H atomom koji je
otpustila -OH grupa vezana za 3C-atom secera susednog nukleotida nagraditi molekul vode i formirati estarsku
vezu. S obzirom da sad a molekul fosforne kiseline preko kdga je izvrseno povezivanje dva susedna nukleotida u
dinukleotid, na sebi nosi dve estarske veze Uedna za 5C-atom secera, a druga za 3C-atom secera susednog
nukleotida), veza je po tome dobila ime fosfodiestarska veza. Kao posledica stvaranja fosfodiestarske veze na
jednom ktaju polinukleotidnog..lanc;a (od koliko god se· on nukleotida sastojao), os'tace 5' kraj, a na drugom kraju
3' kraj . .Takozvani skelethi deoOo:moiekula DNK cine 2-dezoksiriboza i fosforna kiseliria koja je za nju esterifikovana, i
on je uvek konstantan, 'tj.' ne p_odleze varijacijama. Specificni deo molekula DNK cine azotne baze, jer. ih ima 4, pa
samim tim i 4. tipa nukleotida. lanae cini primarnu strukturu . DNK molekula. Sektmdarnu
strukturu .DNK molekula cini..dvostruki heliks (sli.ka 5) .. Heliks predstavlja vezu dva polinukleotidna lanca, koja se · ·
ostvaruje preko vodonicn.ih veza po principu komplementarnosti. Nalme, pravilo komplementarnosti se odnosi na
cinjenicu pa se adenin iz-nukleotida jednog polinukleotidnog Janca povezuje sa timinom iz nukleotida drugog
polinukleotidnog I an ea gradenjem dve intermolekulske vodonicne veze. · Guanin i citozin se na isti nacin
komplementarno pqvezuju samo .sto se. za razliku od AT baznog para, izmedu ove dve azotne baze obrazuju tri
intermolekulske vodoriicne veze. Direktno iz pravila komplementarnosti vazi i Cargafovo pravilo koje kaze da je ·u
okviru DNK molekula uvek jednak kolicinski odnos purinskih i pirimidinskih baza A+G = T Za molekul DNK se
kaze da je antiparalelan, jer je u okviru heliksa jedan' polinukleotidni lanae orijentisan u ·smeru 5' • 3', a drugi u
smeru 3' • 5'. S obzirom da postoji slobodne rotacije oko fosfodiestarske veze (prostorne konformacije),
1
HISTONI j
• J::l


·


.


Slika 6 - Struktura hromatina
. '
- rastr..Sit u interfazi
- rano se replikuje u S fazi
- kodirajuce sekvence
- nesto bogatijl G-C parovima ·' ··
I; I-; i ;{·i,)t-W:Ji4§43%trf3
7
kondenxovan u interfaxi
- kasno se ·replikuje u S faxi ·
- nesto bogatiji A-t parovima
Konstitutivni:
a) centromemi - visoko repetitivne sekvence
b) lnterkalarni - srednje repetltivne sekvenee
Fakultativni:.
inaktivni X h.romox
0
m (Barovo
Slika 8- Tipo\:'i hromatina
.,
Slika 9 - Hromozom (SEM)
: .
'
1 1 rtrn
t
t
:So nrn
1
T
ZOO nm
J.
. .
..
. , .
I
'70(• nm
I

.• = . .}
--··-- .. ... ...... _ .. ···- ·· ·· -· - .... --------------------------·-·------------- --·-·-· ·--- .. ----------------··· ·-
Humana aenetika - Reoetitorijum
. .
te pojave ONK ima oblik spiralno uvijenih merdevina, pri cemu svaki deseti nukleotid stoji u centralnoj
osi, a rastojanje izmedu pomenutih rukleotida !znosi __ 3,4 _nm. dya nukleotida iznosi 0,34 nm.
Sirina heliksa iznosi 2 nm. · : .'·. · : :· . · .· . . .
Molekul RNK ·se javlja u cetiri osnovna oblika (kao i u mnogim iRNK, rRNK i snRNK ion je za
razliku od molekula DNK jednolancan· i mnogo podloi:niji konformacijama aka fosfodiestarske veze, sto za posledicu
ima ogromnu raznovrsnost u prostomom izgledu RNK molekula (linearan, .trofisna detelina_.:.): Jedna od razlika· ·
izmedu DNK i RNK je ta sto se u molekulima na mestiJ iu:acil :su:·(.
isti kao i u molekulu DNK (glikozidna, estarska, -fosfodiestarska, vodonicna). Jos jedna od razlika izmedu DNK i RNK . . ·
je ta sto se u RNK molekulima nalazi drugi tip seeera pentoze po kojoj Je RNK i dobDa ime, a toje riboza (koja 'se ·. , _
nalazi u svom ciklicnom enalnom obliku kao beta-0-ribofuranoza). lnformac_iona · RNK nastaje_ u .
transkripCJje, pri 9emu ona nasi sifru (kodon) za sintezu je po kodu·'.·:. -:i ..
na DNK molekulu. Transportna· RNK ima ulagu da u procesu translacije, dopremi odgovarajtiee aininokiseline· do· .
ribozoma uz pomoc enzima aminoacil-tRNK i da prepozna sifru na iRNK (antikodon). Antikodon Oje po _"; :
istom principu komplementaran kodonu na iRNK. Ribozomalna RNK (rRNK) ueestvuje u . male i velike .. _ .
subjedinice prokariotskih i eukariotskih ribozoma Mala jedama RNK (snRNK), vezuju odredenu grupu proteina · ..
farmirajuci male ribonukleaproteinske cestice, koje ucestvuju u pasttranskripcionoj mOdifikactji ostalih RNK >.
3. Hroinatin
•r, ', •,
Hromatinom se u si rem smislu i materijal· celije u· mirovanja
tj. interfazi celijskog cikh.Jsa; su ]ednini ·svojim krajem vezane za . membranu · ·
· :. :_ . · __ · .. ...... -1:.:.: · • . . . . ·: . ' • .
DNK malekuli ·se ne nalaze l! qbliku_ koji predstavija nuldeoproteinski kompleks
(slika 6). Molekuli DNK se-preko, sa ·baznim proteinima, histonima, koji se
odlikuju po tome. sto · u _ svojoj ':Sadrie veliku . .koliCinu . liziri? . i · arginina. Oktamersko
histonsko jezgro sastoji se od cetiri duriliraria 'tipa .. ·histona {H2A; H2B; H3, H4), :oko koga se namotava DNK ·'Jff-:
heliks. Ovakva struktura naiivase nukleozom sadrZi DNK duiine oko 200 baznih parova (bp).lzmedu dva
nukleozoma nalazi se /iriker'{vezna) duiina iznasi 20-60 bp. Vise nukleozama se uz
pomoc H 1 his ton a specificno organizuje .. u · strukturu, pri .cemu se ilUkleozomi gusto . ..sabijaju cik-cak
konfonnaCJjom. obrazuju petlje; petlje a_niti formiraju hromozome (slika 7).
Kada se jedro posmatra:·pod :se ·uociti tamnija· i svetlija palja u njemu (slika 8)>
Heterohromatinska: (tamna) . polja: su kondenzovani segmenti koji se u . S · fazi kasno .repliciraju i .. · ..
inaktivne· sekve·nce · DNK. Postoje · dva: .tipa -heterohromatina, a to su konstitutivni i fakultativni. .
Karakteristika konstitutivnog heterohromatina je ta, stO se on nalazi u svim hromozomima u razlicitim kolicinama
i (pri eemu polazaj i koftci_na mogu davariraju u_ razliCitim tipovima eelija i u razliCitim etapama Zivqtnag
ciklusa, pa'cal< T oa'·se··oraZiiktijC(rrteou·cianOvima 1mrno1ogog -parcrllromozorr.a;··stc •tlglav:'lcm-·;cavisi:-os
datog regiona DNK): . ·: : , . · , .,. · ' · :·· ... - ·: · · · . · .
Fakultativni heterohromatin predstilVIjainakfiVI1i otilil( nekih: a kao primer se navodi inaktivisan X· 3{
hromozom ( Barovo tela ), u somatskim celijama.zenskih jedinki sis·ara/:· . , '.- · .. 1. , .::. : < .:_,,:: :_. · .
u euhromatinskim (svetlim) poljima odvijaju se p.rocesi replikacije i geriske ekspresije i ta poija su izrazitija u .
celijama koJe su intenzivn·o sintetski aktivne (Zlezdane celije,·niakrofagi, svanove celije itd.). . .
· . 4. · Hro.mozallli.
• .. . .
,• ;,: '
drugiiciju org.anizaCiju 'koJa s'e fazi -deobe. (slika 9}:
Hromozomise na pocetku celijske deobe ·skrilttiju, kondenzuju 'i poprimajuobliktipiean za· vrstu. Najkr,aci su u
metafazi eelijske deobe .. Svaki hromoiom sastoji ad. primame konstrikCije (centromera}, sekundarne
konstrikcije (satelitna DNK) i matriksa. · . · · · · . · . · · .
. Matriks se sastoji od proteina (histona i nehistona). Svak! hromoi:om se sematski _prema poloi.aju centromera
deli na p·i q krak, a centromera .i pericentromerni regio·n (kaji ·se nalazi u blizini centomere) se ·sastoji od visoko
repetitivnih sekvenci (sekvence odoko 170 bp ·koje ponavijaju veliki broj puta). Uloga centromere je da
u sa nitima deobnog vretena abezbedi pravilnu segregaciju (razdvajanje) homologih hromozoma u deobi.
Celu celiju ispunjava citoskelet koji u regia nu centromere cini specificnu strukturu nazvanu kinetohor, preko koga se
2
GEN
nomatrit.ni l:an:t(
.. ::;
promotor RNK sekvcnca·
matriCni
· · · • mesto otpoclnjanja
transkrlpclja
termin01tor
mes.:o Z"3Yr$.etkn
t.ran:;kripeije
', .......... , .: ..,
: Proseeno 10.- 15 Kb HISTON H4 -1Kb. OISTROFIN
u ko,..;laciji sa velicinom gena gen za distrofin 79
(apoB gen 7.6 Kb)
· . u korelaclji sa velicinom gena (od o.s- 30 Kb)
. •.; ·.,..:.r.r.·•· ·· -: ; · -: ·1' 1, !-
2500Kb
Slika 10- Humaoi.hromozomi (FISH) Slika 11 - Struktura gena

... , ·.,;..
i·': r.pt-1 ;l,. '·1 :qt!j
;
: Bro) ...,..lt;ltlh
DN)(tnolekub
Bro) DN.C rnolekula
poc•IIJI ·
DNt( • protelnl
broJs•n•
re.,..tltlvna ON)(

lntronl
· % "ocUr:.juC• .DNJ(
.. lfra
Slika 12- Humani genoni
dtmna 1 000 - 200000 tip· · .
·: :· • ·: · .. • : ..

.. duZina :, •.
10-10
1
· ·
' . .. . ..: : .
M!Oi·IG·i,i:l&,MI#kiaMaMWf@J!VS

5:..,10 bp
vlse od 10
5
koplja
heterohromatin ·

'
.. !·
r • .
Slika 13 - Osnovne sekvence eukariota
..... ..
.. "·• ; .... • • • • • • • ... -=--..------ ....,. __ , - L • · --·• , ... __ •' -···•--- - -
· Human a genetika - Repetitorijum
hromozomi povezuju za niti deobnog Telomerni regioni se nalaze na i sastoje se
od velikog broja tandemskih repetitivnih (TI hn.eaml
i nakon svake replikacije se skracuju, tako. da _najverovat.mJe cme_ de? b1oloskqg casovmka duzmu
zivota svake vrste. Pri gubitku telomernih regiona, lineam1 hromozom1 mogu da se transform1su u nng hromozome,
sto za posledicu ima njihov gubitak u toku deobe i materijala koji nos:: telomere
su sekvence koje se nalaze unutar hromozoma, ah u slucaJU prek1da hromozoma mogu vrs1t1 funkCIJU telomera.
Postoje i enzimi nazvaili telomeraze koji_ reguli.su regiona ali same u malom_.broju
celija kao sto su gameti, celije embriona do kraja blastOCIStnog razvoja I polne gonade tokom celog ZIVOta. Moguce J8
.da .telomere i telomeraze ne regulisu duzinu zivota neke celije, ·vec im·daju mogucnost beskrajnog umnozavanja
. (npr. umnozavanje spermatozoida tokom celog zivota domacina iz primordijalnih germinativnih celija). Metafazni
hromoiomi (tada su hromozomi najdiferenciraniji), sastoje se od dve iste hromatide, pri cemu se u svakoj hromatidi
nalazi jedan molekul DNK.
U jedru svake somatske celije nalazi se 46 hromozoma, tj. 23 para homologih hromozoma (slika 10). Jedna
hromozomska garnitura (23 hromozoma}, potice oca, a druga od majke. Od 23 para, 22 su autozomi
(telesni,somatski hromozomi), a 1 par _su gonozomi (polni hromozomi). Muskarci poseduju hromozomsku garnituru
46, XY, a zene hromozomsku garnituru 46, XX. Po"red podele hromozoma prema funkciji na autozome i gonozome,
druga podela izvrsena je prema izgledu. U zavisnosti od duzine p kraka hromozomi su podeljeni na metacentricne,
submetacentricne, akrocentricne i telocentricne hromozome. . . .
Metacentricni hromozomi imaju jednaku duzinu p i q kraka, submetacentricni nesto kraci p od q kraka, akrocentricni
imaju mnogo kraci p od q kraka, dok kod telocentricnih hromozoma ne postoji p krak. Kod coveka su zastupljena
samo prva tri tipa hromozoma {metacentricni, subinetacentricni i akrocentricni): . .
Skup hromozoma neke celije ili organizma opisan brojem, velicinom i konfiguracijom hromozoma naziva se
kariotip. Kariogram predstavlja materijalnu tvorevinu, koja se dobija kada se hromozomi fotografisu pod
mikroskopom u metafazi, iseku i sortiraju u · grupe, na osnovu' l)avedenih osobina. Idiogram predstavlja
sematizovan kariotip u obliku dijagrama: Genom predstavlja gametsku garnituru hromozoma ( 22 + X ili Y),
odnosno gena. Proucavanjem hromozoma se bavi citogenetika. Da bi se izolovali humani hromozomi i potom
proucavali postoji vise nacina, ali je najprostiji i nafieftiniji nacin kultura limfocita periferne krvl..[vletoda se sastoji
od nekoliko etapa, uzima se uzorak periferne krvi u kojojse nalaze limfociti (koji.se dele ekvacionim deobama) i krv
kultivise uz dodatak biljnog mitogena (stimulator:deobe) fitohemaglutiniha; pri cemu se smesa inkubira oko 72 sata.
Posle tog vremena dobija se .veliki broj celija koje su usle u mitoticku U ovakvo pripremljen preparat dodaje
se alkaloid kolhicin koji blokira. formiranje deobnog · vretena; pa se na taj nacin celije zadriavaju u stadijumu
metafaze; kada· su hromozomi najkondenzovanijiJ najpogodniji .za proucavanje. Celije se potom uvode u
hipotonican rastvor KCI, cime se razbija celijska·membrana i posebnim nanosenjem na staklenu plocicu izbegava
preklapanje hromozoma. Preparatu se dodaje fiksator i odgovarajuca boja (veliki broj tehnika i boja primenjuje se
za vizuelizaciju celog hromozorha ili nekog njegovog a nakori toga se hromozom.i slikaju, sa slike se seku
i slaze se kariogram,. , . . ·: .. . . . . . . ., . · . · . . · . ·,
5. Organizacija genoma
• ... • • I
.Genom predstavlja kompletnu naslednu informaciju nekog organizma, tj. skup svih gena, koji se nalaze u
. haploidnom setu gameta. Svaka vrsta ima specifican genom ij. broj hromozoma, velicinu DNK molekula, broj gena
i mesto gena (genski ·lokus). Raspofed svih gena na hromozomima naziva se genska mapa koja "je razlicita kod
svake vrste, pri cemu je kod vrsta iz istog roda yrlo slicna (covekov i simpanzin genom pokazuju oko 95%
homologije). , . ·. · .
Gen predstavlja segment- DNK molekula, · ciji redosled riukleotida odreduje sekvencu aminokiselina u
polipeptidu ili kodira odredenu RNK (oko 10% gena)(slika 11 ). U sastav.gena takode ulaze i regulatorne sekvence
koje omogueavaju da dode do transkripcije, .i koje na odredeni naciri modulisu gensku ekspresiju. Genom coveka
sadrii oko 30.000 gena (slika 12). Svaki gen se sastoji od kodirajucih i nekodirajucih sekvenci DNK nukleotida
(slika 13). Zapravo vecina gena coveka sadrii nekodirajuce sekvence nazvane introni, koji se prepisuju na RNK, ali
se u posttranskripcionoj modifikaciji (splajsovanje) gube i ostaju samo kodirajuce sekvence nazvane egzoni. Mada
· treba naglasiti da se_ odredeni introni, iako pripadaju nekodirajucim sekvencama ponasaju i kao regulatori genske
ekspresije. Od ukupne duzine genoma coveka oko_ 3%. cine geni; dok je ostalih 97% u vidu repetitivriih
sekvenci. U genomu eukariota definisane su tri vrste sekvenci. Jedinstvene {sing/e) sekvence su one koje se .·
javljaju u same jednoj kopiji u haploidnom genomu, pri cemu ove sekvence u procesu transkripcije kodiraju iRNK.
. 3

{ .
··:.
.:.
· Slika 14- Opsta shema replikacije
.. ·
' · . · · ~ . ~ ~ i ; ; '"
·: .! ;:'
i....'...:.t· (
3'
J.
5'
Slika 15 - Replikaciona viljuska (Y -fcirmacija)
:::.
.. . . .....,._ ... _ .. ··-·--- ...... ---- ·--··-·----··--··· ; .. . ... . .
Humana oenetika- Reoetitorijum
lntermedijerne repetitivne sekvence se u 10-_105 kopija u genomu. Ove sekvence grade gene koji kodiraju .
tRNK, rRNK i iRNK odgovorne za sintezu histonskih proteina (H1, ti2A, H28, _H3, H4).-0ve sekvence se nalaze
izmedu single sekvenci, pa se drugacije riazivajy spejseri.(spa_cer) i ulogu u regulaciji genske ekspresije ;
kontroli transkripcije single sekvenci (npr. enhancer-i koji pojacavaju ekspresiju gena). U okviru svakog gena se
nalaze start i stop sekvence koje iniciraju, odnosno blokiraju translaciju·, jer njihovim transkribovanjem nastaju start i
stop kodoni na iRNK. Takode su bitne.i promotorske .sekvence (GC; CAAT i TATA box), koje omogutavaju
vezivanje RNK polimeraza. Visoko repetitivne se javljaju u prek() 19
5
kopija i cesto se oznacavaju kao
satelitna DN.K. Ovaj tip sekvenci.u genomu eukariota gradi eemtromeru_ i pericentromeme regione hromozoma .. ·.
U genomu coveka zapazena je velika grupa izuzetno slicnih DNK sekvenci, koje su nazvane familije g·ena. .
U humanom genomu najpoznatije familije gena su familije globin-kodirajucih gena koji se nalaze na ·
11 i 16. Najveta familija gena u humanom genomu je superfamilija imunoglobulina,koja kodira lake i teske lance
imunoglobulina (hromozomi 2,· 14, 22), kao i familija gena (na hromozomu 6) koji grade MHC-Iokus (major
histocompatibility complex), tj. glavni kompleks tkivne podudarnosti. · ·. ·
u cefijama coveka pored genoma koji se nalazi u jedru (nuklearni genom) i koji cini 99,9995% ukupne
geneticke informacije, postoji i mitohondrijalni genom koji cini 0.0005% ukupne geneticke informacije. Za
razliku od nuklearnog genoma koji je linearan, mitohondrijski je cirkularan i kod coveka kodira samo 37 gena.
Njegova dui.ina iznosi 16 kbp, i jos jedna vazna odlika ovog genoma je ta sto on nije asociran (povezan) sa
histonskim proteinima. Geni u okviru mtDNK su: jedan gen za 12S rRNK, gen za 16S rRNK, dvadeset dva
gena za tRNK i trinaest gena za iRNK, koje ce translacijom dati koji ?e nalaze u mitohondrijama (ATP-aze i
drugi enzimi oksidativne fosforilacije). U f11i!ohondrijalnoj DNK je ge'netski kod jedinstven, odnosno razlicit od
genetskog koda nukleamog genoma. Postoje tvrdnje da se tokom_ evolucije vr§io transfer delova mitohondrijskog
genom a u ilukleami genom, za · sta je dokaz geri za subjedinicu .'.9 · ATP-aze · kojL se kod kvasca nalazi u
mitohondrijalnom genomu, a kod coveka u hukleamom genomu. Mitohondrijski genom se nasleduje matroklino
(preko majke), pri cemu je ovo jedan od primera :odstupanja od··mendelskih pravila nasledivanja. Neke ... _
nasledne bolesti vezane su za nasledivanje mtDNK . · ;1£ · i?f·:
6. Replikacija ·
Pod lerminom replikacija podrazumeva .se.- proces .. •udvajanja molekula DNK, pn cemu se dobijaju dva
Jdenticna novonastala, DNK:hefiksa (slika .D.NK.jejedin:Lmolek.ul (zanemarujuci RNK nekih virusa) koji je
sposoban za autoreprodukciju ·osnovu ·koniplementamog; .. prtmia· sopstvenoj ·
matrici), a taj proces ..omogucavaju brojni enzimi i ·pomocna jedinjenja. Replikacija se odvija u S fazi zivotnog
ciklusa celije, u regionu euhromatina. Za replikaciju DNK molekula kaze da je semikonzervativna, zato sto se
· novonastali molekuli sastoje od jednog starog (parentalf'\og)' _i novosintetisanog polinukleotidriog lanca. Naucnici
;..-
· · Meselson i Stahl su 1958: godine dokazali ovu pojavu. Oni su jednu vrstu bakterija uzgajali na podlozi koja je .
sadriala izotop azota
15
N, dok se· kod svih baktenja u DNK nije potpuno ugradio taj izotop. Nakon toga ·
bakterije su premestili na hranljivu .. podlogu -koja .. je sadriala ,prirodan,'izotop azota·
14
N. ·Nakon prve deobe (lj. .1::... ·
Jeplikacije, jer je svakoj deobi prethodila replikacija); analizirali su pNK :cerki celija i preeiznom fizickom metodom
. dokazafi da hOVC?ilastali ·Janci DNK imaju intermedijernu gustinu. Nairrie ori( su po gustini bili izmedu DNK sa 15N i
·· pNK sa 14N, sto dokazuje da svaki novonastali DNK sadrii jedan polinukleotidni lanae sa 14N; a drugi sa 1SN.
· . Replikacija-omogucava konstantno prenosenje. na.sledne informaci)e sa roditelja na potonistvo. uz ocuvanje
genofonda. · . . . ; · :; , . . .
. .
Replikacija DNK kod .prokariota modelu Escherichiae· coli ·
Kod ·prokariotskog genoma koji je cirkularan, proces i-eplikacije -DNK zapocinje na jednom mestu i takvo mesto se
· naziva oridzin (origin) replikacije. Da bi replikaeija zapocela potrebno je da se prethodno despiralizuje DNK heliks i
viljuska (Y-formacije): Eni:im DNK topoizomeraza I zaseca (raskida fosfodiestarsku vezu)
· Jedan polinukleotidni lanae heliksa, koji potom rotira ·oko ose za 180° i na taj nacin heliks i time ·
... njegovo sabijanje u tokureplikacije. Drugi tip enzima DNK topoizomer?ia 11, vrsi privrenieno raskidanje . ;": . ·;
fosfodiestarskih ·veza na ob a :polinukleotidna .lanca .. Nakon slo su larici erlzi'm helikaza nastavlja proces .. :-:-:;
replikacije, na taj nacin sto raskida· vodoriicne veze izme'du despiralizt.ije lanae-; formira replikacionu ·: ·:"
viljusku (Y-formaciju) (slika 15). S obzirom da polinukleotidni imaju·jak afinitet'jedan prema dru_gom, u cilju da
. . . . 4
i
:,; . .t
.... ,,.


5'
3'
.
replikaciona viljuskw- s·:
I j

-
. 3'

""3'

5'
3'
Okazaki fragmenti
5'
l'
ONK POLIMERAZA Ill
'\ .
I
PRIMAZA
:
__,_.
Slika 16 Tok replikacije Slika 17- Aktivnost primaze
"PROOFREADING" AKTIVNOST DNK POLIMERAzE
·.
1· 1 r r 1
E '+:? .. 02 oH
J' Eft P£2t rl;t}l ,.&?;(' ,.)-:$ rll#q r:Wii
. ·'
('
.· 011
1 f 1 I "-::. . f'
,... g r:if.X Pllll£1 i!-jl - on -- 011
y tire;; ,.1plqc ,.UTi .. GJ Piih .
;:r.-·
.\ A <\ -' :A
-. ; .t: : i - . :. . ·.
Slika 18- :sainokorigujuca aktivnost DNK polimeraze
.
'I''.'
3'
_-.,
. '
'
5'
.··.;_
,.',_'-
:.-,:.

>.
Hum ana genetika- Repetitorijum
. .
se spreci ponovna spiralizacija i reorganizovanje heliksa, na oba polinukleotidna lanca umecu se molekuli SSB
(single-strand pinding) proteini. Za replikaeiju se takode kai.e da je semidiskontinualna, sto znaci sledece: enzimi
koji omogucavaju odvijanje replikacije vrse svoju ulogt.i u.5'- 3' pravcu.:s obzironi da je u okviru DNK heliksa jedan .
polinukleotidni lanae orijentisan u praveu 5' - 3', ·a drugi u 3' - 5', enzinii ce samim tim morati da rade u suprotnim
smerovima (slika 16). Zato se kai.e .da je replikacija semidiskontinu,alna. 'Za' po!inukleotidni lanae koji ima srrier 3'- 5',
vezuje se enzim DNK polimeraza Ill koja katalizuje (ubrzava), poliinerizadju nukleotidnih prekursora u novi lanae.
Nukleotidni ' prekursori predstavljaju slobodne molekule dNTP . (dezoksiribonukleozid 5'-trifosfate), koji. ce
polimerizacijom u polinukleotidni lanae osloboditi dve fosfatne grupe (u obliku pirofosfata) i biti .ugradeni u novi lanae
kao dNMP {dezoksiribonukleozid 5'-monofosfati). Lanae na kome se kontinualno vrsi sinteza novog lanca uz pomoc
DNK polimeraze Ill, naziva se vodeci lanae. Drugi parentalni DNK polinukleotidni lanae ima smer 5' - 3' i na tom
lancu ce se sinteza novog vrsiti u suprotnom smeru od sinteze vodecem laneu, · pa se ovaj lanae naziva
zaostajuci lanae. Na ovaj lanae se prvo ugraduje · enzim primaza·, koji dui. lanca sintetise male segmente
ribonukleotida (slika 17). 9vi segmenti sintetisanih ribonukleotida na zaostajucem lancu nazivaju se prajmeri
(pritner), koji · slui.e kao matrica, na koju ce DNK polimeraza Ill_ vrsiti dodavanje novih komplementarnih
dezoksiribonukleotida. Na zaostajucem lancu replikacija se vrsi u kratkim fragmentima (Okazakijevi fragmenti -
1000-2000 nukleotida), koji se posle spajaju u kontinualan lanae uz pomoc dejstva enzima ligaze. Pre nego sto se
izvrsi povezivanje Okazakijevih fragmenata prajmer je prethodno uklonjen od_, strane enzima DNK polimeraze I koji se
krece duz prajmera i zamenjuje jedan po jedan RNK nukleotid sa DNK nukleotidom. Nakon sto DNK polimeraza
· zameni ceo prajmer sa DNK nukleot)dima, :ana ostavlja jednolancani ; prekid izmedu zadnjeg. nuk.!eGtida·.ckoga je .
ugradila i pryog nukleotida koji je ranije ugradila. DNK polimeraza Ill iza prajmera. Ovaj prekid nestaje uz pomoc .
enzima ligaze koji na mestu prekida stvara fosfodiestarsku vezu. 'Bitnq je naglasiti da sve ONK polimeraze imaju .,
3'- 5' egzonukleaznu aktivnost {proofreading' activity). Samokorigujuca' {proofreading) aktivnost se ogleda u tome
sto DNK polimeraze ispravljaju sopstvene greske, tako sto proveravaju poslednji ugradeni nukleotid i ukoliko je
ugraden pogresan nukleotid (verovatnoca iznosi 10-7), one raskidaju vezu i zamenjuju ga ispravnim,
pa time smanjuju verovatnocu javljanja greske na 1 0-
1
o (slika 18). :· ; ·
Replikacija DNK kod eukariota
Osnovni inehanizmi .replikacije_kbd:eukariota su isti kao i kod prokariotskog modela. Medutim postoje i brojne razlike.
Kod eukariota se DNKteplikacija odvija znatn·o sporije zbog postojanja nukleozoma, koji znatno usporavaju.
· ·· pokretanje · DNK' polimeraze duz lanaca,', pa: se .zato kompleks . n:iplikacione viljuske krece oko 10 puta
.. sporije kod kod·· prokariota:Ger:-prokariotski ·.genom nije·asociran· sa histonskim proteinima): ·'
· Specificno je to ·da se kod eukariota nalazi · veliki broj oridi:ina replikadje, koji formiraju socivaste strukture· (lens
structure) (slika19). U eukariotskim celijama je.ustanovljeno postojanje pet DNK polimeraza (alfa, beta, gama,
delta, epsilon) pri cemu je DNK polimeraza -gama naciena u mitohondrijaina,· a ostale· cetiri u nukleusu. Takode je
zapazena proofreading aktivnost DNK polime.raza, s tim stq jedino DNK ponmeraza alta nema ovu aktivriosf 'Molekuli
DNK eukariota su linearni, pa se javlja problem replikacije telomemih region a. Posto je na 5' kraju ni:rstala
praznin·a (gap), kao posledica uklanjanja prajmera, nakon svake replikacije dolazilo bi do skracivanja DNK heliksa.
Zavrsetak replikacije prati problem replikacije krajeva DNK mOiekula koji se ogled a u skracivanju DNK molekula za
odredeni broj nukleotida po svakoj replikaciji: E.nzimi (koje :su aktivne u ranom embrionalnom periodu),
vrse obnavljanje ovih praznina, tako sto se ve.zuju za deo na starom :lancu · (koji je ostao nerepliciran) i ugraduju
nekoliko nukleotida uz pomoc RNK fragmenata kao matrice. Telomeraza dodaje na stari DNK lanae nukleotide
prema RNK inatrici i na taj nacin ga produi:uje:.Telomerazna aktivnost Qa ovaj nacin obezbeduje konstantnu dui.inu
DNK molekula kod celija koje se dele tokom citavog i.ivota jedinke·(npr.:ga·meli i embrionalne celije), dok·kod ostalih
celija organizma nisu aktivne. Skracivanje krajeva DNK molekula je jedan od uzroka celijskog starenja . . ·
7. Transki-ipc.ija
. . . . . . . .
Transkripcija predstavlja proces prenosenja nasledne informacije sa molekula· DNK na niolekul RNK. U toku
celijskog transkripcija se odvija u Go, Gt S i G2 fazi. Treba naglasiti da je i.ntenzitet transkripcije u Go fazi
izuzetno smanjen, jer je celija u toj fazi u stanju "mirovanja" i pokazuje mif!imalnu sintetsku aktivnost. Kao produkt
transkripcije mogu nastati iRNK, tRNK, rRNK ili snRNK_. ·
..
5
..


PROMOTOR
TAT.AAAA
ATATTTT
TATA box
T
... __ A"'".An-rr
. -·-.
RNK polimeraza 11
. !
DNK
matrieni lana_c ONK
I
poeetak transkripcije

. · RNK polimeraza 11
. .· . . . .
..
TF JIB + TF. IIF
'
j'- • . • . . : .
1 .... . . .. "' . ,. !-........ :
·i. ·
Slika 21 - Asocijacija tra11skripcionih faktora sa promotororn Slika 22 -.Formiranje inicijalnog transkripcionog kompleksa
DNK
5' lider
m
7
GpppN
1
i!!:f..t! ; :·
(Cap) 5·
jedinica transkripcije
egzon 1 intron egzon 2
.·; ::! f
3'
transkripcija
egzon 1 intron
egzon 1
m,GpppN,
5'
intron
· hn RNK (primarni transkript)
egzon 2
·t::.:-::. :-; ··.: .:. r:· .• · .:·· ·;. r!: OH
3'

5'
pre-m RNK
egzon 1 intron
·.•._.; .
egzon 2

3 . . .
. poly(A) rep
· · . . ··'. isecanje introna .
m
7GPPPNI
.... .. _·.·•.· 1 .... . .

.. ·.: ··./,; .. ... .._:••_.· .: .
............ .; :·; .. : :-... ·: ·.: : .. ..... : .. ; /"V"V'V"\
.. .
3'
5. 3. · · ....... · ·1,'-z....,.re-ta-m-RNK·r
transkripta::: , ...
• ..
. ..
.



Humana genetika- Repetitorijum
Transkripcija kod ·prokariota- na modelu Escherichiae coli
!· .
. . . : . . . . . . .I.'.· ...
Proees transkripeije zapocinje kao proees replikacij'e. Prvo ·erizlmi'DNK topoizomeraze vrse despiralizaciju i stvaranje
transkripcian'e. viljuske (lens structure) uz .pomoC: erizima helikaze· ·raskida vodonicne .. veze. Osnovna razlika
izmedju repl!kacije .i tran.skripdje je ta sto se sinteza hovog lanea transkripcije RNK lanca), vrsi samo sa
jednog lanca, tzv. matricnog !anea. Matricni lanae; _ima pravae 3'- 5', jer se i rad transkripcionih enzima vrsi u 5'- 3'
praveu, dok .. nematricni lanae ima - 3' pravae, ! ne ucestyuje u .procesu transkripcije (slika 20). Nakon sto se
formira transkripciona viljuska, · zapocinje prates prepisivanja DNK nukleotida sa matricnog lanca u komplementame
RNK nukleotide. Postoje tri vrste enzima koji vrse p'roces transkripcije, a to su RNK ·polimeraze I, 11 i Ill. RNK
polimeraza I je zaduzena za sintezu rRNK, RNK polimeraza 11 za sintezu iRNK, a RNK polimeraza Ill za sintezu -l"f
tRNK. B.NK polimeraza se vezuje za promotorsko mesto koje se··nalazi uzvodno od kodirajuce sekveence
(koja ce dati iRNK) .. RNK polimeraza pripada .grupiholoenzima, jer se kompletan enzim ·vezuje za promotorsku
sekveneu. RNK polimeraza sastoji od 4 .subjediniee; za koje.se sigma-faktor, koji ,identifikuje promotorsku
sekveneu. Nakon sto transkripcija ude u fazu elongacije (kontinuirano cidvijanje proeesa), nakon 7-9 sintetisanih
ribonukleotida, sigma-faktor se disloeira od RNK polimeraze. Kako se RNK polimeraza pokrece (uz pomoc ATP) duz
matricnog lanea DNK i za sobom ostavlja sintetisan RNK lanae, take se DNK heliks iza nje ponovo spiralizuje. Na taj
nacin usled transkripcije, ne dolazi do skracivanja ili modifikovanja sekvenei. dezoksiribonukleotida. Kontrola prekida
transkripcije odvija se uz pomoc rho-faktora; · Ovaj faktor, ako· postoji kontrolise transkripciju, tj. izvrsava je do kraja
kodirajoce ··'katia .. rrcrilazi ·na '"tem}inatursktl"'sekveneu (rho) ovakav' · mehaniz·am 'naziva ·sa .. rho::ravisni
terminator. Kod rho-nezavisnih terminatora RNK moze sama da zavr5i proces transkripcije, kada naide na specifienu
sekveneu koja se nalazi na 16-22 bp uzvodno od.terminatorske sekiiende .. Transkript ove sekvence gradi petlju, koja.
lici na ukosnieu, a koja se zavrsava sa sekveneom od vise nukleotida uracil a (transkribovana· sa vise
uzastopnih .nukleotida· adenina ·na ·DNK··;::. polyA.rep) .. Ovakva prostoma· konfiguracija RNK Janca,' destabilizuje
kompleks DNK-RNK·i dovodi do terminacije ·.:·'i . · ·: :·· .; , ·· < · · .. ···:·
,. . . . · ... .... ::·: .; :: ; --:-."· . . . ... __.. ' ..... .
- ·· ... •. , ... '; .. · .. · .. ,: · · =
Proees transkripcije. kod eukariota zapocinje n.a isti··.nacin, kao i kod prokariota, -udruzenim defovanjem en'zima DNK:, ,, ·
. topoizomeraza i helikaza koji prave· lens s'trukturu, lj. · ·viljusku. Kod .. eukariota ·transkripeija · je
. . . kontrolisana ·preko vise. DNK:sekvenei .koje se nazivaju· elementL.:Ovi elementi nalaze se uzvbdno od
.:::.,.;... o.inieijacionog elementi·ir:naju ulogu da zctseber:· · · ·
, , ... ·· . .vezu ju '. transkri pci oh e da kto 'POtr.ebni>:.:za•;jnicijaciju ;-:procesct·i'transkripcije•.; rRegu I a torn i-' · · · ·.. ·- : ·
amplifikaciju ·ili nivoa transkripsije. Promotori su 'regulatome sekvence kcije. se ·
nalaze .uzvodno od startnog ·mesta i za veiuju RNK polinierazu itranskripcione faktore (siike 21 i 22).
Na_iug9ljeniia sekvenea_ od je GC da.se Rt':lK: polimeraza veze blizu startne tacke. Nesto bliza ·
promotorska sekvenea je CAA T box kOja takode -Licestvuje ·u procesu stvaranja preinicijacionog komp'leksa '(RNK · ··
polimeraza i transkripcioni faktori), i uoceno 'je da mutacijom CAAT box-a dolazi do smanjenja nivoa transkripcije. "!W
Najbiiza promotorska sekvenca je TA, TA (5'-TAT AAA-3') box i nalazi ·se ha oko 30 bp uzvodno od startnog mesta. .. ..:!
Utvrdeno je da TATA box u_cestvuje u preeiznoj deterrilinaeiji ol<vira citanja DNK koda j samim tim preeiznosti ··;: ·:::·::, .
RNK lanea. Faza inicijacije, elongacije· i terminacije lranskripcije .. kod;eukariota se odvija po istom modelu kojfjE? .. '
objasnjen kod prokariota. . · · · · = · · : ·
Kao · proizvod transkripcije · dobija ?e RNK, u. vidu· primamog· transkripta. transkript u svojoj .·sekvenci
sadrii . kodirajuce . (egzone)'- i nekodirajuce' (introne). ·sekvence,··· ali. ce ; se: ·on· :u ;.posttranskripcionom .
modifiko.vanju svesti samo na kodirajuce sekvence; ·tako:sto ce ·Se J :odbaciti,· a fragmenti ··
spojiti u. s·ekundarni · -.. : ·. · · -· · ·
·-- .. ·.-
8. Obrada primarnog transkripta ·
Kod prokariota je zapazeno da transkript odmah u prqees:translacije, odnosno predstavlja zrelu iRNK.
Medutim, kod eukariota neophodno ·je posttranskripciono obradivanje primamog transkripta i iseeanje introna
predstavljaju nekodirajuce sekvence (slika '23). Primami tran.skript drugacije· je. oznacen kao pre-iRNK i njegova
'obrada se yrsi u jedru. Prvo se vrsi dodavanje CAP strukture na 5':kraj pre-iRNK. CAP struktura predstavlja 7-metil
guanozin koji se za 5' kraj pre-iRNK vezuje neuobicajenom 5'-5' :fosfodiestarskom vezom. Nakon stvaranja CAP
6
.. :
ONK
matricni
lanae:
.:. mRNK

'
·.:.
,,
:: ",. ·
....
RNK transkrlpt .
. •
Egzon 1 ; 2 •
kornponenle
splajsozoma
1
mRNK
Egzon 1 Egzon 2
,.
•.
·.: ..
iseceni intron
5'
• . p
•" ..
antikodon
Slika 24- Formiranje splajsozoma. Slika 25- Transportna RNK
.

_ ... . : ..•.
_-_ ... ;-._ . .. -.··
:· ·•
-
' ; - . _ ·kodon
. ... .
mRNK !. . '
_··.:· · .. :
.. ... . .. : .
•; 1 ....
· ...
. : • ':
Sllka 28 -Kompleks tRNK-aminokiseliria
: ·. :. ,-·. ; . . .
·-
· .. ·,
...
. ... · .
. . .. . ·-·- · ___________________ ___;_ ________ _
Human a genetika - Repetitorijum
strukture vrsi se metilacija sa po jednom m'etil grupom na prva dva ribonukleotida primamog transkripta. Nakon sto
se u procesu transkripcije polimerizuje oko 30 nukleotida vrsi se dodavanje metrilirane CAP (catabolicaly activated
protein) strukture delovanjem capping enzima. ·CAP ·struktura je neophodna za pravilno vezivanje male i velike
subjedinice ribozoma u procesu translacije. Susedni 3' kraj pre-iRNK niodifikuje se sintezom poliadenilatnog repa
-(polyA Enzim poly (A) polimeraza dodaje nukleotide adenina: uz pomoc ATP-a na 3' pre-iRNK.
Poliadenilatni rep omogucava stabilizaciju pre-iRNK na taj nacin sto je stlti od degradirajuceg delovanja ribonukleaza,
a i pomaze u transportu zrele iRNK iz nukleusa do slobodnih riboioina c!toplazmi. Nakon sto se izvrsi modifikacija
· 5' i 3' krajeva pre-iRNK, dalje se vrsi isecanje introna i povezivanje egzona u kontinuirani lanae. Ovaj proces vrsi se
pomocu splajsozoma, koji predstavljaju pre-iRNK i snRNP (snRNK vezana za proteine) (slika 24).
lntroni se iz pre-iRNK isecaju aktivnoscu nukleaza i shRNP i kao:takvi odbacuju, dok se egzoni spajaju u
kontinuiran lanae kodirajucih sekvenci. Uloga snRNP je da obezbedi da se isecanje (splicing) introna vrsi na
tacno mestu, tj : da se prilikom isecanja ne poremeti sekvenca egzona. Ovakvim nacinom abrade dobija
se zrela iRNK, koja odlazi iz jedra u citoplazmu i nakon traflslacije daje !J9Iipeptid.
Takode je znacajno naglasiti mehanizam posttranskripcionog modifikovanja pre-tRNK. Primarni transkript pre-tRNK
nastaje aktivnoscu enzima RNK polimeraze Ill, i modifikuje se dodavanjem 5'-CCA-3' sekvence na 3' kraj pre-tRNK
· (i kod prokariota i kod eukariota). Oodavanje ove sekvence znacajno je za obezbedivanje pravilnog vezivanja
aminokiselina u procesu njihovog transporta do ribozoma u translaciji. Takode pre-tRNK trpi niz drugih promena koje
se odnose na modifikaciju ribonukleotida duz lanca, sto dovodi do formiranja specificne prostorne konfiguracije
tRNK, koja podseca na trolisnu detelinu. ·
9. · Translacija
. .
Translacija predstavlja sinteze polipeptida na osnovu i.RNK matrice. Translacija se odvija u citoplazmi
na slobodnim 80S (kod eukariota) ili 70S (kod prokariota) ribozomima; i to u Go, G1. S i G2 fazi interfaze. Proces
translacije omogucen je preciznim prenosenjem nasledne informacije.sa;DNKna RNK, .a u cilju dobijanja adekvatnog
polipeptidnog produkta. Triplet nukleotida na DNK (kod), je u transkripcije preveden u komplementaran
triplet RNK nukleotida (kodon) na iRNK. Da bi se prava aminokiselina ugradila u polipeptidni lanae, potrebno je
delovanje tRNK koja sa svojim antikodonom (koji je · komplementaran kodonu), prepoznaje kodon i dovodi
aminokiselinu koja je njim (kodonom) determiniscma (slike 25 i 26). · ·
. .
Tok translacije kod prokariota - na modelu Escherichiae coli
i .
Da bi proces otpoceo, neophodno je da dode do inicijacije, koja se.;zasniva na povezivanju male i velike subjedinice
ribozoma za iRNK. Proces translacije zapocil')je od inicijalnog start kod9na (na iRNK), cija je sekvenca AUG i kodira
aminokiselinu metionin (Met). lspred inicijalnog kodona nalazi se mesto vezivanja ribozoma (RBS-ribosome binding
sitt::t) koje .. "subje9iP.ice •. tibozor:na .. .To _mesto. je .. sekvenca k9ia...ie boqata .
purinima (5'-UAAGGAGG-3') i naziva se Shine-Dalgarno sekvenca (ne postoji kod eukariota). Ta sekvenca je
komplementama sa regionom na rRNK ribozoma koji je bogat pirimidinima, pa se po principu komplementamosti
sparuju. Vezivanje male podjedinice (30S) ribozoma.za Shine-Dafgamo sekvencu, praceno je i vezivanjem tri faktora
inicijacije (pet kod eukariota). i GTP. Faza inicijacije zapocinje na startnom AUG kodonu, pri cemu se
inicijalni mt?tionin (koji je kodiran od strane AUG), modifikuje u formil-metionin (fMet) (slika 27). Ovaj modifikovani
oblik metionina do ribozoma dovodi inicijatorska (prva koja ulazi u proces) tRNK. fMet (ima antikodon 5'-UAC-3').
Metionin se prvo veze za tu tRNK, a njegovu formilaciju kasnije enzirn transformilaza. Ceo kompleks oznacava
se kao fMet-tRNK. fMet. jer sadrii formil-metlonin vezan za formil-metionin tRNK (tRNK.fMet), koja je determinisana
za prenosenje metionina svojim 5'-UAC-3.'. antikodonom. Ve.zivanje aminokiselina za tRNK omogucava enzim
· aminoacil-tRNK sintetaza ·(slika 28). Svaka aniinokiselina ima specific.nu aminoacil-tRNK sintetazu Oednu ili vise),
da ne bi doslo do pogresnog ugradivanja aminokiseline u polipeptid. lnicijalni kompleks je sada potpun i sastoji
· se od 30S subjedinice ribozoma, tri faktora inicijacije, GTP i fMet-tRNK.fMet. Na ovaj kompleks se zatim vezuje
50S subjedinka ribozoma, pri cemu GTP hidrolizuje u GDP, otpustaju se faktori inicijacije i nastaje 70S inicijalni
kompleks (kod eukariota to bi bio 80S inicijalni kompleks, koji bi se sastojao od 40S i 60S subjedinice ribozoma i
Met-tRNK.Met- nema formilacije meti6nina). lnicijatorska tRNK se sada nalazi vezana za P (peptidilni dzep) mesto
ribozoma. Na peptidilnom mestu se nalazi tRNK koja je vezana za rastuci peptidni lanae. Pored P mesta, u okviru
ribozoma nalazi se i A (aminoacilni dzep) mesto na koje dolazi tRNK. sa aminokiselinom. Faza inicijacije se ovim
7
· ..
.,
.. . '
. ·'
Slika 29- Faza elongacije

lAb- Tyr- Asp- Ptwt- L•u- MM.
Gly
\
Ab- Cys- V;V
-·m
faklor
Slika 30- Faza terminacije
Regu/acija genske al<tivnosti (sinteze proteina)
kad eukariota
\.
na nivou molekula DNK
• na nivou transkripcije
• na nivou post-transkripcione · 'l ! : . ;
• na nivou translacije
• na nivou post-translacijske abrade
Slika 31 - Tipovi regulacije genske ekspresije ·
:a ,
.• .
:I
Regufacija genske aktivnosti na nivou
mo/ekula DNK
• modifikacije
:..oNK
...: histona
(umnozavanje)
elimiriacija (gubitak)
;
· • preraspodela
· • poziciorii efekat
heterohromatinizacija
Slika 32- Tipovi regulacije genske ekspresije na nivou DNK
. ..
: i
..
-i7'
'· • ... .J
.. •. ..
. .. · ..
·· ...
· ....:-:.:
.. .
. ·.
··7';-:·
.... ·!T
. :;..:
Hum2na aenetika - Recetitoriium
zavrsava. Sledeca faza translacije je elongacija (slika 29). Elongacija obuhvata tri stupnja. U prvom stupnju dolazi
do vezivanja nave tRNK za slobodno A mesto u ribozomu. stupnju. se stvara prva peptidna veza izmedu
karboksilne (-COOH) grupe metionina i amino grupe nov,e koja je .. dospela na A polozaj preko
tRNK. Stvaranje peptidne veze katalizuje enzim stupanj predstavlja translociranje
(pomeranje) ribozoma 'za jedan kodon duz iRNK. Za translociranje .ribozo.ma neophodna je energija koja se stvara
hidrolizom GTP u GDP i enzima translokaze: Tada se: tRNK P mestu, koja je sama Ger je ugradila
aminokiselinu u polipeptidni lanae) otpusta,· a na' njen6 mesto dolazi sa f:. mesta. Sada se upraznjeno A mesto
puni.sa novom tRNK koja nasi aminokiselinu: Faza elongacije se u ova tri stupnja kontinuirano odvija, dok
ribozom ne naide na jedan ad stop koqona (UAG, UAA, UGA), tada zapoci.nje faza tenninacije {slika 30). Za stop
kodone l'le postoje komplementarni antikodoni, a za njih se vezuje faktor terminacije translacije koji
je proteinske prirode. Kada se na A mestu nadje. stop kodon, tada enzim peptidil-transferaza {koji je do tada
katalizovao stvaranje peptidnih · veza), dodaje vodu na . peptidil-tRNK. {tRNK koja na svom 5'-CCA-3' kraju nasi
kompletan polipeptid koji je u fazi elongacije sintetisan), umesto amino grupe. Time dolazi do raskidanja veze izmedu
tRNK i polipeptida, obe subjedinice ribozoma napustaju. iRNK i time se proces translacije zavrsava. Bitno je naglasiti
da u toku prevodenja · iRNK · u polipeptid ucestvuje veliki broj . ribozoma (poliribozomi tj. polizomi). Oni se obicno
nalaze na udaljenosti od 80-100 bp ribonukleotida. Time se postii.e stvaranje vise identicnih polipeptida, jer se koristi
ista iRNK .. Nastali polipeptid .' podleze posttranslacionoj niodifikaciji, pri · cemu odlazi · u cistemu granulisanog
endoplazmaticnog retikuluma (GER) i tama· poprima .finalnr .obliki hemijsku prirodu. Kao takav, protein maze bjti
egzocitozom uz pomoc Goldi.ijevog kompleksa izlueen_van celije (npr. celije) ili ostati u sastavu celije. .
. . . . . .
10. Re.gulacija genske aktivnosti na niv.ou ·molekula DNK.
. . . . .
Postoji veliki broj . cinilaca koji uticu na to da .Ii ce odredeni gen biti aktivan ili ne i kada ce· se vr5iti.·aktivacija ili
inaktivacija odredenog gena. Pod pojmom geriska ekspresija gena}, podrazumeva da 1i ce taj gen · ·
· - biti transkripcijom i preveden u ;polipeptid ·ilL sa mer transkripcijom u .. odredenu .vrstu ·.RNK. : .. - .'
·, ··: ' Regulacija genske·aktivnosti maze se vrslti navise naciria (slika·31}:·Ti nacini se odnose·na·hemijske promene sa . · · .. ·. :'
· ·. samom molekulu, eliminaciju ili amplifikaciju•{urim.oiavanje).genetskog·materijala, pozicioni ·· · .
· : efekat {E)romenu polozaja· gena) i heterohromatinizaciju:(slika· 32).· Pod 'pojmom hemijskih .·promena na DNK . . .
. . molekulu: podraztJmeva: se dodavanje alkil grupa ·{metil,· ,.CHJ)::azotnim: bazama. u. okviru (slika 33). ·. · • . ·. ·
.. ·, . . Metilacijom ·azotnih baza u okviru gena postiie se njegova inaktivacija (gene silencing). Na primer geni (specificno
. : . . citozin u okviru gena) za, 1)-globinske lance hemoglobina·u jedrima centralnih neurona su 100% metilisani.· Medutim ·
:: ... · · ·p'ioces metilaGijeje reveiZibilari,.:tako:da·selektivna meblacija·predstavlja model regulacije. Razlicita tkiva poseduju ,
.' specifrcne enzime :demetilaze (koji.vr5e eliminaciju metil grupa),· pana taj naCin mogu u odredenom momentu. u
: zavisilosq·.: od ·polrebe···za proteinom·' koji preihodno kodira, da·taj DNK
je na ranim stupr:Jjevima brazdanja (dq osmocelijskog stadijuma 100% metilirana, a potom nastupa
demetilacija i pocinje diferencijacija celija: Eliminacija geiia predstavlja pojavu da se odredeni deo genetskog
materijala gubi i.' predstavlja jedan:od mehanizama regufacije genske ekspresije. Ovaj vid regulacije uocen je kod
valjkastih crva (Pseudocoe/omata) i nekih vrsta insekata, medutim nema podataka da je zabelezen kod sisara.
Amplifikacija gena podrazumeva da se odredene DNK sekvence nakon' replikacije nalaze u znatno vetem broju
kopija, nego u parentalnom DNK lancu. U toku razvoja maze doci do selektivne amplifikacije gena u odredenim
tkivima ili celijama. Na primer kod rod a vodozemaca (Xenopus); ·u je zapaiena amplifikacija gena za rRNK,
koje postaju aktivni u oogenezi. Preraspodela ·gena (pozicioni. efekat) se odnosi na pojavu da odredeni geni
menjajuci svoju poziciju u .genomu postaju manje ili vise skloni ekspresiji. Ova pojava je· narocito znacajna za
diferencijaciju celija plazmocita koje produkuju antitela.' Heterohromatiriizacija je kondenzacija hromatina, pri cemu
se ,vrsi selektivna genska ekspresija: (djsperzan), prelazi u heterohromatin (kondenzovan), dodatnom
spiralizacijom {superspiializacijom)' koju omogucavaju proteini {histoni) koji se na odredeni nacin vezuju za DNK
; (nastaju nukleozomi). Hemijska modifikacija histona.utice na steperi ekspresije gena. Ukoliko se histonima adiraju
funkcionalne grupe (acetil, fosfo), dolazi do pojaeavanja aktivnosti tj. nivoa transkripcije. · Acetilacijom ili·
fosforilacijom histonskih proteina,· vrsi se ·njihovo odvajanje .. od DNK, pa na taj nacin DNK heliks postaje
pristupacan za prevodenje u RNK. Take je uoceno, da je u' regionima · aktivnih gena, hromatin disperzan
.,- dok je kod neaktivnih gena uocen kondenzovan hromatin ·
. '
8
.(:.
o.:


:;.:··
.
..
·•·
,•
...
. ...
0 •• :'o
.:· . . :· .
,:•
, Hemijske
. · ·DNK i histona ·
• modifikacije DNK:
. . . . .... .
. . : :· :; :! :'!' ·: ... :;:·;-:·;
·· METIUAQIJA:
··. CITOZJNA . :; . ;·' ·
-_;;,
• modifikacije
.histona:
. :.- :;'
·"··
... ·:· .: . . .
. ' . . .
' · ..
: · · ..
. ' FOSFORILACJJA
METILACIJA
:. :

.
. . tri· ;}:j;t]idJ;,fiji·
.
.. ·.
Slika 33 Putevi hemijske modifikacije DNK i histona
,, ...,
. . -· .
0- ... .. . . ... .I.:
.. .. .. ... "·- ..
• • • • • • • • • u .. . ,,. ; ...
· ...
..... ; : .. ",_":·:.·.
:: .
. . j . : : :
' , ;
; ... 0 ,
. . :! .. . ;
···'
... ..... .
·· .
.:-.
...
..... :
..
t.:
·_, _-:-·
_i;\":,_: ••.
Humana genetika - Repetitorijum
11. Regulacija genske aktivnosti n_a nivou .
. . ' . : . : i
Prema postulatima i Oavidson-a, kod eukariota postoje cetiri klase gena. Prva klasa su geni produktori
{GP), na: cijoj se sintetise iRNK i ovih a cine Drug a klasa su
·receptori (RG), koji kada nagrade kompleks sa ?ktJvatorsklm •.
nisu bili aktivni, jer su vezani za histonske proteine .. Prema hemiJSkOJ pnrod1 akbvatorsk1 molekuh mogu blt1 prote1n11h
iRNK-aktivatorni molekul. Taj iRNK aktivatorni molek_ul se ·na treeoj klasi gena, genu integratoru (GI). Da bi
se gen integrator aktivirao, neophodno je prisustvo cetvrte klase gena, senzornog gena {SG). Gl se aktivira tako sto
se razne indukcione supstance (iz celije ili okolnog tkiva); koje po hemijskoj prirodi mogu biti peptidi, hormoni, cAMP
itd. vezuju za senzorni gen. Tada senzomi gen aktivira gen integrator, Gl sintetise iRNK-aktivatorni molekul (AM),
koji locira receptorski gen i vezujuci se za njega, vrsi aktivaciju gena produktora. Ovaj kompleks gena predstavlja
komplikovanu kaskadu procesa, pri cemu stepen aktivacije gena, zavisi od aktivnosti gena produktora. Veliki broj
gena kod eukariota je transkripciono aktivan, ali se celije medusobno razlikuju i diferenciraju zbog intenziteta
transkripcije gena specificnih za te celije. ·
Prema danasnjim :gledistima u kontroli ekspresije gena ucestvuju delovi molekula DNK (cis-elementi) i
transkripcioni faktori (trans-elementi), koji su po hemijskoj prirodi proteini. U cis-elemente spadaju specificne
sekvence koje omogucavaju i modulisu gensku ekspresiju. Prva grupa cis-elemenata su promotorske sekvence.
Promotor predstavlja mesto za koje ce se vezati neka od RNK polimeraza (1, 11, Ill), kao i neki od brojnih
transkripcionih faktora. On se nalazi uzvodno od gena i sastoji se od nekoliko vrsta sekvenci. Najdalje od kodirajuceg
region a nalazi se GC box, zatim CM T box i najblize. kodirajucem tegionu nalazi se TA TA box. Drug a grupa
cis-elemenata su pojacivaci (enhancers) transkripcije·. Oni se':najtesce nalaze uz\.odno ad gena u sastavu
promotora, ali se mogu naci i u okviru kodirajuceg dela gena. Njihova u)oga je pojacavanje intenziteta transkripcije i
sinteze iRNK. T reca grupa cis-elemenata su REs·: (responsible elemimts) :elementi. REs elementi su odredene
sekvence koje odgovaraju na prisustvo signata· (hormoni, faktori interferoni), pri cemu pojacavaju intenzitet
transkripcije. REs elementi se. razlikuju od pojacivaca jedino .u tome .sio wse pojacavanje transkripcije, tek nakon • .
· indukcije sa odgovarajucim hemijskim signalima su od naroeitog znacaja u procesima
embrionalnih indukcija i diferencijacije celija. .. . . . . . :
Pod pojmom. trans-elemenata .. transkripcionih .faktora, lj. ·regulatomih· proteina koji ·
kontrolisu inicijaciju transkripcije.· Postoje· tri grupe· transkripcionih faktora; a to su opsti; specificni i inducibilni
faktori. Prisustvo opstih .transkripcionih faktor<Lustanovljeno je u svim tipovima eukariotskih celija. Oni omogucavaju
dovodenje HNK polimeraze ll (koja do, promotota. i"njeno vezivanje za promotorske boksove ·
(GC, CM T; TATA). Postoji-oko? proteina koji,. su,opsti transkripcioni faktori i deluju na RNK polimerazu 11, a to su
TF 11 (A, B, D, E, F, H i J). Nakon njihovog . vezivanja za RNK polimeraiu 11 na promotorskom mestu, stvara se
preinicijacioni kompleks ·(PIK); koji se aktivira fosforilacijom preko ATP i zapocinje transkripciju. Specificni
transkripcioni. faktori su precizno deterrriinisani za . odredemi tip · celije, , kao i za odredeni deo zivotnog ciklusa,
fiziolosko ili patolosko stanje. Ovaj tip faktora vezuje se za ali i za PIK. Na ovaj nacin se pojacava
ekspresija specificnog gena. U klasu inducibilnih transkripcionih spadaju regulatorni proteini koji moraju da
· budu aktivirani delovanjem hormona ili nekog drugog molekula. lnducibilni faktori se vezuju za REs elemente, i deluju
tako sto pojacavaju intenzitet transkripcije. Jrans-elementi' su podeljent i prema prostomoj konfiguraciji molekula u
cetiri klase. To su transkripcioni faktorisa homeodomenom (sastavlje.niod identicnih regiona koji se vezuju za
.DNK-+"hefix-turn-he/ix"), "cinkovi fingers" (riletalo-proteini koji sadr:Ze dvovalentne jone cinka i u
regionu koji se vezlije za DNK obrazuju pr5tolike tvorevine), "zavojnica-petlja-zavojnica"-"he/ix-/oop-he/i.x"
(vezuju se za DNK sa delom koji podseca na _zavojnicu) i "leucinski rMsferslus"-+"leucine zipper" (sadr:Ze veliku
kolicinu leucina ikao polimeri se zatvarajusli9no rajsfersiUS\J i na taj nacin vezuju za DNK).
. . . I • • . . . . • ; I
12. Regulacija genske aktivnosti na nivou post-transkripcije
Nakon sinteze iRNK, dolazi do njene modifikacije, tj. abrade k·rajeva i isecanja introna. Pod obradom krajeva
se podrazumeva dodavanje CAP strukture na 5' kraj i sinteza poliadenil;3tnog repa na 3' kraju primarnog transkripta .
. U procesu splajsovanja, a uz pomoc snRNP dolazi do iskrajanja introna (nekodirajucih sekvenci) i lepljenja egzona,
pri cemu se primarni transkript znacajno skracuje i ·prelazi u zrelu iBNK. Zrela iRNK koja ucestvuje u procesu
translacije je jako labilan molekul i podlozan raigradnji. Poznati su stabilizacije iRNK i kao primer se
navodi stabilizacija hormonima. Kada se in vitro kulturi ,dojke doda luteotropni hormon (l TH-
9
1

.. : ·
· · , · -. · • .. .. DNK ·. ;: · : .... :. · ., .. · ·:·· . . ··.
Slika 34- Opsta svojstva genskih mutacija
.'·
. .

.. ·· .-;;...
genskih mutacija na feriotip

..... .
'•
.I
.:...... ...
... .. ,.
. ,
Slika koji uticu biodivei'Zitet
, . .... .
·.
. ·-·-· ·-- .
. · · Human a genetika - Repetitorijum
. . .
. prolaktin), on deluje tako sto sintezu kazeina, glavnog proteina mleka. Nakon dodavanja prolaktina,
zabelezena je oko 100 puta veta kolicina kazeina,_ kod _istih koje nisu_ tretirane hormonom. Oodavanje
prolaktina, delovalo je .tako sto je tri puta povecana transkripcija gena za kazein; sto" nije u korelaciji sa kolicinom
proteina. Zakljucak je da su iRNK u prisustvu prolaktina i da su m ogle duze da se
koriste u procesu transla.cije. U procesu translapije otkriveno je vise .. regulatomih mehanizama, koji ucestvuju u
odredivanju intenziteta genske ekspresije. Regulatijom translacije moze da- se vrs! iRNK na cijem modelu
te se sintetisati polipeptid. Nakon sto je polipeptid sintetisan dolazi do rjegovog posttranslacionog obradivanja .
. Ova vrsta obrade odnosi se na hemijske i geonietrijske {konfo'rfnacione)promerie molekula koje obezbeduju
specijalizaciju ·njegove funkcije.' 'Kao navodi se ·· obrada ·· primamog.: ]anca ··preproinsulina ·· (prekursora
insulina). lzmolekulapreproinsulina:moraju.da se-eliminisu 23.aminokiseline da bi presao u molekul proinsulina.
Proinsulin se sastoji od tri lanca (A, 8, C) i da bi presao u aktivnu formu insulina, neophbdno je da mu se prethodno
eliminise C lanae. · · . . · ·
Regulacija sinteze proteina ne zavrsava se ovde: Stvoreni proteini mogu se koristiti ili odmah razgraditi u zavisnosti
od trenutnih celije; 'njenog .. metabolickog: pqtencijala i potreba .. u celini. .Brojni drugi faktori nakon
toga odlucuju o sudbini proizvedenih'proteina: Na primer, neki proteini da bi mogli da se transportuju dalje moraju da
se vezuju za specificne transportere. Ako ih nema proteini ce odmah podleci dezintegraciji. Stvaranje i razlaganje
bilo koje materije u celiji naziva se turn-over. ·
'13.1ipovi genskih mutacija
. . :. .
•". · 1 ·
. . . .. . . · · . '· <· · ... '. .. ···.··: · .. ·:
Mutacije predstavljaju promene u _rekoJ'!lbiQacija koje 'oznacavaju samo
-razmenu, kombinovanje postojeceg . :. ·· . . . .· .. · - .
· Mutacije ·su izvor novih gena, pri eemu mogu stetne:po·orgaqiza01.;(obolje_nja),ili.korisne (znatno.:rede) za evoluciju •. - _· ·
· vrste ·'(slika · -35) :' Jecina -od teorija •nastanak · .•. . ··
novih vrsta (slika .36):.Ukoliko se ·na je.·siroko·iasprostranjen •· :. :,· ... : :,_ .
· u prirodi) genu dogodi mutacija i pri tome.on kao direktna. Ova • :- · -
promena je reverzibilna, ali je,njena frek\fencijaznatnQ .rrianjapdJrekvencije.:-di[ektnih mutacija; Jedna od klasifikacija > ,,-. ·
mutacija odnosi se na tip -celija ·!J nd nose .na'one ·mutacije : •
• . y . su nastale .. ·u telesnim celijamcfmekog-·6rgariiziria;:qca'6:-:takv·e:ne1·prenose :se' ila potomstvo.U tom slucaju . ··
.. . organizam,.- • ,:s()r:na.tska ,.Jllutacija ,dogodi ·:U embrionalnom . . -
. . pe );'je r: jed na ,celi rnutacionog ,mozaicizma;' :' -.
. . , · ·, ·: , navodi J)oja: ocijli .kodi;ooveka:-:'Coyeld<ojkje:;mqzajk'zza',;bojti: ;<luzici 'smedi . i pia vi pigment,-: ili :
· • ·. moze'.imati :oci-razliCitih je·mutadja:lokalizovana:u germinativni_m celijama, onda ·se on a uvek prenosi na
. potomstvo i oznacava gametogenezE;! i znacajne su . _ ..
. sa _tack e. _.mogtL d? __
. nastanu i toku 'rane . embnogeneze rriogu1mati :·abribrmalni i1i sindrome sa
,,:_ . . . . . ublazenom :tenotipskom simptomatologijom. Kliri!cka s!ika takvih pacijenata .zavisi direktno od celijskih linija .koje stf .
·_ · c zahvacene· mutacijana; ._ bolest), ·.-
·. · · subletalne• (hemofilija) na domiilantne
(nasledena od jedrlOg roditelja, jedna'gamitura mtitiri:u16g gena:··ispoljavajii'se' tiheterozigotnom obliku) i recesivne
. qd oba ro,ditelja, ·dve fl:!Utiranih gena, se u homozigotnon1 obliku) Mutacije ... "._
mogu)ezultovati tizickirn:ili ·iflatelijala:;\U :velicin·e· ;oNk: zahvacene' . - -
i/Hi intenzitetom' p()s(edica :·genske:(mikrolezije}.:i ; .. ,,: ;-.;· . • :
hromozomske :.;- . :· ·, .· :. ;. . , · : --.. . . ' · :· ·
· . Generalno gledano mutacije ·mogu .m:u • · · -
.krajnjoj liniji z·austavljaju sintezu proteina.:'Genetske greske:mogu delecije ili insercije. ·. :·· ,, , · .. • .
Slipstitucije su one mutacije koje se karakterisu ·zamenom 'jednog bainog.:para nukleotida :drugim.: Supstitucije se.
mogu dogoditi po tipu tranzicije i transve!f:ije ·{siika 38). Trarizicija :je ·.oblik.supstitucije;· kod koje dolazi do .
purina, · purinom _ (A-G ili G-A) ili ·pirimidina_pidmidinom· T ili T Tranverzija je oblik
supstitucije, kod koje dolazi do zamene' pt.iriria pirimidinom {A___;T, G-T, A-c, G-C) ili pirimidina purinom
.(T-A, Bazne supstitt.i'cije se klasifikuju'i_ prema fenotipskoni efektu {aminokiselinskoj
sekv_enci i.r polipeptidu} koji uzrokuju i 'mogu biti ·misens, · neu.tralne i tihe. Misens . (missense)
mutacije su one koje dovode do ugradivanja pogresne aminok_iseli_ne u polip.eptid, Nonsens (nonsense) mutacije se
10
-

_ ..:..]j,'

. ,._



'•.
• ' 1 :: .: .
·,
·: ·
. ...
. .. ; ,.
':..:
,.. :·.

. .
Slika 38 - Klasifikacija point-mutacija
-. I;
i :
: ;
.· :-
. '
:"'! .. ·.!
·: .' . . ·:
.. -.... .. -
· , .. -,
.... ..
·l- ..
..
.·· .. :

.;
':•'·:
: t-
.. ,;" ....
Human a genetika- Repetitorijum
javljaju kada se mutiran kod za odredenu aminokiselinu, transkribuje u jedan od stop kodona (UAA, UAG, UGA).
Ovakav tip mutacija dovodi do prerane terminacije transkripcije i uzrokuje sintezu kraceg polipeptida, pri cemu duzina
polipeptida zavisi od mesta na kome je stop kodon lokalizovan. Ukoliko mutacija dovede do izmene kodona, prf cemu
se aminokiselina, zamenjuje sa aminokiselinom vrlo slicne hemijske prirode (Leu-l-lleu ili Lys-l-Arg) onda se govori
o neutralnim mutacijama. S obzirom qa su supstituisane aminokiseline vrlo slicne hemijske prirode, ova
izmena nedovodi do promena funkcije Tihe (silenQ mutacije podrazumevaju promenu koja dovodi do
remecenja sekvence kodona, ali se kodira ista aminokiselina. Ukoliko za primer posmatramo da je kod za lizin
3'-TTI-5', i ako dodje do silent mutacije na ovoni kodu pri cemu ce se modifikovati treci bazni par u 3'-TTC-5', po tipu
tranzicije, opet ce se ugraditi ista aminokiselina u polipeptid. Delecije su genske mutacije koje dovode do gubitka
nukleotida, pri cemu se remeti sekvenca gena. Frameshift mutacija uslovljava pomeren okvir citanja i dezintegraciju
kompletne sekvence aminokiselina u polipeptidu. Kod insercija dolazi do umetanja jednog ili vise nukleotida u
sekvencu gena. I insercija ce uzrokovati frameshift mutaciju, jer se time gubi okvir kodirajuce sekvence divljeg gena.
Posledica insercije ili delecije je sinteza nefunkcionalnog proteina.
14. Mutageni
Stopa mutabilnosti kod coveka iznosi oko 10-10. Mutacije su spontane i mogu biti indukovane faktorima sredine
i nastaju i pored dejstva repair-mehanizama (mehanizami popravke). Faktori (agensi) sredine koji mogu biti
fizickdg;·hemijs'kogilibioiosko!:r pcfre'kia,--:nnogu·prouzrokovati mutacije, nazivajuse mutageni.
Uocena je pojava da purinske i pirimidinske baze postoje u oblikuketq-enolnih izomera (tautomerija). To znaci da
citozin i adenin na polozaju 6 sadrie amino (-NH2) grupu, koja moze preci u imino ( -NH-) grupu, dok kod guanina i
timina koji na polozaju 6 sadrie keto grupu moze doci do izomerizacije u enolnu grupu. Posledice tautomerije se
ogledaju u toku replikacije, kada dolazi do neadekvatnog sparivanja azotnih baza, i stvaranja mutacije po tipu
supstitucije. ; ·
Fizicki mutageni koji su najcesce jonizujuca zracenja koja mogu biti talasne (X"zraci, gama-zraci) ili cesticne
(elektroni, alfa-zraci, neutroni, pozitroni) prirode. Jonizujuca zracenja deluju tako sto usled velike kolicine energije
koju poseduju, jonizuju molekule, pretvarajuci ih u slobodne radikale (visoko reaktivne cestice), koji prouzrokuju
ostecenja DNK molekula. Ta ostecenja greske pri sparivanju baza u toku replikacije; sto uzrokuje baznu
supstituciju. Takode mogu .izazvati raskidarije:estarskih veza (izmedju ·secera i fosforne kiseline), stvarati prekide na
DNK molekulu i onemoguciti ekspresiju gena (transkripciju) .. UV-zracenje koje nije jonizujuce prirode spada u klasu
fizickih mutagen a. Ono deluje na celije · Gerima malu prodornu moc) i na nivou DNK tih celija izaziva ·
stvaranje. pirimidinskih dimera ( dimeri timina), tako sto slabi dvostruku. vezu izmedu cetvrtog i petog C-atoma timina,
omogucavajuci..stvaranje dimera izmedu. dva · susedna .timina,. umesto · komplementarnog vezivanja sa nasuprotnim.
DNK lancem: Osobina dimera· timina je da zbog stvaranja ·praznine (gap) sprecavaju replikaciju DNK i dovode do
. p.ogr£:..,SO.OQ.$pari:v:a(lja_baza. U. slu.ca.iu'citozina dolazi do hidratacije, pa nastali produkt nije u stanju
da uspostavi vodonicne veze sa guaninom, pa se DNK heliks despiralizuje. ·Visoka temperatur<fkiaslfikuje· se i<ao ·
fizicki mutagen, sto se eesto zanemaruje.
Vazno je napomenuti da prilikom suncanja izlozeni deo koze pocinje da trpi ostecenja nakon jedan minut.
Medutim jos je vaznije. istaci da mehanizmi. opravke .stupaju· u dejstvo nepos red no nakon toga, tako da
konacno DNK ne trpi bitna ostecenja izuzev, ako nije koza izlozeria iiuzetno jakim i dugotrajnim UV zracima.
Posebno kozakoja ima dosta melanina ima i bolji odbrambeni mehanizam protiv suncanja.
Hemijski mutageni imaju tri nacina delovanja: transformacija baza, ugradivanje analognih (slicnih) baza u toku
replikacije kao i umetanje akridinskih boja u sekvencu DNK molekula. ·
Najpoznatiji hemijski mutagen koji vrsi bazmi transformaciju je azotasta kiselina (HN02) i vrlo je snazan mutagen.
Deluje tako sto transformise a den in iz amino u imino tautomerni oblik. Adenin se u ovoj situaciji transformise u
hipoksantin, koji je komplementaran sa ·citoziriom (ugradice se za vrenie replikacije) i ovom prilikom doci ce do
supstitucije po tipu transverzije {A-l-C). Po istom principu· deluje i etil-metil-sulfonat, koji transformise guanin u
etil-guanin. Etil-guanin je komplementaran sa timinom, pa ce se u toku replikacije naspram njega ugraditi timin, a
nakon druge replikacije, naspram timina adenin: I u ovom slucaju susrece se bazna supstitucija po tipu transverzije.
Hipoksantin je poznat kao jedan od faktora ubrzanog starenja. Uoceno je da osobe sa prirodno visim nivoom
hipoksantina u proseku krace zive. Dobra je stvar, sto se na nivo hipoksantina ipak moze uticati farmakodinamicima.
Mutageni koji su po hemijskoj prirodi vrlo nalik nekoj azotnoj bazi' (analogi azotnih baza), mogu se ugraditi u toku
replikacije na mesto normalne baze. Anal,ogne baze se pogre.sno ,sparuju i na taj nacin povecavaju stepen
11
I,

.i
. . . ... .. : . -· . .c . ..... . :. ___ .. ..,. c::l
REPARACI.TE
DIREKTNA (IN SITU) REPARACIJA
+
Fotorcaktiv.acija ( fotorcaktivira)uci enzim) ·.
+ Dealkilacija (alkiltransferaza)
11 REPARACIJA PRE REPLIKACIJE
+ lsecanjem baza
+ lsecanjem nukleotida
Ill REPARACIJA POSLE REPL1KACIJE
· + "Mismatch" reparacija
+- Rekombinativna rcparacija
+- SOS
.·.
. DIMER TIMli'iA :
. ·- . ·· ··· '"'
·; :·
o"· .. N-11
1
)-J\N§. =o
·. · c CH
.. ':>: _,;
· N : (' =0
. H CH,
. ( ·
'?-- ' . 0
0 . " i'i-11
N<:=:<>=o
11 Cll,
Slika 39 - Tipovi reparacije DNK molekula Slika 40 - Strukturna formula pirimidinskog dimera

OIREKTNA REPARACIJA PlRJ i\110INSKJH DIMERA
UY Zl'accnje
i!.·: ... ..·• · .. _i_· .• .. ·.· •. 4VT•;
. : }j
.•
-. ]
tlmm timin
'C! "
.. -.. ..... .......................... ..
.· ··-: .
!.
Slika 41.- She m a reparacije pirimidinskog dim era
lSECANJE BAZA
:;1· .
. . ·. 6'· '''t"•O"!Jll_ !l"J ;. :• ··, , ; ..... ;,. • : ..
• ;· CD oc· L.J . ' 0 C· 0 C l::l'
' P9r'.9 .
0
.:-;.PPo o 8
Jr. ·rsocanje • •
J• 5'
. ib',;··'d,;;;H
0
id
0

p0 oD o o p 0 o fl' "]
' t ·.'· l. 01\1-: • um.Ce
·. .•· .. _. nuklootid
B. .. ffi '
! lig>za
; ,: ....
Sfika 42 Ekscizion·a reparacija ·
.. ;r
... :.
. :
.
. ,

...
.· .·
Human a genetika- Repetitorijum
mutabilnosti (broj mutacija). Tipican predstavnik analogne baze je 5-brom-uracil koji se ugraduje u DNK molekul na
mesto timina j cesce prelazi U enolnu formu, pri cemu se sa guaninom i time dovodi do bazne supstitucije po
tipu transverzije (T -+G). · · : . · · · :: .. · · ·
Akridinske boje (proflavin, akridin-orani:) se ibog slicnosti u velicini sa. purin-pirimidinskim baznim parom ugraduju
(insertuju) u DNK sekvencu i dovode do frameshift mutacija, koje z_a posledicu dovode do sinteze nefunkcionalnog
proteina. · · · · : • · :
U bioloske mutagene spadaju neke vrste virusa, koji imaju sposobnost da se ugrade u humani genom i time
poremete normalnu sekvencu gena, delujuci na.taj nacin mutageno. ·
15. Mehanizmi opravke DNK molekula
U toku replikacije, kao i pored nje moguce je da dode do pojave greske (mutacije) u normalnoj sekvenci DNK.
Evolutivno se razvio veliki broj reparacionih mehanizama (repair mechanisms), koji svode stepen
mutabilnosti na najmanju mogucu meru sisar'! oko 10·
10
) i ispravljaju nastale greske (slika 39). Pored
nekorektnog: sparivanja ··baza DNK je jako osetljiv: prema naglim temperaturnim promenama. Podaci kazu da se
dnevno iz DNK molekula svake humane celije izgubi oko 5000 purinskih baza, zbog raskidanja glikozidnih veza
(kojima su povezani secer i azotna baza). Ovaj proces naziva se depurinacija. Nakon sto se izvrsi depurinacija, na
mesto azotne baze dolazi hidroksilna grupa. Kod citozina uocena je deaminacija (gubitak amino grupe), pri cemu se
citozin transfonmise u uraciL Frekvencija deaminacije citozina izr10si oko 100 baza po genomu dnevno. Jos jedna od
promena··na·SNK·melekulu ·je -9v.e·,.susedne .pirimidinske. haze.( ctimeri. timina -:-
nastaju pri delovanju UV zraka), sto dovodi do distorzije · heliksa, ; koja blokira replikaciju i ekspresiju gena
(transkripciju). DNK polimeraza Ill u toku replikacije ugraduje jednu pogresnu bazu za 10.000 ugradenih baza.
Medutim ovaj enzim ima 3'-5' egzonukleaznu aktivnost, sto zilaci da k13da ugradi nukleotid, ana proverava da li je
korektan nukleotid inkorporiran u polinukleotidni lanae i ;akcija naziva se jos i samokorigujuca
(proofreading) aktivnost. Zapazeno je da kod Escherichiae coli mutacija gena za 8-subjedinicu DNK polimeraze Ill
znacajno povecava mutabilnost sto ovaj gen cini genom mutatorom (MG).
Direktna reparacija
Kao primer za ·. direktnu reparaciju navodh:;e korekcija pirimidinskih dimera, nastalih delovanjem UV-zraka
(slika 40). dode do obrazovanja pirimidinskih· dimera, aktivira se enzim DNK-fotoliaza (prisutan je kod
: .. svih organizama), kojLraskida kovalentnu vezu.'izmedu dva susedna-timina (slika 41): Vezivanje DNK-fotoliaze za
pirimidinske.dimere odvij_a se u mraku, Liz koriscenje·svetlosti plavog del? spektra,
Direktna:reparacija se·odvija:i kada seodstranjuju.razlicite: alkil-grupe; pridodate na azotne baze. Jedna od ·
najcescih situacija je metilacija guanina na poloi:aju 6, koji se· u toku :repllkacije ponasa kao adenin i sparuje sa
vr5i enzim alkil-transferaza; tako stci uklanja alkil grupu (u ovom'slucaju metil grupu) vezujuci
je za cisteinski ostafak saaiian u ·sopstveiioj
baze, potreban je enzim, koji se nakon reparacije inaktivise.
Reparacija isecanjem (eksciziona repa:racija)
. . .
Nakon sto se u molekulu DNK formiraju pinmidinski dimeri (T-J, C-C, T-C), dolazi do stvaranja distorzija (iskrivljenja).
Enzimski kompleks koji se sastoji od vise enzima, yrsr 'za distorzivnim lezijama (ostecenjima) i
nakon sto je pronade vrsi isecanje fosfodiestars.kih veza · (endoriukleaza) sa obe strane lanca oko lezije
(zahvatajuci i nekoliko korektnih nukleotida) (slika 42). Nakoil sto se lanae isece DNK helikaza ga odstranjuje iz
heliksa stvarajuci prazninu (gap). Ovaj gap se popunjava udruzenorh aktivnoscu DNK polimeraze I i ligaze.
Kod prokariota postoji ekscizioni reparacioni mehanizam koji se sastoji od tri proteina UvrA, UvrB i UvrC.
Kod Escherichiae coli se obrazuje kompleks sacinjen od dva molekula UvrA i jednog molekula UvrB, koji se vezuje
za DNK i uz pomoc ATP-a se translocira dui: lanca i trai:i distorziju. Nakon sto se kompleks · UvrA-UvrB, veze za
distorziju, ona postaje osetljiva prema endonukleazama koje je isecaju uz pomoc proteina UvrC, koji se vezuje za
UvrA-UvrB kompleks. Uloga UvrC proteina je da omoguci precizno .isecanje distorziranog dela lanca. Nakon sto se
. isece ostecen region (oko 13 nukleotida oko jednog pirimidinskog' dime:ra), distorziran lanae se uklanja delovanjem
DNK helikaze, a nastali gap se rekonstruise udruzenom aktivnoscu DNK polimeraze l i DNK ligaze: Eksciziona
. I '
12
-
,· , .
..:·


..
UEPAUACIJA ,\P Mf.STA
\ -


0:"\K pep11Rjava pr:uninw
JNYftYjr ait i
0 -;:.,
& e . fl E?--:
Slika 43 - AP reparacija
1'0!'-U: REPLIK.\CJJE
I. REPAR,\CIJA
po1rrino spannr b•u •
2. Rf.KOi\IBli'IATIVNA REPARACI.J,\
pilimidindiiclift\Cri
medilike....-tthlr
IIIC'Ip•rnw biii7.C'-
3. SOS REPAR,\CJJA
·.·•·
Slika 45 - Podela postreplikatorne reparacije
Slika 47 - Verovatnota nastanka genske mutacije
.

···'··o
... __ \ :
. ,. , r
4«.'"'
Raz.llt:ite komblnaclje hi"OrnOXoi'T\a u yametlma
nast•ju kornblnac::ljom raz.dvajanja
hornologih hrornoz.oma u I rnej otiCke.deobe
Komblnacijc genotll:.kog rnateriJala garneta se prl
· · · oplodjenju nalaze u xlgotu, AMFJMIKSI.JA !
Rekomblnac;lja genetlekog matcriJ-"ID hornologih
• hornologlh hromozotnn, CROSSING-
OVI!R, u profad I mejotiCk• deobe
Slika 49- Faktori genetickog polimorfizma
...
· ...
U:\J..: r-fi• H AU • fi;an
. 0

Slika 44- Reparacija posle replikacije
''MISMATCH" REPARACIJA
, I
..
<;n)
__.,_
Slika 46 - Mismatch reparacija
·"- .....
Humane nasledne bolesti asocirane sa
sistema repar:icije
Aui1oi.A




.,uC'mij•
Xeroc.le•·n••
pi;n:scnt'!_Slllr{
preosc-tljh·o:st
. rzraCf'nje
nlkilinjuCi •
..
IN.•tlluinu!'r
"" · ... . ·
limfunti

limfnmi
kukcornije
lf!tlkemijeo
brcino.mi ku>.e
fl'!clDnnmi
Slika 48 - Bolesti uslovljene defektom reparacionih sistema
VEZANI GENI
· · Slika 50 - vezanih gena
..... .:..

• .l.
··· :· IIU'-·
....
.... .
j
· · ."' ···. ·
Humana genetika - Repetitorijum
reparacija se ukljucuje i u slucaju rekonstruisanja apurinisanih ili apirimidinisanih nukleotida (AP). Enzim
AP endonukleaza vrsi prepoznavanje secera, iseca se AP mesto, i nastali gap remodeliraju DNK polimeraza I i DNK
ligaza (slika 43). lzmenjene baze (hipoksantin,· baze sa otvorenim prstenom itd.) u molekutu DNK, odstranjuju se
delovanjem enzima DNK glikozilaze, koji raskida glikozidnu vezu i time stvara AP mesto. Nakon- toga AP
endonukleaza odstranjuje AP mesto i nastali gap DNK I i DNK ligaza.
· Mismatch reparacija
Mismatch, SOSsistem i rekombinatorna reparacija su tipovi reparacionih mehaniz_ama koji se odvijaju posle
replikacije (slike -44 i 45). Da bi reparacija bila ·uspesna ·mora da postoji mehanizam koji prepoznaje koji od
polinukleotidnih lanaca nasi ispravnu informaciju, . Kod prokariota je da se markiranje osnovnog lanca vrsi
putem metilacije, pri cemu enzim adenin-metilaza· vrsi metilaciju na polozaju 6 svih adenina koji ulaze u sastav
GATC sekvence. Kada se udvoji DNK molekul, novonastali lanae je manje metiliran, jer adenin-metilaza sporije vrsi
metilaciju nego sto se DNK replikuje. Mismatch reparacioni sistem preferencijalno iseca nukleotide iz
. nemetilisanog (novonastalog) lanca, nakon cega se gap rekonstruise delovanjem DNK polimeraze 1 i ligaze
(slika 46). Znacajno je spomenuti i MutS i Mutl proteine koji su zastupljeni kod svih organizama. MutS se vezuje za
nekorektno ugradenu bazu, a Mutl vrsi protragu za jednolancanim prekidom na DNK nastalim u toku replikacije
(nick= prekid na jednom od dva lanca DNK uzrokovanom nedostatkom ·fosfodiestarske veza) : Kod prokariota MutH
vrsi isecanje nemetilisane GATC sekvence novonastalog lanca, jer ona kao novosintetisani lanae nosi gresku nastalu
u toku replikacije.
.
•.i "
SOS sistem
Kod Escherichiae coli uocen je poseban mehanizam, koji reaguje na temperatumi sok, a koji denaturise proteine
celija. SOS sistem omogucava sintezu reparatornih enzima (proteina), koji su neophodni za hitnu reparaciju
DNK, dodatno potrebnu zbog temperaturnog soka. Svaki replikacioni blok Qedinica replikacije-replikon), nakon ..
ostecenja stvara signal koji indukuje .povecanje transkripcije preko 15 gena odgovornih za replikaciju. Odasiljanjem
ovih signala aktivira se RecA protein, koji inaktivise repr.esor- (regulatorni protein) koji suprimira (ne dozvoljava)
transkripciju seta komplemenata SOS sistema: Ovo. se desava. zato sto SOS sistem · nije uvek aktivan, vec se
ukljucuje. po potrebi . Regulatorni. protein (suprimator SOS sistema)-je kodiran od strane LexA gena koji blokira
ekspresiju RecA, · UvrA, UvrB, UmuC. Kada dode do aktivacije SOS_ si ste-m a, ukljucuje se proteazna aktivnost RecA ·
gena: Proteaze neutralisu LexArepresor i brnogucavaju sintezu velike kolicinereparacionih enzima SOS sisterna; ' · .
Mutatori ·
Mutatori su mutantni geni koji povecavaju stopu mutacije druglh gena; Ukoliko dode do mutacija na lokusima
MutH, Mutl,· MutS, dolazi_ do povecane stope spontanih mutacija, jer su onemogucene reparatorne sposobnosti
produkata ovih gena. Takode, ukoliko dode do mutacije MutO lokusa, proofreading aktivnost DNK polimeraze je
znacajno redukovana (slika 47). Najpoznatije bolesti koje su uzrokovane mutacijom reparatornih lokusa su
Ataxia telangiectasia, Blumov sindrom, Fankoni ··anemija i Xeroderma pigmentosum (mutacija gena koji obezbeduju
reparaciju nakon UV-zracenja, pri cemu se ne mogu ispraviti pirimidinski dimeri i bolest se ispoljava kao preterana
pigmentacija koze, pojava ozbiljnih ostecenja koze koja se razvijaju u kancer koze, osobe su oko 1000 puta osetljivije
na UV-zracenje, nego zdrave osobe, prenosi se autozomalno (slika 48).
16. Krosing-over
Krosing-over -(crossing-over) je proces ra'zmene, rekombinacije .genetickog- materijala izmedu homologih ·.
hromozoma, i to je dodatni faktor pojave polimorfizma (razlicitosti) (slika 49): U okviru humanog genoma,
majcinog i ocevog, geni se slobodno kombinuju u potomstvu, dok g·eni _koji .su linearno rasporedeni u okviru
jednog hromozoma prenose kao "vezani geni'' (korelativni geni) (slike so· I 51). Kod coveka postoje 22 grupe
vezanih autozomalnih gena i jedna grupa gonozomalnih · vezanih gena. Medutim, termin vezani nije apsolutan.
Vezani geni ponekad mogu u procesu rekombinacije da se razdvoje, a to' da li i koliko cesto ce se razdvajati zavisi od
. brojnih faktora (udaljenosti gena, stanja hromatina, pola, uzrasta, susednih gena, itd.). Najznacajniji faktor je
medusobna udaljenost vezanih gena. Sto su geni udaljeniji na jednom hromozomu to je veca mogucnost njihovog
13
I
I


.· \. ··
..
"': · .. ··
.· ..


....... .
•: .. ·
; ..;: ....
-\< ..... ..
•f , I

$
1
Zffl1101ffii
w:o !.Ufti !tOM
Slika 51 - LOO vrednost
11 I ! I I 11 I I I I 1 1 I t I I I I I I .I I! I I I I I I

11 I 11 I I I I I I I I I I I 11 I I I Ill I I I I I I I I
I I I I !1 I I I 1 I j 1 I 11 I I I I I I I I I I !1 I I I I
I 11 I I I I I I d I I I I j I .. I I I I I I 11 I I Ill


homologih

•ndonukleau u•eca
po Jecian DNK


hra,....tid-
p,.s.Cenl hartel ..
tllomplftnwH'Ibmo
umeCu i pove&uju ••
l•ncima late
•rijentaclj•
Slika 53- Tok genetickog krosing-overa
HOLLIDAY
STRUKTURA
- Holliday
I I 11 I I 11 I 11 I I I I I 11 I I 11 I J I I I I I I I t
', .J..l..LL.U...l. 'I' , \!!J!\JI!!
liilliillllil
heterodupleks
r \
, llUl.UJi I (, I I I J I I I : : : : : : : : : :
IJ) 1i I I I 1.1 Ill
NEMA REKOMBINACIJE
Slika 57 - Nastanak heterodupleksa
... ·.
;''.
,_
.• .. .
1cM -1Mb
Fizlcko ra5tojanje izrazeno
u baznim
Slika 52 • Morgan-jedinica geneticke rekombinacije
I I I I I I ' I I 1 d I I I tr I I I I 1 I I I ti I If I I
!I I! I' I I ,:--!..' \! .:_·. I • I! .. I I I I I! I I' I
illi:ffiiliiliiiilllllil·iiiiilif

..!!! ' ..' ..' .. I I I I I
11 I I I I I I it , it I d i1 I I I I I I 11 11 I 11 I
J..U..U..U...L. . ·,J l I I I! I I I 1
lllllllllldl
pavazuje
slabod.n•
, knlj•ve
Slika 54- Tok genetickog krosing-overa
Id I I I I I I,, I I I I I I I Ill I
ll!!jll!l ..
f · · 1 d d I I 11 I ill 11 Ill dIll
". !.' V- ·-. :.l. • •. j. ;._ I I I I I 1 I I 1 1 --'=.;
..
,,'
REKOMBINACIJA
·:·.,.,.
00
· Slika 56 - Rekombinovana.hromatida
= ,,
- ·-·.··=-· .. ,,
.. ;3--
neojednakl
0"*'
-=··,
' ' Fa ... +s•
x
. . - . . . . .
ft•Jednaka JtSH (razmena
• • hronuatlda)
....:....tif!iri4*?5iF·
Crossing-over u mitozi
Slika 58- Razmena sestrinskih hromatida
; . . . .·
..
··- .
. ··· - ... ..... ___ - ----- ·-. ----·-'"'··-·---... ·--- -.. ---·--- - ·· --· ..
.. -. .. . . ·- .... _ ... -----·--·._ ..___ ·. ---·--··---·· . ..
Humana oenetika- ·Repetitorijum
razdvajanja u toku procesa krosing-overa. Jedinica · genske mape je jedinica. rastojanja izmedu gena na
hromozomu. Broj jedinica genske mape je·u direktnom rekombinacija izmedju lokusa, to znaci
da 1% rekombinacija odgovara · Je?noj jedinici 'mape. Morgan · (M) je jed.inica koja oznacava procenat
rekombinacije (1M=100% · rekombinacije, . (slika 52) . . lzracunavanje procenta
rekombinacije posluzilo je u preciznom mapiranju gena (linamog raspore_da gena na hromozomu). ·
Razdvajanje korelativnih gena desava se u pahitenu . profaze .. 1. mejoticke. deobe (mejoze). Da bi doslo do
· ·razmene· genetickog ·. materijala izmedu homologih · hromozomai :potrebno· je; da., se oni · priblii:e i .formiraju fizicki
. ·kontakL'Homologi · hromozomi jxJstaYijaju jedan .nasprar:n: dnigog· (spajaju ·: homologi parovi) i foriliiraju
··· · · · sinaptonemalni kompleks. ·Sinaptonemalni ·kompleks·sastoji se od tri trake proteinske prirode, pri cemu su dve
·· · ·· · lateral ne: trake· spojene:.preko ·centralne; trake; preko niti koje povezuju sekvence nesestrinskih .
· . .: .:·:· : ·. hromatida:.:Nakon-.delimicnog:: razdvajanja sinaptonemalnog kompleksa· zaostaju'hijazme. Krosing-over se odvija
· u regionu:hijazmi;::a.zapocinje,:tako:.sto·.speci.ficna. endonukleaza.preseca .jedan polinukleotidni lanae u obe ..
· .. homologih .' hrornozoma. (tetra·da,: bivalent) · (slike · 53 i. 54r Presecerii
< . · polinukleotidni lanci; koji su . istog smera .se umecu u nesestrinsku delovanjem DNK-Iigaze. Ovakva
formacija izgleda i<ao . .krst; ciji su "kr.aci dvolancane DNK, a sredisnji deo jednolancana DNK; Ova krstolika formacija
naziva se Holidej (Holliday R.) struktura (slika 55). Ukoliko se segregacija (razdvajanje) Holidej strukture dogodi
u pravcu sever-jug, onda se dobijaju dve rekombinovane hromatide, a, ako se desi u pravcu istok-zapad, dobijaju
se· dve niti,.' pri cemu je jedna intaktna (nepromenjena}; a ·druga rekombinovana ·(slika 56) .' u
hromatide. u kojima se desila rekombinacija,'nalaze se nekorttplementami lanci i nazivaju se heterodupleksi, koji
obraZuju distorzije, pa se aktiyiraju. repair-sistemi koji ih opravijaju (sli.ka 57): u. diplotenu se vrsi segregacija
.· .hromatida, pa se hijazme jasno uocavaju .(kod .coveka.:pojednoj;rriejotickoj .. deobi postojL55 hijazmi po jednom ' ·· . . .
·.·. :'.-' ·,,,. hrcmozorriu ):· Dakle J<rosing-over.:zapocinje·,tJ;pahitenll :a :zavr.5alla·se:na.korLdlplotena:d:tiimitozi /::·[(-:{;.".
overi koji 'Se desava mnogo je ·· :(· ·
redak i uoceno je da se povecava·nakon :stetnog ·delovanja·spoljasnje sredine (slika :ss). ·
. . . . - . ' . . . . . . ' . ·: . . .
. . .· ; "· . . . . . -.. [
. .. ·. ::1?:"·: endonukleazej njihova-:primena·u rnole}<ularnoj :genetici
. .
.. .
. - ' ·
. : .: : · ·.· Restrikcione .. enziml izolovani :(oko'300 ':Vrsta).i:Z'balcterijskih'celija,· koji imaju·· ., ::·. ·
. . ·, ·. ·s PC!Sobnost.da:: prave,· ·dvolancane .. u: · DNK ·molekulu: .Restrikcione. ' ..... ·
.. ih .. uyodel')ja ·(introdukcije) virusnih genonia u .njihov : · · ..•
. :{koje;.:su::iden.ticne.)<ada se· smeru) :od. 4-8 .·.: , :
>c- .::i \ : ··.nu kleotida:.:.O.d::sopstVen ih:'.T.estriktaza::bakterije; 'Se:·stite :metilac_ijom.;{pomocw enzima 'DNK.metilaze) 'testrikcionih • ·. . · .
. : ;:;;::::: .. .. mesta;:Nakon::Sto:Testriktaze:::izvrse:sece·oje;. nastaju·Jepljivi kpji se :uz ·pomoc 'ligaze mogu spajati sa
· DNK razlicitog porekla, sto je d.ov_elo cto revoludje u .molekularnoj genetici, jer
se na ova] riacin -mogu kombinovati genetski materijali bile Molekuli DNK koji
nastaju. kombinovanjem vise DNK ·!Jlolekl,lla TazliQitqg se himerni (uslovno ·
:rekombinO'varii ili ·oNK niolel<uti. 'Dva za · ..
. proizvodnju lj. sintezu".humanih hormona i drilgih proteinskih izolciv"i:mizE.coliseee DNK, ,
. gde god se pojavi GM TIC .sekvenca · (humani :genom seee na· preko.:tOOP.OOO Restrikciona .. . .
. · · , · · = se -nas1edliju'po.:mendelskim • ·· · . ·.• ·
. ··. . .· is: . ·. . • ...
· · ·Osnovne tehnike . molekularne . •• .:(rariije" .opisano),
1
.
... . . '!f.
· · .9el-elektroforeza, PCR; hibridizacija, kloniranje]ena:i sekVendranje'DN!{.mo1ekula:{slika:59).' / . . : ·. ·;: .. ·. ·: .. _.
·· •· ·· Gel elektroforeia ·se;upotrebljava kada se :Zeli odreqiti .duiinai se ·na .Spqsobnosti :,. :. ,
.· (naelektrisanih) · molekula da se krecu u elektricn6m poiju od negativnog u gelu ili 'drugoj . ·· · . · ·
(slika 60). Sto je relativna molekulska masa riekog jedinjenja manja,.to e:e·se taj molekul brie kretati .kroz gel.
Na gel, koji je puferisan (u blizini katode) se nanosi .uzorak koji se ispittJje i nakon toga se ukljucuje struja, pri eemti
ce posle vremena razliciti molekuli DNK razlicito migrirati. .s obziro.m da je.DNK na gelu nevidljiva, ia
. bojenje se koristi etidijum-bromid, koji ima ·afinitet prema DNK, pa se tako uocavaju segmenti DNK..; . ·.
· · . PCR (polymerase chain reacfio.n) ili reakcija lancane polimerizacije se. koristi)adaje DNK·za ispitivanje dostup.na u
malim kolicinama, pa se ovom metodom pos.tii:e vitro amplifikacija, :pri cemu odredena sekvenca DNK ne mora
14
-
lzvot·i DNKza aualizu
. • Ri<Jlaski u k(omc su
·· •·. rrlijc S2 jcdrom: .
.. : . . ·.

'·· hnrlonsL':e r-t"Skc.
antnionsloJl 1«nust.
J..n· i.t f'UJ•(-ornik.a
l,r;!li huk:thlt' •
tnl:;! rC"Ic..-sm: •
knren di:.Ll"
Slika 59- lzvori DNK za analizu
PCR- /ancana reakcija polimerizapije'
mo!ekula DNK
1.denaturacija DNK ; i• Cikhu 1:
·: \ 2 mu1ckul.:a
'•: ........ .
,,
ii
2.hibridizacija
prajmera


3.sinteza novih
lanaca
/I j' Ciklu• l:
. ·. ··i ,: !I -1 •
-polimerizacija DNK .
1
!:. !·
iDl . Cildus l : . · :i
··-..... ,. :1 Si:
Slika 61- PCR metoda
,,
. Hibridizacija in situ,
test na· hrom6zomskim Hi
.. · ·
FISII- fluorc:scentna hibridizacija i11 situ
Slika 63: FISH metoda
: ;
. •. '
' .
·.' .... ·:"' ,;
., ,. ·.
::
; .
DNK analiza
Gel-elektrofore::z:a.:
- etidijum .
bromidom .
- UV prosvetljavanje .
,,., .Siika 60 - Gel-elektroforeza
Southern blotting ili test hibridizacije
;

';J_
. Slika 52- Southern blot metoda
. . ·-·'. , .. Primena DNK amaliza.u medicinl,

··. - dlrektna
·- lndireJctna
. . :. : Geneticka :predispozicija za ' ·'
. ·. . ., ,poligenske bolesti ··.:: ,: · ' '
Genska terapija· i ·
farmakogenetika .
ldentifikacija osoba- DNK
otisak , .
• Detekcija genoma
· . mikroorganizama ·
'slika 64- Primena molekulamo bioloskih. metoda .u medicini
·'',.i

. .'
.. .. ..
... '
. ... ·
,... ... .


.. :_? ;;:,:'
· · ·.·
·I
ii..;
'
.. :
·:
.J.:
. .. . .
. ·,·
---------- - - -- -
/
Human a qenetika- Repetitorijum
da se klonira (slika 61 ). PCR se zasniva na modelu replikacije, pri cemu se u reakcionu smesu dodaju svi neophodni
molekuli (nukleotidi, prajmeri, joni magnezijuma, pufer, Taq DNK-polimeraza). DNK se u prvom stupnju denaturise na
oko 94 oc, a ·nakon toga se u fazi odmotavanja (annea/ing-zagrevanje i hladenje DNK u cilju odvijanja dvostrukog
heliksa i indukcije kombinovanja sa komplementarnim fragmentima tj. prajmerima) dodaju prajmeri koji se vezuju za
matricne lance i sluze kao' vodice za DNK polimerazu. Prajmeri su komplementarni vezujucem regionu, pri cemu oni
determinisu-koja sekvenca ce se amplifikovati. Komplerrientamo vezivEmje-prajmera se vrSi na 50-70°C. U sledecoj
fazi se vrsi ekstenzija, umnozavanje, pri cemu enzim Taq DNK polimeraza nukl_eotidne lance. Enzim Taq
DNK polimeraza je termostabilan enzim -uer je ovo svojstvo od kljucnog znacaja za proces), koji je · izolovan iz
termofilnih . bakterija; dok ·optimalno delovarije.; ispoljava na, 72°C. _ Da -: bi se · prajmeri produzili neophodni su
prekurskorski (dNTP), a joni magnezijuma katalizuju vezivanje nukleotida. Nakon sto se zavrsi ciklus
dobijaju se dva molekula DNK koji je ogranieen prajmerima. Ciklus se ponavlja 30 puta, a nakon tog vremena dobija -
se 1 os kopija DNK molekula; koji se sad a nalazi u znacajnijoj kolicini i kao takav mnogo lakse podvrgava drugim
metodama ispitivanja. Postoje modifikacije PCR metode koje obezbeduju ponovno obnavljanje ciklusa amplifikacije.
Test hibridizacije se koristi . pri proceni komplementamosti izmedu DNKIDNK, DNK!RNK i RNK!RNK, sto ima
znacajnu ulogu za utvrdivanje srodnosti; a narocito se koristi u evolucionoj biologiji. On se zasniva na vestackom
formiranju dvolancanog polinukleotidnog lanca, spajanjem komplementarnih lanaca dve razlicite nukleinske kiseline.
Da bi se ova metoda izvela, neophodno je imati radioaktivno obelezeni marker koja se specificno vezuje za odredenu
sekvencu nukleotida. Marker se moze pripremiti nick-translacijom, pri cemu dezoksiribonukleaze nasumicno prave
jednolancane prekide, koje ce DNK polimeraza I degradirati i ponovo popuniti no vim nukleotidima, "koji· sl:l pmthodno
radioaktivno obeleieni. Marker se obelezayp i tako sto se razdvajanjem oba lanca DNK na odgovarajucem mestu,
dodaje smesa heksanukleotida koji . se vetuju za DNK i ·obrazuju plajmere·; za DNK polimerazu, koja . ce sintetisati
novi lanae probnog segm'enta (koja u sebi saar:Ziradioaktivno obelezerie nukleotide).: ' ;• ;, - . -- : .' . .
Jedna od metoda hibridizacije je Southern blot (slika, 62). Ptva metodeje.isecanje DNK restrikeionim
· enzimima, _ pa ..-_ se . dobijeni restrikcioni . --· fra·g-rneli,ti ,:.razdva}aju . . -vrsi .. . se.
denaturacija (blotting) i prenosenje fragmeriata mi nitrocehilozne.filtere inajl6,nske:friembrane. -DNK se :u ovakvim- .. ·
uslovima inkubira'; sa jednolancanom radi6aktivno obeleienim ·: genskiri{ markerom/. : 6dg0varajlfci f' ' 1
komplementami region, hibridizuje se sa njim i nastali hibrid se moze pstanoviti autoradiogiafijom. Slicna metoda
So em blotu-je_Norther'n .blot, medutim- ovom metodom se ispituje hibridizacija DNKsa RNK. Western biotsluzi
;_ : . ' za ispitivanje 'hibridizacije protein a sa .antitelomrdok ·se kod dot-bl.ot metode.DNK,uzorka;. DNK. ne' iseca)ve6 se . .
· denaturise ·i inkubira sa markerom, .a .rezultati se .ocitavaju u vidu manjeg ili veceg intenziteta. ,Mibridizacija se . .
' -. - _· ·.. c moze :ispitivati . na metafaznim -j na hromatimi ' interfaznih jedara), pri cemu. su n:ia,i-keri-'obelezeni \ ' - .
_ : .. : .-· fluorescentnim bojama,-pa ·se metoda miziva,FISH'(f/uorescent in situ. hibridisation) (slika .63). Danas postoji vellkt ;
· · · · · -broj fluorescentnih. boja -kojima:·se.mogu, obelezavati razni hromozpnii,' receptori, membranski .markeri · na povrsini
- ·- 6elija, nukleotidne sekvence itd. :·- . · . · · - : ·
. . Koriscenjem metoda molekulame blologije doslo se na ideju da se izvesne nasledne i turri_pypgene anOf!l?,llijersaniraju
__ genske terapije (slike 64 i 65). · : _ - _ - ' · · _ · _ --. · · -- · . · · · ·
pojam vez,uje uzstvaranje ili .istovetnih uzoraka (slika 66). ll prirodi- : .
; •. pojam· ..
_.? · ::.·:_' _ • _ bhzan_cJ ?u .. Sve C:hJe ...
_ · • . su genet1ck1 klonov1: CehJe -tu mora po JeQnor hrpotezr ;potJcu :od .Jedne mahgno .transformrsane (monoklonallio ' -
_ celije,pase zato kaze da suti.miorske prvon.astale maligne celije. , _·. _. -, .· ... : _ ·,.·:_ -. · ·

--. :Medutim pojam kloniranja najcesce se vezLije'uz ·molekulan16 bioloskEi. metodeJ klonir,anje gena. Naime, k-lonirimje · ·
· se vrsi uz pomoc bakterijskog cirkulamog genoma.;.{xi cemu .se DNK sekvenca .koja _ sadrii neki strani gen,
ugraduje u bakterijski genom, uz pom·9e: yektck mora da bude kompetentan da ude-u 6eliju, •
. a najcesci vektori su bakteriofagi, plazrnidi .ili Roirnidi {koristi: se fenomen da bi se strani gen ugradio.
u n.eki ·_oo vektora). Kornpleks vektor-gen: naiiva se himenii DNK molekul. Bakteriofagi su
. baktetijski virusi koji zivotni ciklus ob.avljaju ·u_ bakterijskoj celiji,jSri da tigrade svoj genom (a sa njim i
strani gen) u bakterijski. Plazmidi su 'cirkularni DNK molekuli, kojrse rialaie van hrorriozoma, sadrie oko 100 gena i
zasebno se nasleduju. Kozmidi su modifikovani plazmidi, ukoliko je oko kapsid. Danas se koriste ;
15
W: .L
·>: • ·

. " ... :: .
. --. .... .
: ··.
"
oOrift-..Olac .. /,n llflm,;i. :
Edin.bur:.

·;.;:_: .-:



..

..
·- , - -·
.. ·.·
·•_ j .... _
: .. : .•. ·,.
.. _ , . .. .... ::.t·· .• :,: - -
. . ... , . . .
GENE AUGMENTATION
(GAT): .
Uvodjenje ekstra kopije
gena da bi se : : : .. :
obe.zbedio
CILJANO UBIJANJE
SPECIFICNIH CELIJA: ·
- Kod maligniteta
:.
. '•
• . KOREKCIJA CILJNE
MUTACIJE: .
- · Na nivou DNK.ili RNK
.- Kod.domlnantno-
mutacija.
CILJNA INHIBICIJA
GENSKE EKSPRESIJE:
Kod maligniteta,
infektivnih bolesti (postoji
nov ili neadekvatan
genski produkt)
Na nlvou: DNK
. RNK
proteina
.
Slika 6S- nacela genske tera.pije
..-... _. -
..
.: ··-:- - . -··
. : :: '·-· ..
.... .
... -·· ·
... _ . .
·. sHka 68·-'Efape .. .
.... ·. >· .. . . . .. .'·_:.
.· ... .
..-.
-. -..
.. -... -. : ·- ·': .· . ...::::--..: .. :
Human a genetika- Repetitorijum
vektori koji mogu da ugraduju velike sekvence DNK i nazivaju se YAC i BAC
arteficial chromosome). Vektori se uvode · u celiju domacina (E. coli): koJa vlastltog vrs1. 1
replikaciju uvedenog gena. Kompleks domacin-vektor se tako sukces1vno pa se .umnozavanJa
(kloniranja) vrsi selekcija klonova sa himericnim DNK. Uz pomoc ovako dobiJenlh produkata form1ra]u se genske
biblioteke. · ·
Sekvenciranje je odredivanje redosleda nukleotida (sekvence), gena ili nekog dela DNK. Najpoznatije su
Maxam-Gilbertova i Sangerova metoda. .
Maxam-Gilbert metoda zapocinje markiranjem (sa 3
2
P) 5' kraja jednolancane DNK. Nakon markiranja, molekuli
ONK se odvajaju u cetiri grupe, koje se razlicito obraduju da bi se svaka azotna baza modifikovala i mogla pratiti u
nastavku procesa. Posle modifikacije baza vrsi .se njihovo odstranjivanje iz smesa (da ne bi smetale) i dobijaju se
cetiri alikvotne grupe (G, .A+ T, G+A;C) radi pracenja svake baze. Secenjem jednolancane DNK na dva dela, jedan
kraj ce biti obelezen sa 32p Qer se vezuje samo jedan atom radioaktivnog fosfora za samo jedan kraj-5'), dok drugi
kraj nece biti obelezen. Nakon sto se izvrsi elektroforeza.i autoradiografija, .duzina fragmenta odgovara udaljenosti
mesta preseka od kraja lanca koji je markiran radioaktivnim izotopom fosfora. Pozicija fragmenta na autoradiografiji
odgovara polozaju baza u fragmentu DNK.
Sangerova metoda zapocinje tako.sto se jednolancani DNK hibridizuje sa prajmerom, koji je odgovoran za sintezu
drugog lanca u prisustvu nukleotidnih prekursora i ostalih faktora. Jedan od cetiri dezoksiribonukleotida je markiran
sa radioaktivnim 35S. U reakcionu smesu se dodaje mala kolicina 2'-3' didezoksinukleotid trifosfata (ddNTPs) koji
3' QH. .iln..!PU, patako lanae DNK ne maze da raste, jer u toku procesa ne postoji 5'-3'orijentacija lanca, jer se
na ovom polozaju vrsi graderije G}'"je•ta ·da ce 3<:
dobiti onoliko fragmenata DNK lanca koliko je puta taj nukleotid (koja nije nagradio fosfodiestarsku vezu), prisutan u
ONK fragmentu. Nakori elektroforeze; sprovodi se autoradiografija, na kojoj se vidi da velicina fragmenata odgovara
udaljenosti od pocetka prajmera do mesta gde je prekinuta sinteza novog:lanca, pa se na taj nacin ocitava poredak
azotnih baza, tj. sekvence DNK. · ·
19. Geneticko inzenjerstvo
Geneticko inzenjerstvo je ·skup metodologije koja , dovodi do stvaranja genetskih hibrida (ukrstene DNK);
odnosno transfera gena iz jednog organizma · u drugi.. Princip genetickog inzenjerstva se zasniva na cinjenici da
nukleami genom svih zivih bica. pokazuje:·un,iverzalnosLu. kodirajucem. principu, kao i ·u istovetnosti u mnogim
· procesima. Kao tipican primer genetickog inzenjeringa navodi se ugradivanje humanih gena u bakterijski genom u
. cilju dobijanja korisnih.produkata (insulina i ostalih.hormona; interterona itd.) (slika 67). U genetickom inzenjeringu ·
koristi· se· delovanje: restrikcionih: endonqkleazarDNK ·ligaza l vektora (bakteriofaga; kozmida i
.· ·· plazmida}:>Da·, bF sem·ekF· humani:: gen· bakterijski; pre toga • je potrebno stvoriti •himemi (rekombinovani,
hibridni) DNK molekul; koji se sastoji od tog gena i vektora. Za ·ovaj postupak koriste ·se restrikcione endonukleaze : ·
· koje' ·za·secaju" i -gerr·na··tacno· 'O'd reuenonlmestu .. {-palindromske· .. pa .t.akn
gen i vektor po principu komplementarnosti hibridizuju i delovanjem DNK ligaza obrazuju himerni DNK molekul.
Himerni molekul nalazi u bakterijskoj celiji i podleze svim osnovnim procesima, odnosno replikaciji i genskoj
ekspresiji. S obzirom da je kodirajuca. sifra· 1,miverzalna, sad a bakterija pored sinteze sopstvenih proteina, sintetise i
protein koji je produkt. ugradenog gena, prepoznajuci ga kao svoj. , Genetski modifikovane (GM) bakterije se
kultivisu na hranljivim podlogama u Petrijev)m soljama nC! specjficrioj pH i temperaturi (37,5°C). Bakterije obrazuju
kolonije i sekretuju plak (talog) koji se sastoji od korisnog ·se formira, zato ·sto bakterija ne
metabolise strani protein, vec ga egzocitozom deponuje van celije ..
20. Celijski ciklus
Vreme koje obuhvata period izmedu dve sukcesivne celijske deobe naziva se celijski ciklus (slika 68). On je
podeljen na interfazu i deobu. U interfazi'se vr5i priprema ia sledecu deobu, kao i ekspresija gena i replikacija DNK.
Sastoji se ad tri faze: G1, S, G2. U G1 fazi se vrsi priprema za replikaciju i sinteza proteina. To prvenstveno
podrazumeva sintei:u RNK ·; proteina koji ce ucestvovati u replikaciji (enzimi replikacije). Ova faza je ujedno i najduza
faza celijskog ciklusa i celija maze da je. zapocne na tri razlicita nacil!a. u zavisnosti 'od delovanja signalnih
mehanizama. Prvo, ·moze da zapocne nov ciklus celijske deobe, dri.Jgo, da zapocne diferencijaciju ili da ude u stanje
"mirovanja" u Go fazu. Na celiju uticu brojni faktori rasta, produkti lucenja drugih celija, koji su uglavnom proteinske
. .
16
, .. :
i."
Mitoza
'
'.
·: rw: .
r r-,
b•-omozont . : jed•·ova mtmbrana
'{,
I
I
., .
·- - ···- ·:--- ----. ··- ·· ··-----....
piTnwjatilb
inlt-rl:u:a
Slika 69- Faze mitoticke deobe
Mejoza
Slika70- Faze mejoticke deobe
! ; ,., __
......... __
, .. ·
. ;
-·, ·- .
it-t;
. . .
... ..
.
r ..

.' ..
Humana genetika - Repetitorijum
prirode i neophodni za rast i diferencijaciju celije, kao i unutarcelijski faktori ukljucujuci i nukleame. Spoljasnji
biofaktori deluju uglavnom tako sto se vezuju za membranske receptore i signalnim mehanizmima dovode
do ekspresije specificnih gena. Kada eelija pod delovanjem faktora rasta dostigne restrikcionu (prelaznu) tacku,
tada prestaje njena osetljivost na spoljasnje signale i celija napreduje u S fazu. U 5 fazi se vrsi replikacija DNK i
sinteza histonskih proteina i proteina hromozoma .. Take hromozomi dobijaju jos jednu hromatidu (sestrinska
hromatida) koje su povezane Replikacija je. izuzetno' proces, kojim se postize konstantnost u
prenosenju genetickog materijala na buduce cerke eelije. U G2 fazi celijskog. ciklusa dolazi do zavrsetka sinteze
proteina koji ce uvecati celijsku masu, a i proteina neophodnih za proces deobe, pri eemu je bitno napomenuti da su
najvazniji ani koji ce izgradivati deobno vreteno (alfa i beta tubulin}. U interfazi se vr5i udvajanje i centriola koji
ucestvuje u stvaranju deobnog vretena u procesima celijske deobe mitozom ili mejozom.
Celijska deoba kod vecine eukariota .moze mitotska i ·mejotska. Mitozom se dele somatske (telesne)
· celije, odnosno sve. sem. polnih (spermatozoidi,'jajna celija), a glavna od.lika ove deobe je da se odrfava ·
konstantan broj tako sto broj hromozoma udvostrucuje pre deobe. lz tag razloga se mitoza
oznacava i kao ekvaciona (ujednacena) deoba. Mejoza je deoba karakteristicna za polne celije, ali se za ·
razliku odmitoze u mejozivrsi redukcija diploidne (2n) na haploidnu (n) hromozomsku garniti.Jru. Odvija se u
dve etape: mejoza I i mejoza 11, as obzirom da redukuje 2n na n·obelezava se kao redukciona deoba.
Mitoza se sastoji iz cetiri faze: profaza, metafaza, anafaza i telofaza (slika 69). U toku profaze mitoze dolazi do
spiralizacije hromatina i obrazovanja hromozomskih struktura koje postepeno skracuju i kondenzuju, dok sintetska
aktivnost eelije biva svedena na najmanjt.i mogueu meriJ. Nukleolusni regioni iseezavaju, a jedrova membrana se
polako dezintegrise na molekule .koji ostaju. u citoplazmi. U blizini.jE:ldra se. moze uociti centrozom sa dva para
centriOla · kojr cediii"kraju p·rafaze zauzeti ··PRiazaj ·na · suprc5tnlm .. ·rmormiti ·dEmo no -vreteno:·ueobno ·
vreteno se sastoji od mikrotubula koje se pruzaju ad jednog do dnigog centriola {polami mikrotubuli), a i onih koji se
povezuju za kinetohore hromozoma {kinetohomi mikrotubuli), kao i onih okruzuju same centriole (asteri) .
. . Metafaza je najkraca faza celijske deobe :i karakteristicna je po tome sto su hromozomi maksimalno spiralizovani.
· Hromozomi koji se sada okvimo nalaze na . :celije obrazujt{ekvatorijalmi ravan: U . anafazi dolazi do
. segregacije {razdvajanja) hroriiozoma kontrakcijom niti deobnog vreteha koje vode .od centriola do centromere, pri
cemu ovaj proces omogucavaju motomi proteini i ATP; hromozomi migriraju pr'ema·polovima eelije i kada
dospeju do polova eelije, nastupa .telofaza. Tokom telofaie dolazi do ponovriog organizovanja jedrove membrane uz
pomoc fragmenata EPR-a, formfranja nukleolusa i ostalih organela. U ekvatorijalnom delu citoplazme dolazi do ··
konstrikcije (suzavanja) citoplazme i obrazovanja deobrie brazde. Duzina deobnebrazde .se postepeno smanjuje i
· uzrokuje citokinezu:{podela:citoplazme): kod do formirahja fragrilozoma, zbog pns·ustva celuloznog
zida:. Fragmozomi su. poreklom od Goldzijeybg. aparata ili'EBR FpredstaVIjaju vezikule· koje.se akumuliraju i spajaju u · . · · ·
· .. ekvatorijalnom .regionu· celije t krecu se pretna·zidcivirila·celije; dok· se·he formira deobna ploca koja sa obe strane .
akumulira Na taj nacin:nastaju.dye '6erke ceiJjei :koje. nose identicni nasledni materijal u jedrima. ··. ·
Mejoza je slozena eelijska deoba, deo prb6esa'koji' nazivamo g·ametogen·eza; r-·l?astoji se od mejoze I i mejoze 11,
pri cemu se u obe deobe opisuju profaza; metafaza; . a·nafaza T (slika . 70). Profaza mejoze I je ·
. .s.as..tP.fi .Se .. opJ>.el,P.odfaza:: ,Ieptq.ten •. diploten i ·
dijakinezis. U toku :teptotena pocinje spiralizacija hromatina. i pocinju da .. se uoeavaju hromoneme (hromatinski
konci) koje su spojene sa unutrasnjom· U zigo.tenu se hrpmozomi jos vise skracuju i
zadebljavaju, homologi hromozomi . se pnblizavaju·, i 'pocinju. da.: sinapsiraju 'pre.ko krajeva koji su povezani za
unutrasnju nukleamu membranu. Proces sinapsin1nja naziva se sinapsis i ·hromozomi koji su sad a jedan blizu
drugog obrazuju sinaptonemalni pa izgleda kao da :se polovinci'njih izgubila. Pahiten se odlikuje po
sto se formiiaju tetrade {bivalenti) i dolazi !;la U ·diplotenu se zavr5ava krosing-over,
. sinaptonemalni kompleks delimicno. ,pif: cemu·:. hrornqzomi. spojeni preko hijazmi,. koje .
predstavljaju mesta genetickog · Dijakinezis :je· posfednj;iJaza profaztf mejoze I, i odlikuje se dodatnom ·
spiralizacijom i pomeranjem. hromozma ·periferiji jedra, :nestajaiije nukleolusa (koji su bili zakaceni za
. hromozome) i fragmentaciju jedrove membrane. Metafaza mejoze I se odvija identicno metafazi mitoze, udvojeni
od kojih se svaki sastoji ad· po dve smesteni su u ekvatorijalnoj ravni. U anafazi mejoze I celi
hromozomi razdvojeni na mestima su' bili spojeni hijazmama,·. sac a. putuju na suprotne. polove celija. u
telofazi mejoze I se vrsi reintegracija jedra· i eelijskih: cirganela; uz cifokiriezu,- pa se dobijaju dve cerke celije sa
diploidnom strukturom hromozoma. lzmedu mejoze I i mejoze 11 postoji kratak perio.d interfaze ili se interfaza ne
uocava ... Mejoia' 11 se desava tako . sto , se ··sada hroniozomi koji se sastoje od dve hromatide postavljaju u
metafaznu 11 deobnu ravan i u anafazl :11 : deobom centromera r povlacenjem hromatida-sada hromozoma sa
' • • ' o • t ; ' ; • . :. ' ' •.: ' ' .. o: • • I
· .. : .
17
J
' .
y=·
· Gametogeneza
fonniranje visokodiferenciranih
polnih celija.:.. gameta
• izogamija
• anizogamija
• oogamija
- Metafrte I Metazoe
· -·.
: ,.
Slika 71 - Podela gametogeneze
Gametogeneza - oogeneza
·tiJ·
2"ii· fa:za razmnoiannja: '
· ·· .-· mitotske dcobc gonlja: ·
2ri iri zn· in
Og
.,
.. L.. -- '' Rm-iMMfi&itrt!Mf3Wati!!

:

.· :.
f>_l - :..;. ,... -·.
,.
Slika 73 - Oogeneza
. .
• l' r
mirova.nja u toku oogeneze
· ' i
:
.
;
·, Gametogeneza - spermatogeneza
Sg
· Scl
. Sell (il> . (-;)
. Std (n, (Q) . .
sz /:nJ · .'n) rn: , .
. ,.' I
Slika 72 - Spermatogeneza ..
Aktivnost oogeneze.
• pocetak
- embrionalni period
stadijum mirovanja -diktioten
rodjenje - · polna zrelost
nasti:ivak sazrevanja u ciklusima
...,. ovulacija - kraj mejoze I
· - oplodjenje metafaza 11
... , ..
Slika 74- Aktivnost"qageneze
· Spermato·geneza ·.:.·regulacija
,· . ; . . .. . .
: Slika 76 - Endokrina regulacija
/
.• :: . _,!
.:/{

·-
Human a genetika- Repetitorijum
haploid nom strukturom, odlaze na suprotne polove celije. Kao telofaze 11 se dobijaju cetiri haploidne celije,
ili u slucaju mejoze oogeneze samo jedna jajna celija i dve do tri polocite. :. · .
celijski ciklus je precizno kontrolisan putem kontrolnih punktovana kojima se kontrolise prethodno odvijeni
proces i ukoliko postoji odredena greska ana se ispravlja, a ako ne moze da se ispravi celija ulazi u
. apoptozu (geneticki programirana celijska smrt). . . .
. ' ;
: · ·!
. 21 . . Gametogeneza
Gametogeneza je proces .· nastanka visoko diferenciranih polnih celija (gameta) iz nediferentovanih
germinativnih celija, zapocinje u fetalnom periodu, a intenzivno se r;tastavlja za vreme reproduktivnog
perioda jedinke .od puberteta do i (slika .71). Spermatogeneza je proces formiranja
muskih gameta (spermatozoida), a . oogeneza . proces tormiranja zenskih gameta Uajnih celija-ovuma).
Spermatogeneza se odvija u semenim kanalicima testisa, funkcionalnirri jedinicama testisa (slika 72). Oogeneza se
odvija u folikulima jajnika, funkcionalnim jedinicama jajnika (slika 73, 74 i 75). Muska i zenska gametogeneza se
sastoje od tri faze: faza razmnozavanja, faza rasta i faza sazrevanja. U fazi razmnozavanja dolazi do intenzivnih
mitotskih deoba primordijalnih germinativnih celija koje time postaju gonije. Gonije imaju 2n garnituru, kod
muskaraca to su spermatogonije, a kod zena oogonije i zajednicka karakteristika muskih i zenskih gonija je okrugao
oblik sa krupnim ovoidnim nukleusom. Faza rasta interfazi celijskog ciklusa, jer se u njoj vrsi replikacija
DNK molekula, tako da se hromozomska garnitura udvaja. U fazi rasta se spermatogonije i oogonije povecavaju i
prelaze morfoloski u primarne spermatocite· i primarne oocite. Faza rasta je znatno upecatljivija kod zenskih
gameta, zato sto se u njoj vrsi jos i previte!ogeneza i vitelogeneza. Vitelogeneza (stvaranje zumanceta) je proces
kojim se sintetisu materije bogate energijom, potrebne za rani embrionalni razvoj . Faza sazrevanja obuhvata
prolazak muskih i zenskih gameta kroz proces mejoze. Kod muskaraca nakon mejoze · I nastaju sekundarne
spermatocite (dve celije), a kod zena sekundarna oocita Oedna eelija). Oba tipa gameta imaju haploidnu garnituru.
Kod zena se uocava qa nakon mejoze I ne nastaju dve morfoloski iste celije.,vec se one znatno razlikuju u velicini.
Krupnija celija je sekundarna oocita, a sitnija je primarna polocita (polarno telo), koja ne ulazi u diferencijaciju
definitivnog zenskog gameta i ne ucestvuje u procesu oplodenja, aiL ima identican genetski sardzaj kao i oocita.
Nakon mejoze 11 nastaju kod muskaraca cetiri spermatide, a kod zena jedna ootida (koja je sposobna zaoplodenje)
i tri sekundarne polocite. Spermatide su loptastog oblika i .nuklelisa·i da bi se· diferencirale u spermatozoid potrebno ·
je da produ kroz fazu spermiogeneze. u kome se spermatide tr'ansformisu u spermatozoide, prolazeCi kroz
niz morfo"fizioloskih modifikacija, naziva ·se spermiogeoeza; U toku: ove, faze dolazi do smanjivanja volumena ··
nukleusa•i njegove kondenzacije; 'celija· pri cemlLse mitoh9ndrije,' centrozom i jedro nalaze na
jednom, a Goldzijev aparat na drugom pol.u celije .. Na racun Gold?ijevog aparata ilastace akrozom, koji se nalazi ·
na glavi spermatozoid a. U akrozbtnu .se enzimi kojr ce cummulus oophorus-a,
coronae radiatae, zonae pellucidae i plazrn-a; membrane oocite i heposrednb tmiogu'citi oplodenje. Na suprotnom polu
celije nalazi se centrozom i jedro, dok se. mitohondrije rialaze u vratu spermatozoida .. Spermatozoid ima i dugacak
bic koji je mikrotubularne grade, a energiju za njegovo pokretanje daju mitohondrije, koje se nalaze u vratu i
· sintetisu ATP. Spermatozoid definitivno sazreva! postaje pokretljiv,kada 11apusti pasemenik tj. ductus epididymidis.
· . Da bi se. spermiogeneza normalno odvijala';ljutr.itiVne niaterije Li :serrieoim kanalicima obezbeduju Sertolijeve celije,
dok grupa Lajdigovih celija vrsi sintezu androgena (inuskih polnih t16hnona) · (slika 76). I na spermatogenezu i na
oogenezu uticu brojni fizioloski faktori 'kao sto su hormon.i, doba; temperatura, pH i brojni
biohemijski faktori. ·. Takode treba. naglasiti ·su gaineti' osetljiVe ,celije preme1 · uticajima spoljasnje sredine (npr.
zracenje) i da njihovo ostecenje moze doves.tl do (neplodnosti) ili.razvijanja defektnog potomstva.
. . . . .. . ' .. : ; . . ·. ' :: ! ; . • ; : · .. ) . . ! . . • . :. . .• • • '
• . . J ., , . .· .
·. · : • , · I ; _ i : ;.
22 .. Oplodenje
Oplodenje (fertilizacija) je proces spajanja muskih i zenskih gameta, pri cemu se obrazuje
diploidni zigot. Oplodenje se kod sisara· ·odvija u ampularnom delu·jajovoda. Oplodenje se sastoji od nekoliko
etapa: kapacitacija, akrozomska ' reakcija spermatozoida u genitalnom traktu zene, aktivacija oocite,
penetracija spermatozoida kroz plazma . membra nu. oocite i . spajanje pronukleusa (jedarnog sadr:Zaja
spermatozoida i ·sekundarne oocite) . .Kod coveka proces ovulacije .. . (deo .menstrualnog ciklusa), tj, izbacivanje
seklindarne oocite iz tercijarnog · folikula jajnika, prethodi oplodenju (slike .J7: i 78). Da bi spermatozoid dosao do
jajne celije u Falopijevom kanalu (tuba :uterina),· neophodan je normalah motilitet (pokretljivost) (slika 79).
18
.. :.-.
.. Meristrualni ciklus
Menstrualni cik/us
f, :LH
..
J. dnn
·-
---·•:"'.

hipofiza
ovarijum
····--'-·-·--·
m·uladja

Slika 77- Tok menstrualnog ciklusa Slika 78 - Endokrina aktivnost u toku menstrualnog ciklusa
.·' ·
· ...
Oplodjenje kod sisara i _coveka
u jajovodu
- proksimalni deo Milerovog kanala
• neophodna kapacitacija sz.
cJ.? i;iLD -iD .
.... ·-:'-:::.··· ......

.... .. .... ..: ... ...
Slika 79 - Proces oplodenja
·-- .
·-···:
Oplodjenje i brazdanje zigota
.• r ' .

•,,-J- ""O :.I,_ .; .. <:-!"••
Slika 80 - Brazdanje zigota
. t.: .... ·;.··
:.• ... .: .. :·
. : ; -
-
. ·.
.

- Humana genetika - Repetitorijum
Spermatozoidi se u kontaktu sa polnim kanalima iene aktiviraju i time postaju mobilni, a celokupan proces koj i
obuhvata · navedene promene naziva se kapacitacija. Motilitet, koji ... je . posledica kineticke akcije repa
spermatozoid a, obezbeduju svojom energijom gusto· napakovane mitohondrije, · koje se nalaze u vratnom regionu
spermatozoida. Spermatozoidi se takode transportuju do mesta oplodenja uz pomoc cilija i ritmickih kontrakcija
· misica zida jajovoda i kontrakcijama uterusa. Normalan proces oplodenja vrsi jedan spermatozoid, ali da bi on
mogao da oplodi jajnu celiju, potrebno je oko 10.000 spermatozoida koji ce prokrciti put svojim enzimi11.1a do
i kroz omotace jajne celije. Akrozomska reakcija spermatozoida nastaje kada spermatozoid dobije signal da je
stupio u kontakt sa celijskom preprekom, pri eeinu se iz akrozoma oslobadaju enzimi spermolizin i hijaluronidaza,
kao i neki drugi enzimi koji olaksavaju penetrabilne sposobnosti spermatozoida. Spermatozoidi koji nisu akrozomalno
odreagovali nemaju mogucnost da se spoje sa plazma membranom jajne celije. Vrh plazma membrane
spermato?:oida se fuzionise sa plazma membranom jajne celije, pa zatim otpusta nuklearni sadrzaj koji ce formirati
muski pronukleus. U glavi spermatozoida nalazi se i centrozom koji ulazi u citoplazmu jajne celije i omogucice
stvaranje deobnog vretena tokom prve mitoticke deobe oplodene jajne celije ili zigota. U momentu kontakta jajne
celije i spermatozoida, nastaje aktivacija jajne celije, oocita 11 nastavlja mejozu 11 i zavrsava je. Za zavrsetak mejoze
11 neophodno je da dode do oplodenja jajne celije. Jajna celija tokom ulaska spermatozoida otpusta glikoproteinske
granule koje obezbeduju odvijanje kortikalne reakcije. Ova reakcija sprecava polispermiju (prodiranje vise
spermatozoid a u jajnu celiju). Od ienskog nukleusa stvara se zenski pronukleus .. Spajanjem muskog i zenskog
pronukleusa nastaje nukleus, a proces se naziva miksis. Ovaj dogadaj je pocetak ontogeneze buduce jedinke
koja traje do smrti iste. Nakon formiranja zigota nastupa njegovo brazdanje mitotickim deobama i postepeno razvice
novog organizma.
23. Determinacija i diferencijacija embrionalnih celija
Zigot koji nastane u procesu oplodenja, nakon kratkog vremenskog i_ntervala, ulazi u mitotsku deobu, odnosno
zapocinje brazdanje. Od zigota, jedne jedine celije', nastace, multicelijski .·organizam, sa oko 200 razlicitih
celijskih populacija kod coveka i oko sto biliona novih celija (slika 80). Zigot ima osobinu omnipotentnosti.
Prve dve celijske deobe su uglavnom determinisane sadriajem iz citoplazme oocite koja sadrzi iRNK prethodno
sintetisanu upravo · u ovu svrhu. Celijskim deobama. tokom ranog embrionalnog razvoja blastomere postaju
manje, postepeno pocinju da se menjaju, diferenciraju i·time .iz.omnipotentnih postaju'multipotentne celije.
To znaci da ce u jednom stupnju razvica blastomere ·diferencijacijom dati veliki broj razlicitih celija koje i dalje imaju
sposobnost diferencijacije (multipotentne celije); .. dok. ce kasnije davati ·sve manje i manje razlicitih celija kako
diferencijacija napreduje. Konacno nakon sto se embrionalne celije' svedu na jedan put diferencijacije one ce postati
unipotentne (npr. diferencirace se samo:u eritroeiteili neurone, itd.). Celija koja je diferencirana osposobljena je da
vrsi odredenu funkciju. Mehanizam: di{erencijacije embrionalnih celija ··se objasnjava regulacijom genske
ekspresije i regulacijom embriogeneze. S obzirom·da svaka covekova celija sadrii isti fond gena, to bi znacilo da
ce sve celije vrsiti istu ulogu i biti morfo-fizioloski istovetne. Medutim, razlika izmedu diferenciranih celija je ta sto
svaka vrsi biosintezu specificnih proteina koji celiji dajli funkcionalnu i morfolosku specificnost. Geni koji ce
biti neophodni za sintezu proteina odredene diferencirane celije-ce se konstitutivno (stalno) transkribovati, dok ce
oni kojLnisu specificni, za _tu .celiju biti utisani putem metilacije ili iranskripcionih faktora. T ako su kod central nog
. neuron a geni za alfa i beta globinske lance hemoglobina 100% metilisani, jer nervna celija ne sintetise hem_oglobin.
Vee je receno da u procesu diferencijacije veliku ulogu ima citoplazma jajne celije. Pre oplodenja citoplazma jajne
celije nije ni hemijski ni fizicki uniformna. Ona pokazuje brojne regiorie koji sadrie odredene supstance, inkluzije,
specifican raspored organela, kolicine RNK itd. Nakon oplodenja, nastupa brazdanje, pri cemu se celije nakon svake
sledece deobe smanjuju i na taj nacin kvalitativn·o razlicitu dtoplazmu zigota. Citoplazma je vazan faktor
koji determinise aktivnost jedra, celijsku polarizaciju i reakciju na signale iz spoljasnje sredine. Jedra
blastomera ce pokazivati razlicitu aktivnost gena, bas zbog razlicitog delovanja citoplazme, sto se uglavnom odnosi
na prve celijske deobe. . . .
Dakle celijski razvoj ili diferencijacija je determinisan sadrzajerri naslednog· materijala; biofaktorima u citoplazmi
oocite koji poticu od majke i sadejstva, (komul)ikaeije) izniedu blastomera (celija) kao i razlicitim drugim
signalima koji dolaze iz organizma koji se razvija i taste. Konacrio diferencirana celija maze se dediferencirati
malignom transformacijom. · · · ·
19
.. ::1'
. ·.)
.,

-:;.,.
'
•'
NUI\in:i.RICKE ABERACIJE
HROMOZOMA
• POLIPLOIDIJE
TRIPLOHHJE (3n) ·. npr. · SB,,XXX
TETRA
..,JOIDIJE (4n)
r- .. .;.·""'-:-r•lf, !'!':
• ANEUPLOIDIJE
TRIZOMIJE (2n + 1}
MONOZOMIJE . {2n -1) ;,
•.·
TETRAZOMIJE (2n + 2) 48, .:IGO..v'''"' ·
PENTAZOMIJE (2n + 3) 49,X}lli.Xi(
Slika 81 - Klasifikacija numerickih hromozomskih aberacija
Aberacije hromozoma su prisutne:
• 0.6°/o ;1 fi:O). novorodjencadi
e 60°/o ranih spolitanih pobacaja .
Cl 5.
0
/o kasrlih spontanih, pobacaja
e 4-5o/o mrtvorodjene:dece
. ... .'. - .
. .. . - . .. . ... ·,
Slika 82 - Prist.itnost hromozomskih aberacija
. ;.-...
'· ... ... '"'
. . , .
'· -?:-
./ .
..·
.
.. ·.

• • • .. le·
'. ...... : .
. t .
·.:
·· .. ..;,;,.


'-:·
Human a genetika- Repetitorijum
24. Etiologija numerickih hromozomskih aberacija
Numericke hromozomske aberacije (hromozomske mutacije) su poremecaji koji se odlikuju odstupanjem od
karakteristicnog broja hromozoma za vrstu (slika 81 ). Ove aberacije mogu da zahvate pojedinacne
hromozome, sto nazivamo anei.Jploidijorn kaO j CeO hrOniO?Omski set, StO Se oznacava kao poJipJoidija.
Normalan sadri:aj naslednog materijala naziva se euploidija. Poliploidije su aberacije kod kojih dolazi do
umnozavanja celog seta hromozoma. Tako se mogu dobiti triploidni (3n), tetraploidni {4n), a rede pentaploidni {5n)
organizmi. Kod coveka poliploidije nisu vijabilne (kompatibilne sa zivotom), dok se kod nekih vrsta biljaka javljaju
kao korisna odstupanja. Etiologija (uzrok) humanih poliploidija je raznovrsna, Ovaj tip mutacija maze nastati kao
posledica endoreduplikacije (replikacija DNK bez deobe) u gonijama, pri cemu se stvaraju diploidni ili triploidni
gameti. Jos jedan od nacina nastanaka je polispermija, pri cemu dva spermatozoida oplode jednu normalnu jajnu
celiju; pa take nastaje triploidija. Etiologija tetraploidija .se posebno naglasava, jer on a nastaje u postzigotnom
stadijumu, na taj nacin sto se DNK replikuje, ali se ne vrsi deoba (supresija deobe). Medutim i poliploidija se maze
uociti kao normalna pojava kod nekih populacija humanih celija (hepatociti, tkivo placente, osteoklast, itd.).
Druga grupa hromozomskih aberacija su aneuploidije. Pod pojmom aneuploidija se podrazumeva povecan ili
smanjen broj pojedinacnih hromozomskih parova. Naime, ukoliko dode do nerazdvajanja odredenog
hromozomskog para u anafazi mejoze (I ili 11) ili mitoze jedna od celija ce imati jedan hromozom u visku, a drug a u
manjku. Celija koja ima jedan hromozom u visku je trizomicna (2n+1) za dati hromozom, a aka se radi o gametu
(koji je dizomican n+1), on sa normalnim gametom obrazuje trizomican je
ostala uskracena za dati hromozom je monozomicna (2n-1) ukoliko se radi o somatskoj celiji, a ukoliko se radi o
- -
gametu, on je nulizomican (n-1), a nakori oplodenja zigot je monozomican (2n-1).
Nerazdvajanje je uzrokovano asinapsisom ili desinapsisom. Asinapsis je pojava da dva hromozoma ne
sinapsiraju u profazi prve mejoticke deobe, ne formirajuci hijazme. Desinapsis je pojava da se sinapticki kompleks
rasformira pre vremena, zbog prevremenog razdvajanja hijazmi. Kao posledica oba slucaja, razdvojen hromozomski
par u metafaznoj ekvatorijalnoj ravni daje univalente (pojedinacni hrbmozomi), pri cemu ce oba univalenta
segregacijom u anafazi biti privuceni na jedan pol celije.
Poremecaji u sastavu i funkciji deobnog vretena jedan su od najcescih uzroka aneuploidija.
Jos jedna od pojava koja je vezana uz pojavu aneuploidije je i mozaicizam (miksoploidija). To je pojava da
us led .postzigotnog nerazdvajanja .na rani m stupnjevima razvica, dode do aneuploidije u jednoj od blastomera. T ako
ce nakon odredenog vremena, sve one celije koje su nastale od abe'rantne .blastomere biti aneuploidne. Tako ce
jedinka postati mozaik za broj hromozoma, pri cemu ce.jedna Jinija celija, kojaje nastala od. normalne blastomere biti
normalna, dok ce on a linija koja je· od abercmlne.blastomere-u sebi nositi
Faktori koji dovode do navedenih gresaka u mehanizmima deobe, su p6deljeni na sredinske i geneticke. U
sredinske faktore spadaju razne vrste ]onizujucih _zracenja, toksicne i ktiniulativne (nagomilavajuce) supstance,
infekcije virusima, autoimune bolesti; kao - i $tarost - Prema novim istrazivanjima
ustanovljeno je da je starost majke, nesto manje oca, vrlo bitna za dobijanje zdravog potomstva. ·
Geneticki faktori se odnose na pojavu da u porodici postoje zajednicke pojave vezane za proces nastanka
aneuploidija: Tako je uocena je predispozicija za vremenski neadekvatnu podelu centromera (anafazno zaostajanje)
ili greske u stvaranju deobnog vretena. Aberantni hromozomisi.J najcesci uzrokspontanih pobacaja (slika 82) .
. ;.... ' . . . - . ' .· . . .
25. Fenotipska ekspresija -numerickih.aberacija
Kod coveka postoje brojne numericke aberacije autozoma, pri cemu .su najcesce trizomije. Monozomije Gedan
hromozom u paru nedostaje) autozoma nisu vijabilne kod coveka, izuzev monozomije X hromozoma.
Najcesce numericke aberacije autozoma su trizomija hromozoma 13, 18 i 21 . Sve tri trizomije su rezultat
nerazdvajanja hromozomskog para u toku anafaze celijske deobe. ·
Trizomija hromozoma 13, (47,XY+13), drugacije se Patau sindrom. Odlikuje se mikroftalmijom, multiplim
anomalija, polidaktilijom, rascepom usne j .nepca, srcanim malformacijama itd. · Ucestalost ovog sindroma u populaciji
je 1/12.000 novorodene dece, pri cemu se sa staroscu majke statistika menja u korist povecanja ucestalosti . Oko
50% obolelih umre u prvih mesec dana postnatalnog zivota, a samo 10% dozivi prvu godinu.
Trizomija hromozoma 18, (47,XX+18}, se naziva i Edvardsov sindrom. Fenotip se odlikuje malom telesnom
tezinom, multipnim anomalijama, srcanim ma-nama kao i malformacijom :bubrega itd. Ucestalost u populaciji je
- . .
20
-


·: ·
'
,,.. .'
. ..-


..
Tipovi strukturnih aberacija
INTRA
hromozomske
- delecije
- duplikacije
- inverzije
• INTER
hromozomske
- translokacije
- duplikacije
. . . . ... ·:
·: BALANSIRANE iA.i:;
: · ..:;· ! .: . ;!·:;·
:.: _ · .:·:_:
'· .· . ; :,:,:
... . . "
:... ::-
• 'NEBALANSIRANE'
··•, .
Slika 83 - Podela strukturnih aberacija hromozoma
De/ecije- parcijalne monozomije
terminnlne intersticijnlnc
Slika 85 - Nastanak i podela delecija
Strukturne aberacije - uzroci
Uzrok:
- PREKID na hromozomu/hromozomima
hromozomski
Slika 84- EtioJogija strukturnih aberacija hromozoma
,, .. '
,-.·
Prstenasti- ring hrompzom
-
0
'
'
• . riestabilan ii deobi celije
"ring sindrom"
ii \ ...: u tu ·
;: ,;· . ,. .
Slika 86- Ring-hromoz6tn
Duplikacije parcijarne trizomije
.

/ :·

Slika 87 - Duplikacije ·

• •
CIIIQIIII:IIU;t!"ca
·

Human a genetika - Repetitorijum
1/6.000 novorodencadi , ucestalost se povecava sa staroscu majke. Oko 30% obolelih umire u toku prvih mesec
dana, a 10% dozivi prvu godinu postnatalnog zivota. : . . . ·. ;. . '
Trizomija hromozama 21,(47,XY+21) ili Daunov sindrom (sindrom mongolbidne idiotije), je najcesca humana
autozomalna aneuploidija. Ujedno . je i najbolje ispitana od svih ostalih aberacija, iz razloga sto osobe sa ovim .
sindromom imaju duzi zivotni vek (oko 30-40 godina) u odnosu na obolele od prethodno navedenih sindroma.
Fenotipski se ogleda u mentalnoj retardaciji, pri . cemu IQ varira od 25-50, hipotoniji, mongoloidnim ocima,
neartikulisanom govoru, srcanim manama (od kojih najcesce umiru),· vecom sklonoscu ka leukemiji i "majmunskom
brazdom" (dermatogliD. koja se uocava da ide neprekidno duz dlanske strane drugog, treceg, cetvrtog i petog prsta
leve ruke .. Ucestalost u populaciji je 1/700, a povecava se znatno sa staroscu majke. Najveci broj (95%) obolelih ad
Daunovog sindroma imaju prostu trizomiju 21, pri cemu do·greske najcesce dolazi u mejozi majke. Postoje i
slucajevi mazaicizma koji su zastupljeni sa oko 1-2% obolelih, · dok su oko 5% obolelih osoba nosioci
translokacionog oblika mongoloidne idiotije. Treba napomenuti da osobe koje imaju Daunov sindrom uzrokovan
translokacionom trizomijom ili mozaicizmom imaju znatno blazu varijantu prethodno opisanog fenotipa.
Ked coveka su ustanovljene jos i trizomije 3, 7, 8, 9, 10, 12, 15, 16, 19, 20 i 22, ali su one prava retkost u populaciji
take da se njihovom proucavanju ne pridaje veCi znacaj od osvrta na pojedine slucajeve.
26. Nebalansirane strukturne hromozomske aberacije .
Aberacije, pri kojima dolazi do promene uobicajene grade (duzine, rasporeda genskih lokusa) hromozoma
nazivaju se striikturne ·(aberantni ' hromozom -rrorma!:a:
prolazi naredne deobe) i nestabilne (aberantni hromozom podleze novim prekidima u narednim deobama).
Medutim, znacajnija je podela na balansirane i nebalansirane hromozomske aberacije. Balansirane aberacije
su one kod kojih ne dolazi do gubitka ili povecanja broja gena zahvacenih ·aberacijom.' Nebalansirane aberacije se
odlikuju gubitkom ili povecanjem fond9 genetickog materijala. U · nebalansirane i strukturne -aberacije spadaju
delecije, iing-hromozom, duplikacije i izohromozom. Ove aberacijesu uvek stetne za nosioca.
Delecije (del) su nebalansirane strukturne aberacije u toku kojih .dolazi .do prekida na hromozomu i gubitka
odredenog segmenta (slika 85). Deo koji se izgubi ne sadf'Zi centromeru, ' ne maze da se veze .za niti deobnog
vretena, sto ·znacL njegov gubitak u toku deobe; Postoje dva tip a delecija, ·prema . tome gde nastaju, Prvi . tip su ·•
terminalne koje podrazumevaju prekid- n? jednom · mestu ;i gubitak del a jednog od kraka, Drugi tip su .•
intersticijalne delecije; . koje nastaju dvostrukim.prekidima jednog .od kraka hromozoma. lntersticijalne delecije
uslovljavaju -gubitak. sredisnjeg, del a nekog kraka;:. pa •nakon. Sto • se ,deletira ·sredisnji region, spajaju se mesta. na ..
kojima su se dogodili ·prekidi: Delecije· f)astaju kao.rezultat nejednakog ili aka je jedan od roditelja
nosilac balansirane strukturne aberacijEL Delecije aiJtozoma su uvek stetne za nosioca i letalne su u heterozigotnom
stanju, jer se stetni · recesivni aiel n.a bomologor:n · hromozomu ispoljava: u fenotipu. Ova pojava se naziva
pseudodominacija. Najpoznatiji delecioni sindrom je Cru du chat (maciji plac) sindrom koji nastaje delecijom
.. (5.p:-.) .. f.enotip,je k'!rakteristican .. DO tome sto lica nosioca podseca na
maciji lik, karakterislican plac koji podseca na maukanje i ponekad rnentalna retardacija. · ·
Ring-hromozom (r) nastaje kada dode do deletiranja oba telomerna regiona na hromozomu (slika 86). S obzirom da
su telomernLregioni zaduzeni. za .ocuvarije.linearnbg integriteta·hrcimozorna, njihovim gubitkom krajevi aberantnog
hromozoma postaju lepljivi sa teznjorii da konjugiraju. · Oni se spajaju .i grade prstenastu strukturu nazvanu
ring-hromozom. Nastanak ring hromozoma uoeen je svim ·hromozornima. coveka .. Sto je ring-hromozom veci
( deletirani segment · je manji) ,. to. su .stetne posledice · manje. ·· Najcesce· : .ucicen •: poremecaj vezan-:za ,postojanje.
· ring-hromozoma je I aka mentalna retardacija .i mC)nja telesna .visina. Ukoliko .dode ·do :riormalne replikacije
ring-hromozoma nakon · deobe obe cerke-. celije iniaqe ideritican ririg-hromozom>Medutim,<ukoliko dode dorazmene.· ·
sestrinskih hromatida ring-hromozoma; onda' dolazi :do nerazdvajanja·, stO ce .u buducim generacijama dovesti do -
nastanka novih prekida na ring-hromozomu. · ·
Duplikacije (dup) su aberacije u toku kojih dolazi do udvajanja odredenog segmenta hromozoma (slika 87).
Udvajanje maze nastati nejednakim krosing-overom; insercijom segmenta jednog homologog hromozoma u d·rugi ili ·
ukoliko je jedan od roditelja nosilac balansirarie.strtikturne aberacije. Da bi doslo do insercije (ins), neophodna su tri
prekida na homologim Ova. prekida isecaju jednog homologog · hromozoma, a treci
obezbeduje ugradivanje tog segmenta u drugi homologi hromcizom. U slucajevima insercije jedan od homologih
hromozoma dozivljava deleciju, a drugi duplikaciju. Nepravilan krosing-over podrazumeva da se homologi
hromozomi asimetricno sparuju. Kod coveka usled nepravilnog krosing-overa izmedu segmenata za
21
J
· ····.'·,
,..
· lzohromozoin
.P
···...... q
: ......•
q
q
Slika 88 - Nastanak izohromozoma
· Inverzije: pericentricile
paracentricne.
• nosilac ima NORMALAN FENOTIP
11
H
Slika 89 - Nastanak i podela inverzija ·
. ,.
translokacije
r10i-in:iini
hromozomi

'
; '
homozigotna
translokacija




Slika 90 - Recipmcne translokacije
- ..... .. .
....
; . .;
Human a genetika - Repetitorijum
hemoglobina dolazi do nastanka defektnih oblika hemoglobina Lepore i Kenya. Hemoglobin Lepore i Kenya uzrokuju
nastanak jake anemije. Ouplikacije su fenotipski manje stetne od delecija, a takode su znacajne u evoluciji , jer
obezbeduju dodatni geneticki materijal koji je sposoban za nastanak novih funkcija, tj. divergencije gena.
lzohromozomi (i) su specificni hromozomi koji imaju duplikaciju jednog i deleciju drugog kraka (slika 88). Nastaju
nepravilnom (poprecnom) podelom centromere i u prvom stupnju su telocentricni hromozomi. Oni brzo menjaju
. prostornu konfiguraciju i nakon replikacije postaju izohromozomi koji su metacentricni jer su nastali od dva ista kraka.
lzohromozomi nastaju u anafazi 11 mejoticke deobe poprecnim .(umesto uzduznim) deljenjem centromere.
lzohromozoml mogu biti i dicentricni, a nastaju nakon prekida i preraspodele dva nehomologa hromozoma ili dva ·
homologa·hromozoma. Ovi hromozomi imaju dve centromere, najcesce nastaju u G2 fazi celijskog ciklusa.
27. lnverzije
Ukoliko dode .do promene normalnog rasporeda gena u okviru hromozoma onda se takva aberacija naziva
inverzija (inv) (slika 89). lnverzije su balansirane aberacije, zato sto u toku njihovog nastanka ne dolazi do gubljenja
ili udvajanja segmenata genetickog materijala, vec samo do njihove preraspodele duz hromozoma. Postoje dva tipa
inverzija. Paracentricne inverzije su one koje ne dovode do promene pozicije centromere. Nakon sto se naprave
dva prekida, segment ogranicen prekidom se rotira za 180°. i ponovo se inkorporira u hromozom, prH:emu remeti
normalanredosled genskih lokusa. U tok!J mejoze homologi hromozomi ne mogu da sinapsiraju praviln<;>, pa grade
inverzionu petlju. Nakon krosing-overa nastaje dicentrican hromozom i acentrican (bez centromere) fragment
ne .maze . .da .k.onjugir.a .. sa .oitima.deo.bn.qg _vretena .. U .anafazi .l..dolazi.do pri
cemu dicentrik daje dva hromozoma, od kojih svaki ima jednu aberantnu hromatidu sa delecijom. Nakon mejoze 11
nastace jedan nqrmalan garnet, jedan balansiran sa inverzijom i dva nebalansirana aberantna gameta sa delecijom.
lnverzije mogu biti i pericentricne ukoliko dolazi. do promene centromere u okviru hromozoma. Jedan
prekid je na p, a drugi na q kraku, pri. centromerq nalpzi izmedu prekida. Segment ogranicen prekidima
rotira za 180°i menja raspored genskih Jokusa i centromere. U toku zigotena dolazi do sinapsiranja dva homologa :
para. hornologi par je norrnalan, a ·drugi je nosilac pericentricne inverzije, pa rnorajli na specifican nacin da .
sinapsiraju gradeci inverzionu petlju. Nakon mejoze 11 nastaju cetiri gameta, od kojih je jedan norrnalan, jedan
balansiran·sa inverzijom i dva nebalansirana pri cernu svaki od njih irna deleciju i duplikaciju odredenog segmenta.
lnvei"Zije se nasleduju ·PO mendelskim pravilima; ·dok'je odnos fenotipski normalnih potomaka i potomoka
nosilaca inverzije 1:1. Uocena je pojava · da se: pericentricne inverzije cesto javljaju zajedno sa nekirn
aneuploidijama, . narocito sa. trizomijom 21 i trizornije polnih hromozoma. lnverzije mogu da deluju u pravcu
srnanjivanja fertiliteta. · ·
28. Reciprocne transloka9_ije · : : ·: · . ·.: . :
_su posebna grupa strukturnih u dolazi. dQ ..
materijala jednog hrornozoma u drugi. Reciprocne translokacije nastaju.kada dolazi do obostranog transfera
genetickog materijala izmedu dva hromozo.ma (sli_ka 90). ba!ansirane translokacije, jer je fond genetickog
materijala konstantan, ali u toku dolazi do stvaranja aberantnih hromozoma, zbog specificn0g ponasanja
hromozoma sa reciprocnim translokacijarna. U toku profaze I dolazi do sinapsiranja oba para hromozoma izmedu
kojih se desila translokacija i formiraju kvadrivalent (krstasta struktura). Kvadrivalent se u anafazi I maze razdvojiti
na tri nacina: 2:2 (dva hrornozoma odlaze u svaku celiju), 3:1 (u jedn!J celiju odlazi sarno jedan hromozom) ili 4:0
Gedna celija nece .irnati 2 hromozoma). J<od su .uoceni 2:2 i tipovi segregacije kvadrivalenata. Ukoliko
kvadrivalent podlegne 2:2 segregaciji postoje .trj . nacina . segregacije: alternativna, susedna-1 i susedna-2
segregacija. Ukoliko se kvadrivalent razdvoji alternativnom · segregacijom jedan garnet ce sadrZati normalne
hrornozorne, dok ce drugi garnet biti balansirim, jer ce . oba hrornozoma biti translocirana. Ukoliko se dogodi
susedna-1 segregacija oba gameta ce biti nebalansirana, jer ce u svakom od njih jedan hrornozom biti normalan, a
drugi biti deletiran. Kao posledica .dobijaju se nebalans.irani garneti, pri cemu ce svaki od njih
kao i kod susedne-1 segregacije, nositi normalan i jedan h.romozom sa delecijom usled translokacije.
Balansirane reciprocne translokacije su . uoeene kod infertilnih m!.!skaraca koji imaju azospermiju (odsustvo
spermatozoida) ili oligoastenospermiju (smanjen motilitet i broj sperrnatozoida), dok kod zena izazivaju infertilitet
ukoliko su autozoma i X hromozoma.
22
.'
.-
:
.. :' · ..to :·:·
Akrocentricni hramozomi (13, 14,15,21 ,22)
• · · : · .·
fenotip.
Centromwric
fus,ion
Normal
chromosome


Slika91.- Svojstva Robertsonovih
. . : . ·,i ; . . :· . ..._ ; . . . : . . . ; . . . : . -
_m,_q_nogenskih bolesti
r-: fi b"r"Oii::- ·· -::---· ·--,------------------ -·-----· --·--·i
I· Hemoglobinopatije
I· Fenilketonurija - . l
! • Hemohromatoza
1
' .. ·

distrofija .
pma na mJsJcna a ro IJa .
1 • Bolesti ekspanzije· trinukiEio.tida:
i -Hahtigtoriova hdrea
1
1 - ataksija ·
- Spinocerebelarna ataksija
I - X: .. .. ·.- .- .. . , 1
l_ _ __I
Stika 92- m·oriogenske bolesti kod coveka
. : . . . . ;·
. ._ · ...
. . . .
... . . .
- ..
o• • • • I • ' •. •
.,. , ..
•• • j
. . . .
. ., __ . .
. . ... .'.··.--,;
.f;.
: - ··•
.
Humana genetika - Repetitorijum
29. Robertsonove translokacije : .
Robertsonove translokacije (centricke fuzije) nastaju kada se translokacija vrsi izmedu dva akrocentricna
hromozoma. Ukoliko se translokacija vrsi izmedu dva homologa akro'centricna hromozoma onda se oznacava kao
homologa Robertsonova translokacija, dok aka se _vrsi izmedu dva heterologa akrocentricna hromozoma, onda se
radi o heterologoj Robertsonovoj translokaciji (slika 91). Robertsonove· translokacije nastaju tako sto se na
jednom akrocentriku prekid vr5i ispod centromere, ana drugom iznad, a zatim se spajaju prekinuti segmenti i nastaje
metacentrican (homologa R. translokacija) ili submetacentrican (heterologa R. translokacija) hromozom. Nastali
hromozom ima jednu centromeru, a centromera drugog hromozoma, ·kaja na sebi nasi dva para kratkih p kraka se
gubi u .toku deobe {minutni hromozom), Osoba koja je nosilac Robertsonove translokacije ima 45 hromozoma
i normalan fenotip, jer se radi o balansiranoj aberaciji i pored toga sto je izgubljen nasledni rnaterijal na p
.kracima. To se objasnjava take sto se u regionima p kraka akrocentricnih hromozoma nalaze geni za rRNK, pa
ukoliko se izgube sa dva hromozoma ani i dalje postoje na ostalim akrocentricima. Problemi sa ovom aberacijom
nastaju u profazi mejoze zbog nemogucnosti pravilnog sinapsiranja, pa se formira struktura pod imenom trivalent. · ·
On se sastoji od dva normalna hromozoma i treceg koji je translokacioni hibrid prva dva, dok se cetvrti minutni
hromozom izgubio. Kod homologih Robertsonovih translokacija nastaje jedan metacentrican hromozom.
Najveca incidenca pri nastanku ovog tipa translokacija uocena je kod 21 para hromozoma. U toku anafaze I ne
dolazi do razdvajanja, jer ovi hromozomi sada cine jedan. Nakon mejoze 11 jedan od gameta bice nulizomican, a
drugi dizomican za hromozom 21. Nulizomican garnet ce nakon oplodenja sa normalnim gametom, biti
monozomican za·21 sto dovodi do smrti plod(!. Garnet koji sadrii dizomican 21 ce nakon oplodenja sa normalnim
gametom.dati trizomican zigot za 21 hrom'ozom, sto ce kod ljudi nosilaca homologe Robertsonove translokacije
za 21(21q:21q) uvek usloviti nastanak potomstva sa translokacionim Daunovim sindromom. Najcesca incidenca
nastanka heterologih Robertsonovih kod kombinacija 13q:21q i 14q:21q. Kod nosioca
heterologe R. translokacije 14q:21q u zig.otenu profaze I formirace se trivalent koji ce se sastojati od hromozoma 14,
21 i 14q:21q. Postoje tri nacina segregatije trivalerita (6 razlicitih tipova·garneta), a to su alternativna, susedna-1 i
susedna-2 segregacija. U altemativnoj segregaciji nastaju dva gameta od kojih je jedan normalan (14,21), a drugi
nosilac balansirane Robertsonove translokacije (14q:21q). Oplodenjem normalnog gameta nastaje normalno
potomstvo, · dok ce oplodenjem balansiranog gameta nastati balansirana Robertsonova translokacija. Prilikom
susedne-1 segregacije. oba gameta bice nosioci nebalansirane aberacije. Jedan ce imati hromozom 14, a biti
nulizomican za 21' . pa ce nakon oplodenja normi:llnim g·ametom. doci do le tal ne aberacije usled monozomije 21
hromozoma. Drugi""ce imati hromozome 21 i 14q:21q, pa ce njegovim oplodenjem· normalnim gametom nastati
translokacioni Daunov . sindrom, · zbog .. trizomije·· 21 . U toku. · segregacije . nastaju •. nebalansirani gameti.
Jedan od njih sadriace hromozome ·14q:21q i)4, pa ce njihovitn oplqdjenjem nastati translokaciona trizomija 14 i
doci ce do letalnog ishoda. Drugi ce blti :mol')ozorriicar:i za 21 ·hromcizoni, a nulizomican' za 14, pa ce njegovim
oplodenjem nastati plod koji ce uginuti zbdg iiionozoniije hromozo'nia 14. Ucestalost reciprocnih i Robertsonovih
translokacija je 1 :500 novorodjencadi, dok je kod . spontariih pobacaja, razvoja multiplih anomalija i mrtvorodencadi
uoceno da je ucestalost 2,2-6,2%. · · · ·
30. Monogenske bolesti .
.;-· .
Monogenske bolesti (single gene disorders) se nasleduju preko jednog gena. Ove bolesti su jako retke i javljaju
se sa ucestaloscu ad 1-2% u populaciji .(slika 9.2). Najpoznatije monogenske bolesti su Hantingtonova horeja,
miotonicna distrofija, fibroza, Duchenne-ova misicna distrofija, itd. :. . ·
Hantingtonova bolest (horeja) je monogenska bolest k6ja se nasleduje autozomalno-doininantno. Utvrdeno je da
ukoliko se na genu koji se nalazi na kratkom kraku 4 hromozoma (4p16.3), nade neuobicajeno veliki broj CAG
ponovaka, onda dolazi do sinteze proteina hantingtina koji je naden u celijama centralnog nervnog sistema. Klinicka
slika_je sledeca: postepeno pogorsavanje kretanja, propada[lje intelektualne funkcije, demencija, grcevi lica i udova,
ukrstanje nogu, paranoja i generalno propadanje centralnog nervnog sistema. Bolest se ispoljava tek oko 35-40
godine zivota, dok je u 5% slucajeva ovog· oboljenja uocena pojava bolesti oko 25 godine duv.enilna Hantingtonova
. horeja). Nakon pojave obolele osobe iive 10-15 godina. . . . .
. Miot9nicna distrofija je autozomalno-dominantna monogenska bolest. · Njena ucestalost u populaciji je 1 :8000 i
cesto se javlja sa Hantingtonovom horejom., Gen. za miotonicnu distrofiju se nalazi na hromozomu 19. Ovaj gen
kodira enzim protein-kinazu i ukoliko se na 3' kraju kodirajuce sekvence ovog gena nade veliki broj CTG sekvenci,
23
...
;
, .. ·"
NORMALNO
··-.:
- - · - · • =
: . i ·_. . ; : . ' .
....
DELECI.JA
-.
lie- Phe _".;- my- V:al
. , .. -·
T ATC ATC TTT GGT GTT ..
T ATC AT· -- T GGT GTT ..
lie - Be- - -- - Gly- VaJ
Slika 93 :. Nastanak.cisticne fibroze
... :.
.. t
a
..a
0
"' 0
0'
L
..a
....,..,..
. . .
--, _.·
· ..
. .
. . Slika 95 .' Distribucija'.razlicitih tele'snih visi.oa 'J
.
-···.
. F: , . '
:_.·i •
,: - . 1
i ·
·.·
. ·· ·!.' ...
... \ _ __ ;
. :.
I.
·,· '
<:
Slika 94 - Disenova misicna distrofija
](1)
IQ
. ... · \
... .
. ...,
·;.·. __
.

.. :
.. .


>;<<:
-t-:•.-...
.. . _·:..·... ...
..... ·
. . .
Sliki96 Disfriblicija tazlicitlh koeficijenata inteligencije u populaci.
! ·.
f

· .;. ·:
Hum ana genetika - Repetitorijum
dolazi do patogeneze. Klinicka slika: postepeno razvijanje slabosti u misicima, miotonija (stanje u toku koga se misic
sporije relaksira nego uobicajeno), tresenje ruku, katarakta, poremecaji u sprovodnom sistemu srca, poremecenom
crevnom peristaltikom i atrofijom testisa. ,
Cisticna fibroza je autozomalno-recesivna monogenska boles! (slika 93) .. U preko 70% slucajeva cisticna fibroza
nastaje tackastom (point) mutacijom gena koji se nalazi na kratkom kraku hromozoma 7 (7p31). Ovaj gen kodira
integralni transmembranski protein koji je jonski kanal za jone hlora: Mutacija (delecija) se najcesce desava u regionu
.llF508, pri cemu deletira sekvenca koja ce kodirati fenilalanin. CFTR (cystic fibrosis transmembrane conductance
regulator) protein ima ulogu da vrsi skladan transport jona hlora kroz membrariu. Kada je· ovaj protein m uti ran on ne
postoji kao membranski protein, vec ostaje u cistemi EPR-a. Joni hlora se nagomilavaju u ekstracelularnom
matriksu i u epitelnim · sredinama uslovljavaju gust mukus (sekret). Klinicka slika: hronicna boles! pluca,
bronhitis, gust sekret u alveolama, hronicne infekCije respiratornog trakta, slabost srca (cor pulmonale), polipi,
diabetes mellitus, hronicni pankreatitis, bronhiektazije i sterilitet kod muskaraca. Ucestalost bolesti je 1 :2500-3000 u
populaciji, dok je najcesca u indoevropskoj rasi.
Duchenne-ova misicna distrofija (DMD) je X-vezana recesivna monogenska bolest. Boles! nastaje kada dode do
delecija odredenih kodona na genu za distrofin, koji je ujedno i najveci humani gen (2,5Mbp) i lociran je na X
hromozomu (Xp21) (slika 94). Uloga distrofina je da povezuje aktinske i lamininske filamente u misicnoj celiji i
njegovim gubitkom dolazi do distrofije (smanjene . ishrane misica). Klinicka slika: postepeno razvijanje misicne
slabosti, usporeni i otezani pokreti ustajanja;lumbalnapogrbljenost Boles! se javlja izmedu trece i pete godine zivota
. i zavrsava se letalnim ishodom oko 18. godine usled kardio-respiratornog zastoja. Varijanta misicne distrofije je i
Bekerova misicna distrofija (BMD), kqjq je, vrlo slicna Disenovoj miodistrofiji, ali napreduje u znatno blazem obliku i
zivotnivekobolelihjeduzi. ':··•!•;•• ·'> ': : . , .. ; .· ': · . .
Hemofilija se prenosi X-vezano recesivno i fenotipski se odlikuje nemogucnoscu zgrusavanja krvi. Javlja se sa
ucestaloscu u populaciji od 1 :5000. Postoje dva tipa hemofilije (A i Hemofilija ·A je najcesci oblik ovog oboljenja i ·
nastaje usled nedostatka faktora koagulaeije VIII, koji zajedno 'za faktorom: koagulacije IX omogucava normalno
zgrusavanje krvi. Kod hemofilije tipa B dolazi do mutacija na gehu za· faktor koagulacije IX, a njena ucestalost u
populaciji je znatno manja 1:40000. Klinicka slika: konstantno·-lako krvarenje u zglobovima i misicima, artropatija,
multipli otoci usled krvarenja, a ukoliko dode do vece povrede osoba umire us led masivnog krvarenja.
31. Multifaktorsko nasledivanje ... ·.
Multifaktorsko ' nasledivanje·. je .•• tip nasledivarija;-- u . kome vise gena UZ uticaj spoljasnje sredine . vrsi
determinaCiju neke· osobine. :Ovo ·znacr da je· .delimicna kontrola ekspresijer.gena koji determinisu·:neku·. osobinu;
uslovljena od strane Cinilaca·spoljasnje :sredine. ·nasleduju· kvantitativne osobine kao sto su visina,·
tei.ina, obim ekstremiteta; koeficijent inteJigencije itd. (slike 95 I 96). Medutim pored uobicajenih oblika, postoje i
bolesti koje se multifaktorski nasleduju (slika Ove bolesti lmaju najvecu.ucestalost od svih bolesti i cine preko
60% svih bolesti. Takve bolesti su arterijska hipertenzija, rak, tireotoksikoza, hiperholesterolemija,
secerna bolest, rascep usne, . alkoholizam, . shlzofrenija, autizam, Alchajmerova boles!, depresije itd. Kod
multifaktorskih bolesti uoeena je osobina agregacije. To znaci da se geni koji odreduju oboljenja nagomilavaju
(agregiraju) u porodici, pa ce rizik ·ia r?danje. sa predispozicijom za multifaktorski poremecaj biti veci
ukoliko je veci broj clan ova porodice nosilac nekog· od pomenutih oboljenja: Multifaktorsko nasledivanje je tesko
pratiti, zbog nepravilnosti u prenosenju (odstupaju od mendelskihzakona) i zbog brojnih uticaja spoljasnje
sredine koji nisu jos dovoljno prouceni. · · · · · · · . . . . .
32. Prevencija naslednih bolesti
Prevencija naslednih bolesti podrazumeva postavljanje pravilne dija'gnoze, procenu .prognoze i nacina
lecenja bolesti i utvrdivanja rizika ponovnog javljanja bolesti u · porodici. Ukoliko se zeli proceniti rizik za
dobijanje bolesnog potomstva usled · autozomne ili X-vezane dominantne ili recesivne bolesti, onda se to lako
izracunava na· osnovu zakona mendelske genetike. Medutim, kada se radi o proceni rizika za nasledivanje
multifaktorskih poremecaja, ondase zbog primene mendelskih zakona koristi empirijski rizik, koji se
ustanovljava na osnovu posmatranja u.cestalosti Qolesti kod. ostalih :srodnika. Ukoliko dode do inbreading-a
(ukrstanja u srodstvu), onda se kombinacijom odredenih istih · gena (zbog zajednickog porekla), vrsi ·
nagoinilavanje stetnih recesivnih h.omozigota. Veliki kqrak na planu ran.og. naslednih bolesti omogucila
24
. ..
....
1. Rizik od ponavljanja predstavlja prosecni rizik ili empirijski
rizik koji ce biti razlicit u razliCitim porodicama
2. Rizik se povecava ukoliko postoji vise obolelih clanova porodice
3. Rizik se povecava ukoliko je tdi oblik malformacije ili bolesti
4. Rizik se povecava ukoliko je ucestalost bolesti
veci u populaciji ..
5. Rizik se povecava ukoliko je koji
je redje aficiran posmatrano u opstoj populaciji
Slika 97 - Osnovni pojmovi o multifaktorskim bolestima
.lnaktivacija X
- & .:·.·

- Russell & Ohno.(1959.)
.. ·. to je X hroinozom
. . . . ·- ... . . ..
·- Mary Layon ,
.. .:...,.
. • (!..._
...
.
• • •
-..:; .
Slika 98 - X hromozoma


·::L":·







Humana genetika- Repetitorijum
je prenatalna dijagnostika. Metodom amniocenteze (uzimanje plodove vode) koja se vrsi u 16-oj nedelji
trudnoce, moguce je utvrditi da li plod nosi neku hromozomsku aberaciju ili gensku mutaciju, kao i pol
ploda. Utvrdivanje pola ima veliki znacaj kod X-vezanih recesivnih oboljenja, pri cemu je rizik 100% za dobijanje
bolesnog muskog potomstva, pa se tako moze utvrditi da li plod boluje od neke od ovih bolesti i ako je potrebno
savetovati blagovremen abortus. Metodom uzorkovanja horionskih resica se mogu utvrditi hromozomopatije,
vec u prvom trimestru trudnoce, pa zato ima odredenu prednost nad amniocentezom. Ove metode mogu
posluziti u otkrivanju 70-ak genetski uslovljenih poremecaja (poremecaji nervne cevi, anencefalija, spina bifida,
fenilketonurija, hemofilija i dr.). Da bi se mogla dokazati odredena genska mutacija (tackasta mutacija, insercija ili
delecija) .koristi se .tehnika Southern blot, . DNK. kloniranje i formiranje oligonukleotidnih proba. lndikacije za
primenu prenatalne··dijagnostike su sledece: majka starija od 35 godina (veta sans a za radanje dece za trizomijama
.. ·: .. ·. :. autozoma); poremeeaji.vezani za· X-hromozom u porodici, porodicne hemoglobinopatije, enzimopatije, hemofilija A,
. poremecaji razvoja .nervne 'cevi,. fragilniX-hromozom, jedan od roditelja nosilac balansirane strukturne aberacije i
ukoliko je prethodno deterodeno·sa odredenom·hromozomskom anomalijom. ·
33 .. Aberacije·polnihhromozoma.·: ·· ··· ··
I kod muskaraca i kod zena uocene su strukturne i numericke aberacije gonozoma·(X iY hromozoma), koje ··
mogu znatno ili neznatno da uticu na fenotip nosioca. Najvaznije i najcesce aberacije polnih hromozoma su:
Tarrierov'sindrom, Klinefelterov sindroni; politbmije X u zenskom polu i polizomija·Y,hr-omozemc:. Tarnerm•
sindrom ima kariotip 45, XO javlja se kod osob·a zenskog pola (u nekim slucajevima i kod muskaraca) (1 :2500) i
predstavlja jedinu vijabilnu monozomiju kod . coveka. · Sindrom nastaje uslecl nerazdvajanja hromozoma u
spermatogenezi. (75%), a.isto tako moze nastati •proksimalnom delecijom Xq11, delecijom Xq21 , a i terminalnom
delecijom Xp. Klinicka slika je · sledeca: nizak· rast (nanizam--+1 00-125cm), amenoreja (odsustvo menstruacije),
sterilitet, naboran vrat, nerazvijene sekundarne polne karakteristike, nizak rast kose na vratu, stitaste grudi
sa siroko razmaknutim · bradavicama, pigmentni . nevusi ·.· (mladezi), .hipoplazija (nerazvijenost) noktiju,
anomalije srca itd. Kod zena sa Tarnerovim sindromom ne postoji mentalna retardacija, a duzina zivota je
normalna: Jarnerov sindrom moze imati ·i svoje·mozaicne forme, koje odreduju kolikim ce intenzitetom biti izrazen
fenotip obolele zene: (maze postojati ·menstruacija i· normalna razvijenost mlecnih zlezda) . '
.,".< ... . '- muskarac.':ima::kariot!p.:.47;': A8, ':XXXY >ili 49, ;xxx:x.y, onda govorimo o
,<;:u . .J\Iinefelterovom:.sindromu.{poiizomija.Xbromozoma.u,muskompolu).;Ucestalost ovog sindroma u muskoj populaciji :·
:· :,;:y jeJ :·1 000, · a•najcesce .nastaje ·zbog·.poremecaja.:-u'J:f •ll :niejotickoj'deobi majkei r mejotickoj . deobi oca: Neki autori. ··
;. navode·da.Jnozenastati:.kao:pbsledica:nepr.avilnog:formiranjasinaptonema!nog kompleksa i prekida mejoze u profazi · ·
: ;f.:::t:,,· L:Klinefelterov,sindrommoze,biti :uzrokovan;i ,mozaichim oblicima koji ,odreduju intenzitet fenotipa obolelih. Fenotip ·
· ' · obolelih:·se·· os!ikava·,na sledeci ··nacin: mentalna·'retar'dacija: {ne mora da · bude izrazena), · sterilitet, oskudna
kosmatosUica, zenski tip pubicne kosmatosti. mali testisi, nerazvijene sekundarne polne karakteristike, dugi
ekstremiteti, krupni zubi i evnuhiodna grada u celini. Kod zena je zabelezena polizoiriija·x·hromozoma, pfl ·
cemu postoji vise varijanti kariotipova kod takvih zena (47, XXX 48, XXXX 49, XXXXX). Fenotip polizomija
ispoljava se mentalnom retardacijom, disfunkcijom ovarijuma, a ponekad somatskim svojstvima karakteristicnim za
Daunov sindrom. Bitno je napomehuti da'.47,XXX.iako .Statisticki iniaju 50% sanse da rode bolesno potomstvo,
uglavnom dobijaju ·zdravu decu. Poiizomije nastaju usled gresaka u mejozi I i 11 jednog od roditelja. Polizomije Y
hromozoma su zabelezene kod zatvorenika u veceni procentu, nego u obicnoj populaciji. Pretpostavlja se da visak
Y hromozoma izaziva·asocijalno i agresivno ponasanje, a javljaju se sa ucestaloscu 1:1000 muskaraca. Muskarci sa
polizomijom Y hromozoma {47
1
XYY) dcibijaju uglaynotn zdravo potomstvo iako je statisticki rizik 50%.
. ; - . . ; ' .. · . . . ·.. . . . .
34. Mehanizam inaktivaCije X hromozoma
'Jnaktivacija X hromozoma podrazumeva, . delimicno blokiranje ekspresije gena na X hromozomu zenske
osobe koji je nasledila od oca, fakultativnom · heterohromatinizacijom u Barovo tela (slika . 98) .. U toku
oogeneze oba X hromozoma su aktivna, dok su u toku spermatogeneze X i Y hromozomi inaktivni. lnaktivacija X
hromozoma zapocinje na stadijumu blastociste (1000-2000 blastomera), pri cemu jedan od X hromozoma prestaje
da odgovara na transkripcione faktore.i inaktivise se heterohromatinizacijom. lnaktivacija X hromozoma predstavlja
genomski imprinting (otisak), tako da se ovim omogucuje specificna inaktivacija X hromozoma koji je poreklom od
spermatozoida. Nakon sto se X hromozom prvi put inaktivise sve celije ce pratiti matricu inaktivacije istog X
25
. .;. .
·7:' . .
......
.
...: .

,..; ·
.,
- pojedinl reglonl' na 'xp I Xq
IZBEGAVA..IU .INAKTIVACI..IU ·
dokaz· xo . . : . eF·
• OBAVEZNO AKTIVAH: · =S, .. . " .;
lnak. centar (XI C) ·
PAR
·•
• Si'r. ANJENA
aktivnlh gena
•sF gen kod XXX iene:
1:1,8 (a ne 1:3) .
•• •

i
.. .
Slika 99 - Parcijalna inaktivacija X hromozoma
Diferencijacija' pola
... .

.. , •
. ;i;Qx ...... YC1V=:""·
.. . . : . -
' . . .
Tasti!i
Slika 100 - Diferencijacija gonad a

Slika 101 -Diferencijacija polnihodvoda
y HROMOZOM
Slika 102- Y hromozom.;
• · -· ........ • '*;_ •. ....·· ·
. -..
. :

: ..
.. ...
....
. ·}
,,
Humana genetika- Repetitorijum
hromozoma. Centar inaktivacije nalazi se na proksimalnom delu q kraka X hromozoma (Xq13) i u njemu se
nalazi genski lokus koji ce zapoceti inaktivaciju. Transkribovanjerri ovog gena dobija se jako velika RNK, koja
ucestvuje u formifanju Barovog tela. Prema n6vijim podacima im1ktivacija X hromozoma vrsi ·se pomocu metilacije
DNK. Barovo tela se kasno replicira u S fazi, ali karakteristicno je da X hromozom nije 100% inaktivan, vec postoje
odredeni geni koji su aktivni (slika 99). To su geni na lokusima Xp22.13 i Xp22.31, koji se prvi repliciraju i
antigene krvne grupe Xg i enzim steroidnu sulfatazu.
35. Geneticka kontrola diferencijacije pola
Kao i vecina osobina coveka i diferencijacija pola je uglavnom geneticki determinisana. Medutim,
razlikujemo pet'vrsta determinacije pola: geneticki, gonadalni,fenotipski, psiholoski i socijalni. Svaki ad ovih
tipova razvi)a se samostalno ili u sklopu sa drugim poremeeajima diferencijacije pola; U toku embrionalnog razvica i
muski i zenski pal u jednom. momentu imaju istu konfiguraciju gonada (slike 100 i 101). Ovaj stadijum se naziva
stadijum indiferentnih gonada. Medutim u odredenom momentu indiferentne ·gonade pocinju da se transformisu i
diferenciraju u pravcu koji imgenotipski pal odreduje. Na osnovu ispitivanja osoba koje imaju·reverziju pola doslo se
do otkrica, da je gen koji determinise pol coveka SRY (sex determing region on Y) gen, koji se nalazi u distalnom
delu kratkog kraka Y hromozoma (slika 102) .. SRY gen produkuje TDF (testis differentiation factor) protein, koji deluje
tako sto indukuje transformaciju indiferentne gonade u testis. SRY postoji kod normalnih muskaraca i kod XY zena, a
ne postoji kod normalnih zena. TDF protein deluje tako sto se vezuje za odredeni deo DNK lanca preko svog
segnre·nta ·t<oji ·je··-oznaten ,mer:ja despiralisuci . g3 -!
savijajuci ga za BOo . U sustini TDF se ponasa kao transkripcioni faktor. Time se postize da odredene sekvence
ONK dolaze u kontakt sa udaljenim transkripcionim kompleksom. i time se transkribuju dajuci specificne
produkte koji ce izvrsiti diferencijacijo testisa. Takvi su npr. ·.·gen za enzim .P450 aromatazu koji omogucava
sintezu steroidnih hormona, a i gen za anti-Miler hormon (AMH) .. Da bi se. normal no formirali testisi pored SRY
gena, neophodan je i SOX9 gen koji se nalazi na polozaju .17q i kodira transkripcioni faktor. slican TOF-u (takode
sadrii HMG). Oa je prethodna tvrdnja tacna dokazano je kod osoba koje imaju nedostatak jednog alela ovog gena.
Takve osobe imaju sindrom kampomeHcne displazije, koji se.oslikava u multiplim anomalijama kostano-zglobnog
sistema, zenski fenotip (75%) ili hermafroditizam i·kratak zivotni vek. Na polozaju 9q nalazi se jos jedan gen koji je
bitan za diferencijaciju pola. To je SFt (steroidogenicfactor 1) gen koji kod_ira·transkripcioni faktor SF1 i deluje u
Lajdigovim celijama . aktivirajuci ·gene · kojr· kodiraju · enzime sintezu · ·. Rezultati eksperimenata sa
· misevima pokazali su da.ukolikoje gen za SF1 deletir.an, neee doci do razvoja nadbubrezne zlezde, a gonade ce se
ubrzo diferencijacije degenerisati. Postoji tacno determihisan· redosled ekspresije prethodno navedenih gena.
· Prvo ce se eksprimirati· gen;. ciji ce proizvod.TDF aktivirati SF1 geri, a potom ce proizvod SF1 gena
indukovati sintezu AMH i testosterona: Kod zenskog 'pola do indifer(;!ntnih gonada u ovarijume
dolazi us led nedostatka SRY gena i njegovog proizvoda TDF. Kod je za diferencijaciju ovarijuma potreban
samQjedan X alije za riormalno fi.mkcionisanje tog·X hromozoma, neophodan drugi X hromozom, jer
ukoliko postoji samo jedan X (45, XO), ovarijumi c·e sei"formlrat1, ali ce veliki procenat obolelih ·z.ema biti ·sterilan, zbog
ubrzane atrezije (propadanja) folikula, Kod_iena su na X hrornozomu specificni geni DAX1 (DSS), koji
· uslovljavaju. diferencijaciju ovarijuma. prek9 :svojih· j:}rodukata .. _ Na .p61qzaju')(p21 nalaii se DAX1 ili DSS (dosage
· sensitive sex gen. I kod muskaraca' postoji DAX1 gen, ali ]e on suprimiran, da bi se normalno odvijao
proces diferencijacije testisa. Medutim ukoliko se na X hromozomu pojave dve kopije DAX1 gena, sprecava se
diferencijacija testisa i determinise diferencijacija ovarijuma. Zato je ovajgen DAX1, odnosno DSS dobio ime dosage
sensitive sex reversal, .zato sto njegova, ekspresija, i zavise od .. kopija (doze) u kojoj se nalazi. Kako kod
muskaraca (SF1 i SOX9), tako i kod Z.ena postojef autozomalni geni koji'ucestiluju u normalnoj diferencijaciji gonada.
Kod zena takav gen je WT1, i nalazi se na polozaju· 11 p. Na osnovu eksperimenata na misevima kod zenki je
utvrdeno prisustvo proizvoda WT1 gena u genitalnom naboni. ·
36. Reverzija pola
Reverzija pola je potpuni nesklad razliku od hermafroditizma koji je delimicni nesklad) izmedu genetickog
i fenotipskog pola. Postoje tri varijante reverznog pola, a one su 46, XX muskarci ; 45, XO muskarci i 46, XY iene.
Kod muskaraca koji imaju genotip 46; XX (ucestalosLje 1:20.000 muskih novorodjencadi), doslo je do
reverzije pola, us led postojanja SRY (sex de terming region .of. Y) lokusa na kratkom kraku jednog X
26
--·.

\
.. ., . ;
-:.
XX muskarci 1:2D.DDII XYZENE .

. .
delecija ill tatkasta mutacija
2n OSS dupllkac:ija
S:P. Y X hr.:.mozo.,;
- nepravilan crossi ng over u mejozl oca
s¥9 delecija
.. GONADE: testlal
1
bez spermatogeneze
.. FENOTiP: muikl, - Kllnefelteru, niiJ n•st,·
. - GONADE! ovarljumi =)DISGENEZA
- POLNI ODVODI: zenskl
• FENOTIP: ienskf, infantll1zam (amenoreja, sterilne)
xo muskarcl


autozom (akroc:entrlk,18, 5)

'-.-.!.._nema telesne odllke Tumerfl .._.........
'-. VAZNO: 0zbog !11
- GONADE: testis! (plodnost ?)
- FENOTIP: z.avlsl od autozoma
Slika 103 - 46, XX i 45, XO muskarci Slika 104- 46, XY i:ene
MUSKI PSEUDO HERMAFRODITIZAM
TESTIKULARNA FEMINIZACIJA
-46
0
XY
• GONADE: testisi
• POLNI ODVODI: odsutni
- FENOTIP: t.en:ski j
__ =;------___ i
GENA ZA c::::__l!
RECEPTOR ZA TESTOSTERON (Xq) 11
- ameno_reja, sterilnost
.- nema Barovo telo
!
105 -Sindrom feminizacije .
ZENSKI PSEUDO HERMAFRODITIZAM
KONGENITALNA ADRENALNA . ;
. . . , ' . : .. I '
HIPERPL)tZIJA sinilromJ:
... ": . . . . . .
• HROMOZOMSKA KONSTITUCIJA: ' XX. . ..
• GONADE: ov:uijuml
• POLNJ ODVODI:
· • FENOTJP: maskuli.1izcivan
I POLNI_H HORMONA
lz uve6arie KORE NADBUBREZNE ZLEZDE
i
- I '
l
i
l
.I
I
• muatclja (210H, P450
. ..... . ' . . . .. . . : .
Slika 106 - Adrenogenitalni sindrom
.. . : ..... i . : ': .. ,;-,.
· ..





_';i\l·
Human a genetika - Repetitorijum
hromozomao Ova pojava zabelezena je u 80% slucajeva 46, XX muskaraca (slika 1 03)0 Ked ovih muskaraca,
postoje testisi u kojima se ne vrsi spermatogeneza. dok su ostale odlike slicne odlikama zastupljenim kod
Klinefelterovog sindromao Za razliku od njih 45, XO muskarci su u samo desetak slucajeva (slika 103)0
Javlja se usled reciprocrie translokacije izmedju Y hromozoma i nekog autozoma, pri cemu se i SRY lokus
translocirao Heterologa Robertsonova translokacija je najcesci razlog nastanka XO muskaraca, dok je takode
moguc slucaj translokacije dela Y hromozoma
0
na neki neakrocentricni hromozomo Fenotip i fertilitet 45, XO
muskaraca zavisi od lokalizacije translokacije, pa se recimo us led na 5p, maze javiti cri ciu _chat
sindromo Takode je utvrdeno da ovaj tip reverzije moze nastati usled mozaicizma, u kome su prisutne i XY celije,
sto je u nekoliko slucajeva i dokazanoo Kod 46, XY iena postoji izrazen zenski fenotip (zenski spoljasnji polni organi i
odriani Milerovi kanali), -ali muski genotip (slika ·104)0 S obziom da se zenski fenotip javlja usled poremecaja
diferencijacije testisa kod muskaraca, porerileeaj se oznacava kao cista gonadalna disgenezao Ova pojava je
uzrokovana delecijom dela Yp, koja obuhvata SRY lokus, pane dolazi do pravilnog razvijanja muskog fenotipao
37. Pseudohermafroditizam i pravi hermafroditizam ·
Pseudohermafroditizam je pojava da je geneticki pal (gonozomna konstitucija) i fenotipski pol (primarne i
sekundarne polne karakteristike) u neskladuo Postoje muski i zenski pseudohermafroditizamo Muskarac koji je
pseudohermafrodit poseduje Y hromozom u genotipu, ali su mu spoljasnji polni ergani nediferencirani (slika 105)0
Kod muskaraca pseudohermafrodita, postoji mozaicizam 45,X0/46,XY, pri cemu je fenotip jako raznoliko Javlja se
O•(disioeiran otvor uretre), spofjasnje genitalije su
ambivalentne (nedefinisane), a mozese javitii Tarnerov sindromo Uoce11a je:i perzistencija (edriavanje) Milerovih
kanala, zbog nedovoljnog lucenja glikoproteinskog hormona (anti Milerov faktor) keji vrsi regresiju Milerovih kanala,
pa ovi muskarci imaji muske i zenske polne odvodeo Jedan od. specificnih· oblika pseudoherafroditizma kod
muskaraca je sindrom testikularne feminizacije, ciji fenotipski pol nije uskladen sa genetickim polom. Testisi nisu
spusteni u skrotum i ostaju u abdorpenu, tako· da unutrasnji polni odvodi:postoje, dok· ne postoje spoljasnji , pa je
fenotip zenski, a pal muski. Ovaj sindrom nastaje zbog nemogucn6sti vezivanja testosterona za receptore, pa time i
blokade njegeve. uloge u formiranju normalnih primarnih. polnih . karakteristika. Ovakve iene se prepoznaju po
izuzetnoj zenstvenosti ·i nedostatku aksilarne dlakavostio U slucaju zenskog·pseudohermafreditizma, takode dolazi do
razvitka ambivalentnih {neodredjenih) genitalija (slika·106)o od -primera zenskog pseudohermafroditizma je
adrenogenitalni sindromo On nastaje usled debalansa hormona kortizola, ;koji indukuje pojacano lucenje ACTH
(adenokortiketropnog hormona hipofize), koji dovodi do pojacane sinteze prekursora androgena, koji se debijaju u
krajnjoj liniji. Androgeni deluju tako sto dovode do poremecaja razvica spoljasnjih · polnih organa i formiranja
ambivalentnih genitalijao Kada govorimo._ o pravpm: hermafroditizmu, onda se to odnosi na pojavu da kod
individue; bez obzira na pol, postoji i ovarifalrio Hestikularno .tkivo, pri cemu ce se na jednoj strani tela
nalaziti testikularno, a na drugoj ovarijalno tkivoo Medutim, znatno cesca pojava je da su ova dva tkiva pomesana
. i Pravi hermafroditi se u .. <?.Qgajaju .re.tko. .prisul'!'?
spermatozoide i oocite uovotestisuo Takode postoji i uterus, a i menstrualni ciklus kod vecine pravih hermafrodita.
Pravi hermafroditizam · nastaje us led genskih inutacija na ·sxs genu (X koja uslovljava nastanak tkiva
specificnog -za suprotan pol. Drugi nacin nastanka· pravog -hermafroditfzma je' polni ·himerizam, koji nastaje 1,1sled
spajanja dva zigota ili embrona, koji su predodredeni da budu dizigotrii blizanci, a razlicitog su polao Nije ni retka
pojava da pravi hermafroditi imaju __ _ , : , :
. 38. Protoonkogeni i mehanjzm.i , •
•· . . ! . • .
Smatra se da svi tumori peticu od jedne maligno transformirane celije (hipoteza inonoklonskog porekla tumora)o
Maligni tum·ori najcesce se pojavljuju kasno u zivotu: jedinke, ·sto sugerise da su uzrokovani serijom .
nezavisnih uzroka, koji se desavaju simultano ili.jedan za drugimo Sto je starija jedinka, to je procentualno cesci
turner. . · · · :
Ova glavna tipa promena koje vode nastanku tuinora na genskom.nivou su: akumulacija genskih mutacija i
razvoj genetske nestabilnosti. . .: ... · . .. . . , . 0
Razvoj tumera, pejednostavljeno ·receno, stoji pod · genskom · kontrolom: protoohkogena '(gena koji aklivacijom
izazivaju turner ili preteinske produkte koji izazivaju . kaskadu poremeeaja koji konacne vode ka tumoru)o
Protoonkogeni mogu da budu aktivirani ili izazvani. na hiperprodukcijuo Do sad a je nadeno vise od 100
27
·: ...
fms
e-rb·B :
kit
II: recepfcri :o
faktorc rcste sa'

oktivnoSC.u
IV: GTP-vezujuci
proteini
m .-B: serin - treonin
niAZ: citopla:zmatske protein kina:ze
tircxin-kinazc ce raf
mos
-v mil
ab/
...
I: faktori rosta
.•• . sis(PDGF)
ID-Al: tiro2in-klna2e
asoc.iranc sa
membra nom
myc
fos
jun
myb
- . . .
Slika 107.- proizvoda protoonkogena u celiji
NEVIRALNA AKTIV ACIJ A PROTOONKOGENA .
n;t <J Ji'hl -="''
;"" ·_-:. >:·
normclna
Ce.lij a
/ oo§- o .\11 " '
"' ·
11
himericni gen
A.
amplifikacija
., ' .
' .....
point· mutacija
tu m or
Slika 108 - Neviralna aktivaeija protoonkogena
..j 0 • •
qJ-1
. _·;_:-... .
.. -
,;:'=:/."!: R.A,.JK
Rcvcr71'1111 ; •
1romkriptuo
!l&nom troviru.sa (be: onkog&n;;)
integracija
viralnog genoma
u DNK damaiina
Slika 09 - Viralna aktivacija protoonkogena
Ph'
Slika 110 - Nastanak Filadelfija 'hromozoma . ·
.. -.: •,
_ _. ... . ·

....
Humana genetika - Repetitorijum
protoonkogena. Nasuprot njima stoje tumor-supresorski geni ciji produkti sprecavaju povecanu proliferaciju celija.
lnaktivacija ovih gena omogucava aktivaciju protoonkogena.. I najzad aktivacija gena mutatora izaziva
tumorogenezu.
lnteresantno je da su protoonkogeni uglavnom_sing/e (sekvence) geni, sto znaci da mutacija samo jednog alela moze
da vodi ka aktivaciji maligniteta. Protoonkogeni in:taju razlicite uloge. _Mogu da budu transmembranski proteini ili
transkripcioni faktori, a ukoliko su aktivirani uzrokuju: promenu proteinskog produkta usled mutacije gena,
konstitutivne aktivacije ili hiperaktivacije gena ili nemogucnost da se ekspresija gena ugasi u pravo vreme. Prema
vrsti proteinskog proizvoda koji kodiraju podeljenisu na vise grupa (slika 107). ·
Protoonkogeni koji deluju kao· faktori stvaraju sign ale koji ce. delovati, ·· tako · sto ce vrsiti stimulaciju celije na
proliferaciju. Najpoznatiji faktori rasta su M-CSF (faktor stimulacije kolonija 'makrofaga), EGF (epidermalni faktor
rasta), PDGF (trombocitni faktor rasta), IGF 11 (insulinu slican faktor rasta) , itd. Navedeni faktori izazivaju proliferaciju
svih celija ukljucujuci i maligno trimsformisane eelije. Blokadom nekih od faktora rasta moie da se bitno umanji
razvoj tumorske bolesti (npr. kolorektalnog karcinoma).
Jedan od najpoznatijih , protoonkogena koji kodira faktor rasta je sis protoonkogen koji je odgovoran za kodiranje
beta-lanca PDGF. Da bi signalni faktor rasta uspostavio kaskadu koja obezbeduje stimulaciju celijske proliferacije
neophodni su receptori za faktore rasta, koji se nalaze na celijskoj membrani. Skoro svi receptori iz ove grupe
imaju tirozin-kinaznu aktivnost, sto znaCi da enzim tirozin•kinaza vr5i fosforilaciju tirozinskih grupa proteina i na taj
nacin ih aktivira. Receptori se sastoje od tri regiona: ekstracelulamog, · za koji se vezuje faktor rasta,
transmembranskog i intracelularhog regiona koji vrsi uvodenje biohemijskog signala u celiju (slika 107).
Najpoznatiji protoonkogeni koli kodiraju ,receptore za faktore rasta su fms (receptor za koji se vezuje M-CSG), erb-B
(receptor za koji se vezuje EFG), met, 'neu, ret, kit rostali. Da bi se sad a sign·al koji je uveden u celiju preneo dalje do
svog ciljnog mesta neophodni su pr9t()onkogena koji kodiraju nereceptome protein-kinaze. Ovi specificni
enzimi sada vr5e fosforilaciju odredene aminokiseline ciljnog protcina' preko hidrolize-ATP-a: Na taj naCin:dolazi do . -
mnogih hemijskih modifikacija ciljnog proteina; -pri cemu ;dejstvo modulise _i ·nastavlja· kaskadni proces ·u.

pravc·u ciljnog mesta. - ·. . · :· : · - ·. · - :_. __ .:" · ... • ·_ • · ·; · . · · ' -- . - -- · .
Najpoznatiji protoonkogeni koji kodiraju protein kina!e·· su src, fes, : yes, .'ab/.itd. Oa bi se signal. dalje · .·._ -·_•_-_: ..:,_._:'_ "fl_: ·
prenosio do jedra neophodni su produkti protoonkogena koji -kodiraju . protei ne sa -GTP-aznorn aktivnoscu; T akvi -
proteini su kodirani od strane Ras-familije ·protoonkogena ·(N"Ras; K-Ras i H-Has) i imaju ulogu u prenosenju -- .
celijskog sign ala. Da bi -neki bio .· hemijski:' aktivan;: neophodno - je · da · bude vezan · za GTP · · ·
· (guanozintrifosfat-energetski molekul). Specifican primer se nayodi u slucaju p21 Ras proteina koji je aktivan samo
kada je vezan za GTP, cijom-hidrolizom se obezbeduje.njegova ..aktivna forma. Poslednji u lancu prenosenja signala ·, . .
su jedami receptori;, koji .prihvataju.signal J:neposredno·na·.nivou··:molekula DNK modulisu ekspresiju· grupe gena'" - - · ·-
odgovomih za.procese:reprodukcije i .. (slika·1.07)?:' . · .. .. ·
Najpoznatiji · protoonkogeni· koji ·jedame· recepfore ·su myc,·. mybr 'jun i fos (slika 107). Ukoliko se ·
protoonkogen aktivira, dolazi .- do·: kvalitativnog·J _kvantitativnog mimjanja· produkta. U tom slucaju
protoonkogen prelazi u onkogen (tumorski gen)i razvijase tuinorsko tkivo; Protoonkogen se maze aktivirati
neviralnim i viralnim{virusnim) putem (slike ·108 i 1 09) . Neviralna aktivacija obuhvata point-mutaciju, amplifikaciju i _ ·
pozicici,ni · efekat (struktume hromozomske- aberacije) - protobnkogena .. . Ukoliko se desi mutacija na sekvenci
. protoonkogena, je pracelia transkripcijom). Pojacana
ekspresija ·se -desava, .zbog :-protoonkogena usled mutacije ili delecije.
Protoonkogeni koji su najpodloiniji mutacijama su.Ras protoonkogeni. : Cesto se navodi primer, da je u celijama
· _ mokraCne dokazana na_ menja glici11 .u ;::.,. _ · ·"· · ·
transformise protoonkogen u onkogen. Kako kod.point-niutacija; :take f kod·-amplifikacije dolazi do ·kvantitativnog - . . -- -. ..
efekta. Segmenti genoma koji nose protoonkogerie se amplifikuju· (u.rtlnozavaju) i dovode dopovecanja kolicine . · . ·
produkata ovih gena. · · - · ·· .;:-; :_ ':: .. .-. · ·.- · · : · · .
Kod neuroblastoma uoeena je amplifikacija' mycN protoonkogena, · koja dokazuje prethodnu tvrdnju. Medutim uoeena " ; ' .
je pojava da pri odredenim struktumim hromotoniskim aberacijama (najcesce translokacije) moze da usledi razvoj ; . - :
tumorskog tkiva, usled pozicionog efekta protoonkogena. Ova.pojava se objasnjava mogucnoscu ,da se translocirani .
segment koji nosi protoonkogen insertuje u· neku ·transknpcijski hiperaktivnu zomi (kakve su npr. zone genskih .
lokusa za imunoglobuline i T -Celijske receptore) i' da time bude u preteranoj meri eksprimiran. U ovom slucaju
translocirani protoonkogen moze da prede u bliski odnos sa nekim drugim genom i da nagradi himericni gen.
Najbolji primer nastanka himericnog gena je vezan za nastahak hron1cne ·mijeloidne leukemije. Ukoliko dode do _ .. .
translokacije 9q34:22q11 nastaje Ph' ·(Philadelphia) 'l1romozom· (slika ··110) .. Na poloiaju 9q43, nalazi se
ab/-protoonkogen, koji se translocira na 22q11, fuzionise se sa bcr-gena i nastaje bcr!abl himericni
28
,,
... -
.3


..........
'!'!.··· ·,
•. ·,.
?J:,
··•.
.;..
.....
.... ,_.,_ - ....-.. ......... . . .
• ..
BURY..ITT? LIMFOM
MALIGNITETIMA ..
-
. /
__,
·t ()l; I.J)
Papovavirusi
Papilloma· virus
H"pcdnaviru:i
Hepatitis-8 virw .
Herpesvirusi
. virus .
RNK

HTLVI
HIV-J
kar-dnom utenJsa
hepatocdularni karcinom
Bul"kitt-ov limfom
nazofaringealni kal"dnom
adultna T -C:odijska leuk£mija
Kaposi sarkom ;
Slika 111 - Nastanak Barkitovog limfoma Slika 112- Onkovirusi
TU MOR SUPRESORSKI GENI
.... .
;-.. :

; .; .
A I' C. ., .. , ,..... . polyposis -: ...
\\'T-1 · ·. i Wilms' Jumor :
Slika 113 Najznacajniji tumof-supresor5ki geni kod eoveka
. ,.. ' ..... .. :; -. . ' .. .:._.; -:. .. ,.. ..... . .
·'' '!'t' .! ... ·.:. .... • ·.- :
,•, ·
-----·
..., .
' .
.
., ·.
.• _>,;;,:c :.
.. ' ._!' "
,_·
mutir:cu1i -I • •
:! .··
.·· '. '
-·: . . .
'', · .. ·
pr-eiivljavcnje C:elije
sa oitecenim genomom
. j ••
Slika 114 - p53 gena u onkogenezi
. · -·
.. •. ' . •. ·
... ... .
·:: "'· :...'•
Humana genetika - Repetitorijum
gen. Normalni produkt ab/-protoonkogena ima masu 145 kD·, dok ce himericni proizvod imati masu 210 kD i bice
karakteristican po povecanoj tirozin-kinaznoj aktivnosti. .
Takode jos jedan primer indukovane maligne transformacije usled strukturnih hromozomskih aberacija predstavlja
nastanak reciprocne translokacije 8:14. Ova translokacija zabelezena je kod preko 80% bolesnika sa Barkitovim
(Burkitt) limfomom (ostalih 20% ima 8:22 ili 2:8) (slika 111 ). Patogeneza nastaje usled ugradivanja
myc-protoonkogena u transkripcijski hiperaktivnu sredimi u kojoj se iialaze lokusi za H (teske) i L (lake) lance
imunoglobulina. Myc-protoonkogen sad a prelazi u onkogen zato sto ·je povecana njegova ekspresija u 8-limfocitima i
zato sto dolazi do kvantitativnog efekta (sinteze produkta gena) strukturne hromozomske aberacije.
Pored neviralnog postoji i . viralni put aktivacije · protoonkogena. Odredene vrste virus a sposobne su da aktiviraju
protoonkogen, na taj nacin sto ugraduju svoj .genom u genom domacina dovodeci do povecane ekspresije, tj.
kvantitativnog efekta. Jsto -tako mogu da .dovedu do mutacija protoonkogena i · njegove transformacije u onkogen
(kvalitativni efekat). Najpoznatiji onkovirusi su iz porodica Hepadnaviridae (Hepatitis-B), Papovaviridae (Papilloma ·
virusi), Retroviridae (HIV, hepatitis-C) itd (slika 112). .
lnace mnogi viralni onkogeni imaju svoje pandame u protoongokenima eukariota, pa ih aka poticu od virusa
oznacavamo sa prefiksom v- a aka poticu jz ·animalnog sveta sac-; npr. v-s rei c-src.
Znacajna je slicnost datih · protoonkogena · i njhova uloga u stvaranju tu mora mnogo veca, nego sto je to ovde
istaknuto.
39. Tumor-supresorski geni
..
Tumor-supresorski geni, su oni geni ciji produkti vrse supresiju celijske proliferacije i onemogucavaju da
dode do hiperproliferacije (preteranog umnozavanja) i razvitka tumora (slika Mutacije tumor-supresorskih
gena su recesivnog karaktera, sto znaci da se oba aiel a moraju. mutacijom inaktivirati da bi prestali da vrse svoju
normalnu funkciju. Najpoznatiji tumor-supresorski geni su: Rb1, p53, p16, WT-1, NF-1; .NF-2, APG1 BRCA 1, BRCA 2
itd. Prvi otkriveni i najbolje prouceni tumor-supresorski gen je Rb1. g.en. Njegov lokus je na dugom kraku hromozoma
13 (13q14). Produkt ovog gena je nuklearni fosfoprotein, koji ima ulogu u kontroli celijskog ciklusa, na kontrolnom
punktu G1/S. Ukoliko se ovaj gen inaktivise razvija se karcinom nerv"nog tkiva reline, retinoblastom, pracen multiplim
malignitetima: Ukoliko je retinoblastom nasledan, onda.se tumor:.javlja bilateralno (na oba aka} i mutacija koja ga . ·
uslovljava mora da bude germinativna (gametna): Kod nenasledne forme retinoblastom je unilateralan Oedno oko), i
mutacije koje {·do:, njega dovode su · postzigotne ::-Lobavezno somatske. Gen p53 se .nalazi na kratkom kraku
hromozoma 17 (17p) . i kodira fosfoprotein .deluje kao·· transkripcioni faktor. modulirajuci ekspresiju drugih gena .
· (slika 114). DeHujedako sto njegov ·produkt .aktivira· inhibiciju celijskog ciklusa (uz pomoc produkta gena WAF1) na
kontrolnom punktu .. G1/S: . U preko 50.% svih karcinoma utvrdene su ·ml!tacije gena p53, dok su osobe koje naslede
· · · germinativnu:mutacijirovog gena potpuno fenotipski s.tim;stojrnaju .znatno vecu verovatnocu da podlegnu
malignoj transformaciji. Ovaj defekt (germinativne mutacije p53) se naziya Li-Fraumeni sindrom. Tumor-supresorski
geni BRCA 1 i BRCA2 imaju znacajnu ulogu u razvoju porodicnog raka dojke, dok je gen WT-1 povezan sa razvojem
Vilmsovog tumora bubrega koji se obicno javlja kod osoba mlade zivotne dobi.
. 40 .. , EvoluCija maligne transformacije .
Maligne ili neoplasticne celije su . trans(ormisane celije organi4ma. pri tome ·.menjaju svoju morfologiju
(dediferentuju se); metabolizam, kvantitativno i kvalitativno · (:elijsku proliferaciju, te ·dobijaju CSposobnost da
naseljavaju i razvijaju se u drugim tkivima i, organima. Receptorski . sistern .na povrsini celije ili je takav da ga celije
imunog sistema ne prepoznaju ili se promene, pa ga celije imunog sistema ne prepoznaju kao strano tkivo ili antigen.
Na genetskom nivou . onkogeneza (stvaranje . tumora) se objasnjava · propadanjem (mutacijama, · nakupljanjem
mutacija) u genima ili delovima DNK (naslednog materijala) :koji regulisu ..autoreplikaciju i replikaciju naslednog
materijala, deregulaciju mehanizama koji regulisu i kontrolisu sintezu proteina i njihovih enzima, kao i ostecenja koja
se na DNK molekulama desavaju upravo na onim regionima koja su odgovorna za regulaciju celijskog ciklusa. Broj . ·
mutacija koji se procenjuje da je neophodan za izazivanje maligne transformacije je oko 8, u zavisnosti od celije i
drugih mutagenih faktora. Kancer je cesci u starijoj populaciji, zatq slo. se u toku duzeg vremena u jednoj celiji
akumulira (nagomila) veci, kritican broj mutacija. . .
Razni su uzroci koji dovode do maligne transformacije celija, ali se generalno smatra da je etiologija kompleksna i
obuhvata fizioloske, geneticke i faktore spoljasnje sredine. Kancer se i danas smatra sistemskom bolescu sto znaci
29

'

...
:r: .. ..
..
_ ·-ii., .
,,

!:
RAZVOJ KOLOREKT ALNOG
. ·;ih·.
KARCINOMA .
. .
Sq 12(1 ISq 17p
gubitak aktivacija gubitak gubitak non
APC
K-r
DCC:
·.r
alttracijt
I I I
Slika 115 - Evolucija maligne transformacija na modelu kolorektalnog karcinoma
·- patogen ..
celljski
odgovor
T celija

t
,h-1r-

smrt inficirane
cefije
Slika 116- Tipovi imunog odgovora kod coveka
. . . .. . . .'.
antigen-vezujuce mesto
liOOC
laki lanae·
ieski la-nae_;_·.-:····
..
'\..:
...
HOOC
._ ... _ ....
COOH
·. . . ' .
Slika 111 - Plan grade arititela
··;;r: · < ••
·.


... ....

_,
.·,
' J
Human a genetika- Repetitorijum
da ne same ima posledice po ceo organizam, nego da u njegovoj etiologiji mora da se poklopi .mnogo faktora da bi
·se malign a celija razvila. Premaligne celije nekada postoje i po deset godina se konacno ne oforme kao maligne.
Najbolji primer evolucije maligne transformacije je razvoj kolorektalnog karcinoma (slika 115). Da bi maligni proces
otpoceo najcesce se prvo desi mutacija (ili delecija) na hromozomu 5 i inaktivise APC tumor-supresorski gen, sto za
posledicu ima povecan rast epitela debelog creva (hiperproliferatiyni epitelijum). Ako nakon toga dode do
smanjenja intenziteta metilacije DNK, razvija se benigni turner (adenom klase 1) . Ukoliko nakon toga dode do
mutacije Ras gena (hromozom 12), adenom klase I, napreduje u adenom klase 11 (intermedijarni adenom). Ako
potom dode do delecije oba alela DCC tumor-supresorskog gena (hromozom 18), razvija se adenom klase Ill (kasni
adenom). Da bi doslo do maligne alteracije neophodno je da se dogode delecije oba alelap53 tumor-supresorskog
gena. Na ovaj nacin se formira kolorektalni karcinom, pa cak ukoliko dode i do daljih mutacija odredenih gena, dolazi
. do pojave metastaziranja (sirenja kancerogenog tkiva po celom organizmu), odnosno, kako se to danas zove
metastatske bolesti.
Metastatska bolest je posledica .dugotrajne cirkulacije malignih celija kroz organizam i pokusaja istih da negde
zapocnu umnoi.avanje. Tek po dobijanju odredenih signala i teske intoksikacije organizma usled tumora, opada
imuni sistem i stvaraju se uslovi za razvoj metastatske bolesti.
41. Genska osnova imunog odgovora
Jedna od najvaznijih spobosnosti organizma je da se brani od iiwazije stranih cestica, makromolekula i
patogenih mikroorganizama, da bi ocuvao normalnu :tunkciju koja mu obeibecu]e ph:iziv1javanje>To se
postii.e imunim odgovorom, koji predstavlja specificni mehanizam preko koga se organizam brani od antigena
(mikroorganizmi, makromolekuli itd.) .
Postoje dva tipa imunog odgovora, humoralni tj. odgovor antitelima i celijski. Za oba su odgovorni limfociti i to za
humoralni tzv. 8- limfociti, a za celijski T-limfociti · {slika: 116).: 8 limfociti se transformisu u plazma limfocite
(plazmocite), nakon susreta sa antigenom i zapocinju stvaranje antitela, proteinskih molekula koje spadaju u klasu .
imunoglobulina.
T limfocitidirektno reaguju sa antigenom koji su im prethodno prezentovani (prikazani) od strane prezentujucih celija.
Drugim recima strani agens (antigen). nakon ulaska :u ·tela bude preuzet od · prezentujuCih celija, ·obraden i zatim .
poslat na povrsinu celijske' membrane, ·ogde - se '; prezentuje drugim celijama imunog sistema (T. celijama).
Prezentujuce. ·celije su: dendriticne celije, makrofagi i 8 limfociti, s tim sto dendriticne celije imaju samo ovu
._. ulogu. T limfociti mogu;. takode; da aktiviraju -direktno.:makrofage, krupne imune 6elije , koje vrse fagocitozu antigen a.·
T limfociti se dele· u ·T -helper-celije · i T-citotoksicne ·celije-: ·vrse. aktivaciju· ostalih' celijskih populacija
(8-limfociti,·makrofagi, limfoeiti) koje su zaduzene za imuni odgovor preko signalnih molekula (citokini).
·· ·· - T -citotoksicne :: celije deluju . tako sto razaraju .: infidrane · celije i sprecavaju da se infekcija prosiri na veci deo
organizma.
T i 8 limfociti dobili su naziv prema organima iz kojih poticu, T limfociti iz timusa a 8 limfociti iz..k.oSlane.sr:Zi.i!iJetalne
jetre. Ovi organi se nazivaju i primarni limfoidni organi, dok se limfni i cvorovi, slezina, demdriticne celije koi.e,
gastrointestinalnog trakta itd. nazivaju sekundarni limfoidni organi. Nakon aktivacije (kontakta sa antigenom) oba
tipa celija .T i 8 Jimfociti transformisu se .efektome. celije, . BJimfocitLu. plazmcicite, a T limfociti u T-helper i!i
T-citotoksicne limfocite. · · •
Antigen moze da bude svaki strani molekul ili ageils,· veliki molekuli, skoro svi ·proteini, polisaharidi, kompleksovani
molekuli itd. Vezivanje · antigena omogu6uje antigen--vezujuce mesto {TCR) antigenskog receptora ili antitela i
naziva se antigena determinanta. Svaka·s celija ima oko 10s antigenih determinanti (receptora). Svaki receptor je
vezan transmembranskim proteinima 'za citoplazmatske strukture, · aktiviraju6i u momentu vezivanja antigena za
receptor, unutarcelijski signal. Aktivirana· plazma celija sada zapocinje stvaranje antitela, cak i do 2000 molekula u
sekundi. · · .
Nasuprot antigenu, stoji novostvoreno antitelo koje moze da ima ·.razlicite strukture. Najjednostavnije antitelo
podseca svojom strukturom na slovo Y I ima dva identicna· antig·en.:.,vezujuca mesta na vrhovima molekula
(slika 117). Antitelo se sastoji od dva laka i dva teska lanca koji zajedno formlraju antigen-vezuju6e mesto. Oba tipa
lanaca imaju varijabilne sekvence na krajevima i konstantne sekvence na C-termina!nim krajevima.
Laki lanae ima varijabini region duzirie oko 110AMK i 110 za konstantan region. Teski lanci imaju 100 AMK za
varijabilni deo i oko 300 AMK za konstantni. region. Raznolikost varijabi,lnih regiona oba tipa lanaca odredena je sa
3 mala hipervarijabilna regiona u svakcim lanct.i: . , · • . ·• ·: · _: · :. .. . . ·
30
• • • I . ·

__:..::,"":"

·:::.._tiJ:·
,, • .. •-.r='·

: -






.



:·:: ...
-.·
efektorske
8 celije
jednog
klona
....
razl1c1te..
neaktivirane · .
1
B c':elije .. •. •.
/ ...
antigen .
C{<;S-'


Yr)
antitela
PROLIFERACIJA I
DIVERZIFIKACIJA
PROGENITORSKIH
CELIJA
ANTIGEN SE
VEZUJEZA
SPECIFICNU B
CELIJU
PROLIFERACIJA I
DIFERENCIJACIJA
Slika 118 - Klonalna selekcija B-limfocita

naivna
: celija
I
prvi kontakt sa antigenom ·
I
l
®@
memorijske
celije.
' .. - .:
I
drugi kontakt sa· antigenom ·
r:· .
<ID _@D··
©©.
@·©
memorijske .
celije
efektorske
celije
• 0
. 0.
._
Slika 119- Reakcija posle pivog i drugog kontakta sa antigenom.
; ·. \
... .
::."""".:_ . ·.. .
.·'·.'
,._:. - .
··''·
-.. .. ---.------'--· _ __,__ _________________ _
... . · : . .. .
genetika- Re-petitorijum · ·-
Kod sisara postoji 5 klasa antitela: lgA, lgD, lgE, lgG i lgM. Karakteristika imunoglobulina je, kao. sto je istaknuto,
velika raznovrsnost, koja omogucava da , jedinka maze_ da -na. svaki antigen koji postoji
(1 012 varijanti) i ako pre toga nikad nije stupila u s njim, sto predstavlja preimuni repertoar antitela.
lgA imunoglobulini se nalaze u sekretima egzokrinih zlezda kao st_o su s·uzne, . mlecne, pljuvaene i zlezde
intestinalnog i respiratomog trakta. lgD i lgM se nalaze na .membranama B-limfocita i oinogucavaju njegovo
sazrevanje, tj. sposobnost odgovora na antigen. lgG arititela su glavna klasa _ imunoglobulina, koja za sebe vezuje
antigen i stvara kompleks antigen-antitelo. lgG nasi . antigen do_ membrane fagocitirajucih leukocita i
,. . indukuje destrukciju antigena; , Ukoliko postop..infekcija; .da bi lakse dospeli iz lumena krvnog ..
· ·suda u infiamatomo mesto, neophodno je sirenje ki'Vnih sudova. To sirenje omogucavaju.lgE ahtitela koja se vezuju
· za membrane mastocita i ·bazofila indukujuci .. njihovu·degranulaciju, pri cemu .oni oslobadaju. medijatore citokine jfl,·
vazodilatatore (histamin), kojisire kr.vne sudove. ... . . · · ._ · • · · · . _ _ ..
· ,. · Organizam· uspeva da odgovori na'.tako broj antigena zahvaljujuci i tome sto stvara ogroman ·broj razlicitih
. . Jimfocita (sarazlicitim receptorimana:povl"Sinicelije); ali.ce .samo.oni s·limfociti koji mogu specificno da se vei:u za ·
antigen, biti.aktivirani i selektivno:umnoi:eni, pri cemu ce se dobiti klonovi (umnoZice·se isti tip limfocita u velikom
broju da bi mogao da unisti antigen). Svaki limfocit prepoznaje samo jedan specifican antigen. Ova pojava je
oznacena kao klonalne selekcije (slika ·118). Proliferacija izabranog limfocita se desava u sekundamom limfoidnom
organu, najcesce onom koji je najblize mestu infekcije ili kontakta sa antigenom.
Svaki T limfocit za vreme sazrevanja, dok se razvija _ u timusu· dolazi u kontakt sa svim mogucim
potencijalnim antigenima svog sopstvenog. tela kao i onih koji dolaze ii spoljasnje sredine. Tu nauci da
raspoznaje svoje od stranog. Kada T limfocit dode u kontakt sa svojim prepoznaje. ga kao takvog i ne pocinje
· prolite·racij<fcelifa·:'Meoutim;··Kad prepozna.l na 'prezeiitujC(cOj terrtstra·ni ·'arifigen. -zapocinje proiiferadju.
. Drugim recima postoje limfociti koji mogu .da pamte susrersa antig€mom·. Takvr:limfociti, nazvani, memorijske C:elije . . . . .
- mogu dugo .da .mirujui-sve ·dok ne ·doau·:U: ·kontakt ;s·a. prepoznatljivim:;:ahtigenom•·(slika .. , ,, , ,
izuzetno dugotrajan. Po nekim shvatanjima meinorijske ·: __ ,
se celije n;ogu ce!o_g . . · ' H: · . _ · _ . . . . . · .· · .. ... Jfl.: :
Kada ant1gen po drug1 put ude · u Jedan orgamzam.reakCIJa ·na ;njega :btce :mnogo :bumJJa tbrzamego kada:;se. sretnu ;;-. : •
· prvi put. Ova vrsta imunog odgovora naziva·s·e sekundamiimuni odgovot:Na njemuse.1emelji istvaranje:vakeina ... . _. ·.,_,__
. ·. · ': .U sustini :imuni odgovor :: .. ;:; •. :
limfocita:ga prepoznaju:·. Prviodgovorde stvar.anje;cjtokina koji sustil!skfpaje.signale (alarm) :daje uorganizam stig\o. .
·He·· Ova·reakcija:se.desava;nakon:syegamekoliko'sati:-od,s'usreta-sa:antigenom:·Zatim stupaju na scemi B .ili .. : . ·
· .. ,Ukoliko:' antigen po drugi put ude u organizam·.:. -. -.
. )±::s::" .-:sve.·proliferis.ane:.celije-:,ce ·,umreti
preziv.ece samci·.memorijske celije; -.' '. .- ·' · ·
·· · Za razliku od 8 1 Tlimfocita kojivrlci specificno· prepoznaju"antigen limfocit koji ga prepoznaje) ·
postoje i imune celije koje nespecificn'o reaguju"na. antigened(ao. st/aemdriticne ceiije i makrofazi, i imaju mnogo
. nespecificniju ulogu u imunom odgovoru organizma:: '. ·. -.
. . · .... .. _:_ •.... . · .. · - ·_· . . . . . 1
42. Geni za imuiioglobuli_ne- -.; :, : .. - . ·
. .. ·. .. .. . .·.. .
S obzirom da su imunoglobulini po hemijskoj prirodi njitiova :sinteza .je genetski determinisana. Familija .-
. . ._. . _gena · koji ju. iJTiunoglo bu :'": :. -.
: ovih •
·- Jmi.moglobulina su:detemlinisani od ·strane :la_nci 'mogu·hiti .ili .u , · · ··
.. od :ekspresije ·specificne .koji ·.kodiraju V . . .
·· (va_rijabilni) region '(ima ih ·oko .200) Ymnogo manji hrOj gena toji '.kodifiiju:-C·.(qonsfanO:region;{ima .ih' 5kVarijab11ni :·
· deo polipeptidnog lanca je kodiran ,; uz pomoc ;;J :{juncfionf geria {ima ,;h :s),:: koji J<odirajti'polipeptidnu :sekvencu koja < ·· :
· ' · povezuje V. i C · domen · imunoglobulina. ·Znaci .·da bi .varijabil_rii :Janac :,bio · kodiran;·/_neophodno: .je.: spajanje .tri :tip a. _ ': .·, ,
··genskih segmenata: · V (variable),· D (ima ih-27) 1-J 'Uunctipn) :!e.gion kodiranje DNK
sekvencom koja nastaje spaj'!rijem dva tipa.genskih segmeriata:. y segmtimtima i J segmentima, a svaki region teskih
lanaca kodiran je sekvencom koja nastaje spajanjem tri segmenata: V, ·J, D segmentima. · _
· -· Somatska rekombinacija koja spaja Vi J segmente_lakih larya_ca i V,_ teskih lanaca nazivase V (D) J ""r ..
rekombinacija. · Ogromnu · raznovrsnost varijabilnih ·· region a · .imunoglobulina. ·· obezbeduje VDJ rekombinacija. "· ¥'
·Rekombinacija zapocinje _ili permut'!cijoin · nukleotida (uz pomoc - - ·
. : . •. ·. '.
31
..... - ... , ••. .;, ,·:._ : ...... ___ ......,________ . -·=-. ....:.--·-------.......... ... -------··----·--·--.. ..
:
.. ·.
'
'
;

'
::: ;
;
CETIRI OSNOVNA MEHANIZMA DIVERZIFIKACIJE ANTlTELA.
. ... ..

·.::_-:::;.·
. . )
..


•· L
., . .::
·, .
•:,J.
:
;:
. .
--·--··-- -·- .. --·-· .. -----------.-:----·--· -·---.--... -- , · .
KOMBINA. TOR NO POVEZIVANJE GENSKIH T {'
i
•· . . . . '·· : I .
SLUC::AJNE DE)-ECIJE IINSERCIJE NUKLEOTIDA NA SPOJEVIMA GENSKIJ:l'l
. . · · . SEGMENA.TA . . : · .. · .
.. , ____ , _______ ---- --·- ·· --------
-- --------------
, .. ; •• ;_ .' ,. _____ _.J
_; .··.
KOMBINOVANJE TESKIH I LAKIH LANACA
' HLA kompleks

TSt-:E HiPERMUT ;.CiJE
Slika 120 - Putevi diverzifikacije antitela Slika 121- HLA fokus
.· · .
...
··.·
.. . MHC klasa I MHC ldasa 11
koja
naseljava odredjeno staniste. Jedinke se
ukrstaju i daju p1odno • . ;
. .
···'
··· .
... . .... .. . "":
123 · ·
.. . .. .. : : ; :· : ; . . . i
..:
' .:.· :' ·.- . .
t-
,._, ..
.; . ---· ··
:. L·
i .·
.....

Human a genetika - Repetitorijum
rekombinaza koje kodiraju rag geni), cime se postize reorganizacija kodirajuce sekvence, ali cesto usled
nepravilne reorganizacije maze doci do stvaranja nefuhkcionalnog imunoglobulina. Ova pojava uzrokuje ranu
smrt B-limfocita u kostanoj sr:Zi, jer u toku sazrevanja ·ne uspevaju:da sintetisu regularan imunoglobulin. Pod
terminom sazrevanje afiniteta se podrazumeva .progresivan rast afiniteta antitela prema antigenu, nakon prvog
kontakta sa njim (slika 120). Sazrevi:mje ·afiniteta nastaje zbog kumulovanja point-mutacija u okviru kodirajucih
sekvenci V regiona L i H lanaca. Svaki imunoglobulin koji ce proizvesti jedan B-limfocit imace isto antigen-vezujuce
mesto, pa se zato B-limfociti oznacavaju kao· mMospecificni. Ova pojav'! se objasnjava time sto svaki B-limfocit
stvara jedan V laki region i jedan V teski region, sto znaci da svaki B-limfocit, s obzironi· da je diploid ne gamiture,
sadrii 6 genskih grupa. Dve grupe su za.lake,Jance.(lambda i kapa), a jedna za teske, pri cemu od oba roditelja
postoji .gamitura od po tri grupe, ukupno sest Uocenoje da svaki B-limfocit transkribuje dve grupe od sest; birajuci
izmedu lambdaJkapa .i ocevih i majcinib grupa, pa se ova pojava naziva alelsko iskljucivanje. Prilikom sazrevanja
8-limfocita zapaia se promena klasa·. imunoglobulina koje· se sintetisu. Uvek ce se prvo sintetisati lgM i lgD, a
. T-helper limfocit preusmerava sintezu na lgA; lgG i lgE (sinteza nak'?n kontakta sa klasa
antitela). · ·
43. · HLA lokus
Funkcija imunog odgovora usmerena je prema eliminisanju strane cestice (antigena), pa je vazno da se
napravi razlika izmedju antigena i celija sopstvenog organizma, kako bi imuni sistem normal no funkcionisao.
Ova sposobnost razlikovanja sopstvenih celija od antigena imunokompetencija. u suprotnom mogu
nastati odredene bolesti imunskog sistema (Hodzkinova bolest, Myastenia gravis, itd.), kada se rusi prethodno
navedeno pravilo. Posebna porodica gena. Gedna od najvecih) obezbec)uje sintezu proizvoda koji omogucavaju
razlikovanje antigen a i normalnih celija. T aj genski lokus naziva se MHC' (major hystocompatibility complex) lokus ili
glavni sistem tkivne podudarnosti. MHC .lokus je. uopsten naziv kod svih, kicmenjaka, jer ga svi imaju, a ked coveka
on se naziva HLA (human !eukocyte antigen) lokus. HLA genski lokus se nalazi na polozaju 6p21-23, i obuhvata
128 gena i 96 pseudogena (slika 121 ). Njegova duZina iznosi 3,5 kbp i predstavlja najpolimorfniji genski lokus
kicmenjaka, pa se u razlicitim populacijama pored istih javljaju i specificni aleli HLA lokusa. Sve humane populacije
·sadrie A2 alel;dok se npr:.aleli Aw43 i Bw42javljaju same u populacijama cmacke rase. Geni HLA lokusa stoje u
kodominantnom odnosu i. kontrolisu sintezu, tkivnih antigen a, koji . se , nalaze na plazma membrani svake celije. ·
.· ·• · Postoje dve · klase· antigena': i 11) . . Klasu .. l . cine. genLfll,A-A, . HLA-B,HLA-C . i njihovi produkti su ·
. ; •' '. transmembranski· .proteini koji -:se:malaze'na·:" rnembranama• .svih .celija. klase. I .SU transmembranski
·· .' · . . ·. · · .· heterodimeri ( sastoje se .. od :dva razlicifa polipeptidna i koji se pruzaju u. ekstracelularni matnks i · · ·
' ·· ,. :: :c;; za)sebe·vezuju Klasa ILantigena se sastoji. od produkata gena HLA-DP, ··
·· ... ; .. i:i ·celijama ·. (spermatozoidi; . ·. makrofagi; monociti, ··.·
B-limfociti i epitelne celije). Antigeni:klase .·11· sudakode transmembranski proteini sa ekstracelularnim domenom i ·
sastoje se od alfa i beta polipeptidnog lanca. Antjgeni koji pripadaju klasi 11 se nalaze samo na membranama celija
. koje reaguju sa antigeriom (slika 122). · · · · · ·
44. Geneticka struktura popuiatijE( ·
·· · Populacija predstavlja skup jedinki iste vrste, koje zive na odredenom prostoru (a real), slobodno se ukrstaju
i daju plodno potomstvo (slika 123).: populacija ima odredene karaktenstike kao sto su: polimorfnost,
neprekidno kretanje, uzajamne interakcije sa biotickim i. abiotickii;n faktorima i geneticku strukturu koja je
vremenski specificna .. Pod pojmom geneticka · struktura · popi.rlacije podrazumeva ·se ucestalost genskih ale la i
njihovih kombinacija u odredenom trenutku vremena. Svaka popuiaeija poseduje fond gena koji podrazumeva skup ·
gena svih jedinki koje cine populaciju. Da bi se utvrdile slicnosti i razlike izmedju npr. dve humane populacije ··
potrebno 'je izvrsiti uporedivanje frekvencije genskih aiel a na velik_om sh.icajnom uzorku. Primera radi, ukoliko
se posmatra frekvencija alela za neko monogensko svojstvo koje se. javlja u dva oblika, npr. sposobnost osecanja
· PTC i neosecanja PTC kao gorke substance, onda ta svojstva .determinisu dominanti i recesivni aleli A i a. Unutar
populacije svi genski lokusi za ovo monogensko svojstvo ce imati dominantni ili recesivni pri
cemu su p i q oznake za ucestalost pojedinih alela. Posto se gen·etski fond n_asleduje od roditelja, potomstvo maze
biti homozigot ili heterozigot (AA, aa ili Aa}. Poste se ]edinke slobodno ukrstaju odnos ho'mozigota i heterozigota ne
stoji u mehdelskom odnosu 1 :2:1, vec varira: Homozigoti AA nastaju oplodenjem jajne celije A sa spermatozoidom
'
32
./
'.
· ·: . . : .
·:.
ucestalost dominantnih
homozigota
, . A a ucestalost heterozigota
aa ucestalost recesivnih
homozigota
Slika 124- Hardi-Vajnbergov zakon
'·. ·· ;'. . ·:--
,·::'i.JEDINKE;IMAJU
: J..o.,, . ..... ,• ...,q ...... ..... ,, · - ·-· ............ v ,_, ''. ">'1 - . "' .<" •
VJJABILITETH
. , .
.... ·- . . ·-- ·
I .
Slika 125- PopulaCija u populacija)
. . .. . ;; : ;
. ; ·_ .! _-
.. , . __
.· ., ;;,··
Human a genetika - Repetitorijum
x p :; p2. lsto vazi i za recesivne aa hom'ozigote, koji ·nastaju oplodenjem jajne celije a i spermatozoida
x.q:; q2. Medutim posto postoji mogucnost da spermatozoid A oplodi jajnu celiju a, ili spermatozoid a oplodi
jajnu celiju A onda Kada se izvrsi ?inteza svih formula, dobice se da je u populaciji
odnos genotipova p
2
+ 2pq + q = 100% dobijen iz obrasca (p+q)b100% i ovaj obrazac se naziva Hardi-Vajnbergov
zakon (slika 124). Ova definicija vazi samo za populaciju u ravnotezi (slika 125). Populacija je u ravnotezi, ako zbir
njenih alela odgovara 100% datih alela, odnosno ·zbir frekvenca svih gena (alela) u homozigotima i
heterozigotima iznosi p+q:;1 (100%). Ukoliko se prate tri alela, kao npr. za A80-sistem krvnih grupa onda obrazac
glasi (p+q+r)2:;1 00%, pa krajnja formula glasi p2+q2+r2+ 2pq+ 2pr+ 2qr-fOO%. · · · ·
45. Geneticka ravnoteza populacije i faktori koji je remete
Geneticka ravnoteza u populaciji je idealizovan prikaz populacije koja n-e postoji. Populacija koja je u ravnotezi je
dovoljno velika, sparivanje jedinki se odvija po principu slucajnosti (panmiksija), sve jedinke imaju
ujednacen vijabilitet i fertilitet, a faktori koji remete populaciju na nju ne deluju. Ovakva populacija naziva se
idealnom mendelskom populacijom i naravno ne postoji, vec se teoretski koristi kao model u populacionoj
genetici. Faktori koji remete geneticku strukturu populacije su: mutacije, migracije, selekcija, geneticki drift i
inbriding. Svi ovi faktori deluju na skoro sve humane populacije i znatno menjaju geneticku strukturu populacije,
dovodeci do evolucije ljudske, pa i svake druge vrste. Mutacije deluju na taj nacin sto evolutivno dovode do zamene
jednih gena drugim. One mogu biti spontane i (izazvan·e nekim agensom) i uglavnom predstavljaju stetnu
pojavu, ali u· retkim slucajevima mogu <;la budu izvor :novih gena.; .osobina. Ukoliko se na nekom genu dogode
mutacije koje uvek rezultuju promenom .gena u isti alelni oblik, onda se one nazivaju rekurentne mutacije i mogu
znatno da uticu na frekvenciju alela u populaciji putem mutacionog pritiska. Ucestalost mutacija u populaciji se
odreduje preko broja mutanata (nosilaca I"((Utacija) u populaciji. Ona se izrai:ava obrascem U:;MfN, gde je U,
,frekvencija hromozomske ili genomske mutacije, M broj mutantnih fenotipova, a N broj ispitanih jedinki. Migracija je
'pojava kada jedna populacija menja i:ivotni area! i kombinuje geneticki:materijal sa drugom populacijom uzrokujuci
, protok gena. Najbolji primer efekta migracija na geneticku strukturu populacije je zastupljenost 8 krvne grupe u Aziji i
Evropi. Pokazano je da je ucestalost 8 krvne grupe u Aziji 25%, a ad istocne ka zapadnoj Evropi se postepeno
smanjuje do manje ad 10%. Ova pojavase objasnjava seobama Mongola koji su se ukr5tali sa lokalnim evropskim
stanovnistvom i time vrsili introdukciju (uvodenje) · 8 krvne grupe :na _evropsko tie, koja pretpostavlja se, nije ni
postojala na evropskom tlu. Kako migracife i · mutacije; tako i selekcija utice na geneticku strukturu populacije.
Selekcija predstavlja povecanje ili smanjenje ucestalosti odredenog gena ili genotipa, zbog razlicite prednosti u
oplodenju i prei:ivljavanju nosioca odredenog gena. Selekcija maze biti prirodna ili vestacka, i javlja se u svim
· stadijumima zivota. Prirodna selekcija je put u toku koga se pomocu faktora eliminacije odredeni genotipovi
odstranjuju iz populacije. Vestacka selekcija (ili antropogena) je poseban vid ·selekcije koju covek vrsi, zbog sve
vece mocl narusavanja odnosa u prirodi. On povecava selekcioni pritisak na racun drugih organizama, a smanjuje u
svoju korist (medicina). Ako odredenf organiiam zaobide selekcioni pritisak onda se kaze da se on adaptirao.
Adaptivna vrednost genotipova zapravo predstavlja sposobnost jedinki . da svoje gene prenesu na potomstvo i
organizmi koji su favorizovani selekcijom (prirodnom ili vestackom) imaj0 veliku adaptivnu vrednost, kao npr. insekti.
Ukoliko adaptivnu vrednost predstavimo. sa :w. a selekcioni koeficijen( (selekcioni pritisak) koji predstavlja stepen
smanjenja adaptivne vrednosti genotipa sa S onda sledi da je W+S=1 (slika 126). Bitno je napomenuti da selekcija
obezbeduje i eliminaciju stetnih dominantnih i stetnih recesivnih gena. Geneticki drift (geneticka slucajnost) je
znatna promena postojece geneticke strukture populacije koja dovodi do remecenja njene ravnoteze. Geneticki drift
se desava u svim populacijama, ali najbolje tiocava . u malim ;poP,ulacijama. Najveci broj lndijanaca Severne
Anierike ima 0-krvnu grupu, dok je uocena jedna ·populacija koja ima A krvnu grupu u vecoj frekvenciji
nego bilo koja druga humana populacija, usled delovanja genetickog drifta. lnbriding predstavlja ukrstanje dve
jedinke suprotnog pola koje · su u bliskoin srodnickom· odnosu. Ukoliko dode do braka dva bliska srodnika
{konsangviniteta), u genotipu potomstva ce se . povecati frekvencija homozigotnosti, sto je znacajno za ekspresiju
stetnih retkih gena. Sto je veci stepen srodstva to je veca sans a. da ce se eksprimirati stetni recesivni geni. Efekat
inbridinga je skoro uvek negativan, ali postoje· slucajevi, kada su deca rodena iz braka srodnika imala prednost,
naime nasledili su gene koji su predstavljali isticanje osobina njihovih roditelja. ·
lnbriding se u veterini koristi za dobijanje odreoenih rasa zivotinja i isticanja ·njihovih osobina: npr. krave koje daju
vise mleka, ili svinje sa vecim procentom masnog tkiva itd. · · ·
;_ : ; .
• • : • • f
33
r ·•
• . I

KADA SU PLODNOST I PREZIVLJAVANJE
SVIH GENOTIPOVA U POPULACIJI JEDNAKI-
______ A_·_D_A_F_T_i_V_N_"A __

____ . J
I
. KADA SU PLODNOST I PREZIVLJAVANJE
GENOTIPOVA U POPULACIJI RAZLICITI-
SELEgr.:CiJE S - predstavlja
!
• stepen smanjenja adaptivne .vrednosti
genotipa · . · ·

·.-:
w = 1- s
Slika 126- Adaptivna vrednost genotipova
i ; . .. ..
. . .- . ·.· : :
' . . - .• .
J
=
. ·-·
-. • ..
:- -··. :

~-

-. ·1 ..

:_~. .;.: :_·~. JI ij}~J:
N

l

L~~~sic:~ln ·j

_ Li~.~~~,:olchi~~~ ~~.?.!.~~!~]

AZOTN-f!t-Mf'atqdze a}!SU!P!Ui~l 1~~~rn
I! C.

E){!IS .
·- C=O

~:GJ::
Nil

UN

o-~rrr~ IIN~.)H
o-J
Jll

e brze~8 vtuo~
hr..,..,'!:-.

.

..

N'"~"J

. ~« i~r:nidinske azptfl~t~N.Lozv
? ..

~~i:.:;;;L £i· t~ j~n :~~~ jt~::j;tf~~~l:.r~.:·:~= ~~; i~~~Ta~~~-e :l\~t ~~~ ;; ;;:m~:f~~·~:~~i:~

>!NO
[~lS~Io~;ow ~JP~=»ti~Oi"*!J.
R~~-o;;;;·J

t

.

ez. U specificn~m redo·sledu nukleotida (sekvenci nukleotida). kojoj pripadaju adenin (A) i guanin (G) (slika 3). 2-dezoksiriboze gradi estarsku vezu.ezama .• -.Repetitorijum · 1. osim nekih RNK virusa (slika 1).?nastaje kada ·fosforna kiselina esterifikovana za 5C-atom .v. Grupisanjem vise tripleta nukleotida u jedinstvenu DNK sekvencu obrazuje se gen. u procesu transkripcije sintetise iRNK. _pri cemu je esterifikacija ·pracena oslobadanjem jednog molekula vode. otpusti ~oH grupu~ koja ce sa -H atomom koji je otpustila -OH grupa vezana za 3C-atom secera susednog nukleotida nagraditi molekul vode i formirati estarsku vezu. daje odgovarajuci protein. nukleotidi koji su organizovani u grupe od po tri (tripleti . ih ima 4. N.. nose sifru (kod) za odgovarajucu aminokiselinu.. U okviru molekula DNK postoje cetiri tipa nukleotida (nukleotid adenina. a i triptofan od strane ACC tripleta..obno. i on je uvek konstantan.lanc.. Metionin je kodiran od strane TAC tripleta. S obzirom da sad a molekul fosforne kiseline preko kdga je izvrseno povezivanje dva susedna nukleotida u dinukleotid.timina. Polinukleotid~i lanae cini primarnu strukturu . Kompleks secer-azotna baza naziva se nukleozid. . Organska jedinjenja u DNK. snRNK).medus.ka 5) .p. a na drugom kraju 3' kraj . vezuje azotov atom na polozaju 1 azotne baze. a druga za 3C-atom secera susednog nukleotida). Druga grupa je grupa pirimidtnskih baza kojoj pripadaju timin (T) i citozin (C) (slika 4).. 2. Za molekul DNK se kaze da je antiparalelan. a drugi u smeru 3' • 5'. 'tj.nukleotida). .gtlanina. Naime.. rRNK. Humana genetika.. Nalme. na sebi nosi dve estarske veze Uedna za 5C-atom secera. koji su polimerizovani preko fosfodiestarskih veza. sa . Struktura molekula DNK i RNK Molekul DNK predstavlja jedan od najvecih makromolekula u prirodi Uedna celija sadr:Zi cak 2m DNK). pa samim tim i 4. os'tace 5' kraj.t)v. vezuje azotov atom na polozaju 9 azotne baze. jer je u okviru heliksa jedan' polinukleotidni lanae orijentisan u ·smeru 5' • 3'. izmedu ove dve azotne baze obrazuju tri intermolekulske vodoriicne veze. U sustini DNK je polimerni makromolekul. jer.' ne p_odleze varijacijama. Neke aminokiseline kodirane su od strane samo jedhog 'tripleta.. Specificni deo molekula DNK cine azotne baze. determinisana je nasledna osnova koju obezbeduje DNK molek~l... ·Guanin i citozin se na isti nacin komplementarno pqvezuju samo .• Fosfodlastarska . Za ovaj princip postoji izuzetak koji je uocen kod porodice Retroviridae. Neorgansko jedinjene koje ulazi u sastav DNK nukleotida je fosforna kiselina koja preko svoje -OH grupe. Azotne baze klasifikova_rie su· u dve grupe prema tipu heterociklicnog prstena koji sadrie. . Nukleotidi DNK molekula sastoje se od dva organska i jednog neogranskog jedinjenja medusobno povezanih specificnim hemijskim vezama (slika 2). Gen je deo molekula DNK koji je odgovoran za sintezu odredenog proteina preko razlicitih RNK molekula koje takode kodira (iRNK. Sektmdarnu strukturu . pri cemu virusi iz ove porodice uz pomoc enzil:na reverzne transkriptaze vrse sintezu DNK molekula na osnovu RNK matrice koja cini osnovu njihovog genoma. Molekul DNK kao nosilac geneticke informacije DNK molekul predstavlja naslednu osnovu svih zivih bica.vodonikovim atomom na polozaju 5.ezuju. a kod pirimidinskih baza za prvi ugljenikov atom 2dezoksiriboze.. Nasledna osnova ogleda se u principu osnovne dogme molekularne· biologije koja glasi da se ·sa molekula DNK. a drugo jedinjenje je azotna baza. sacinjen od nukleotidnih monomera. Pretpostavka je da je RNK na pocetku evolucije vrsila ulogu i RNK i DNK molekula.ih veza po principu komplementarnosti.•!\o~L.. tRNK.s<? •. Ostale aminokiseline sli kodirane od strane dva ili vise tripleta DNK nukleotida (arginin je kodiran sa sest tripleta DNK nukleotida).DNK molekula cini. pravilo komplementarnosti se odnosi na cinjenicu pa se adenin iz-nukleotida jednog polinukleotidnog Janca povezuje sa timinom iz nukleotida drugog polinukleotidnog Ian ea gradenjem dve intermolekulske vodonicne veze. i koji se teoretski mogu kombinovati u neogranicen broj varijanti.a (od koliko god se· on nukleotida sastojao). Kao posledica stvaranja fosfodiestarske veze na jednom ktaju polinukleotidnog. Heliks predstavlja vezu dva polinukleotidna lanca. losfodi. koja procesom translacije u kome ucestvuju sve RNK. tipa nukleotida. DNK molekula. S obzirom da postoji mcigucnos~ slobodne rotacije oko fosfodiestarske veze (prostorne konformacije).sto se. Prva grupa je grupa purinskih baza (sadrii purinski heterociklicni sistem). Direktno iz pravila komplementarnosti vazi i Cargafovo pravilo koje kaze da je ·u okviru DNK molekula uvek jednak kolicinski odnos purinskih i pirimidinskih baza A+G = T:~-c.dtozina).secera.. . veza je po tome dobila ime fosfodiestarska veza.dvostruki heliks (sli.Takozvani skelethi deoOo:moiekula DNK cine 2-dezoksiriboza i fosforna kiseliria koja je za nju esterifikovana. 1 ·· . . za razliku od AT baznog para. nukleotidu su pentozni secer 2-dezoksiriboza koja se nalazi u enolnom obliku kao ~-0-dezoksiribofuranoza. pri cemu se kod purinskih baza za prvi ugljenikov atom 2-dezoksiriboze. koja se ostvaruje preko vodonicn. . Azotne baze se za C-atom secera na polozaju jedan povezuju glikozidnom vezom.estarskiJ:n.

Slika 9 . .· · Slika 6 .kasno se ·replikuje u S faxi · .~~~§.Sit u interfazi rano se replikuje u S fazi kodirajuce sekvence nesto bogatijl G-C parovima ·'·· I. .•=.Tipo\:'i hromatina . ~· .ffiFiilil!illtii{@"r!.ctewrtt!~H ~!®~Bii! ~f!D~{fi!Ril .} . . Slika 8.HISTONI j ~. .{·i.. - ' rastr. inaktivni X h.)t-W:Ji4§43%trf3 7 kondenxovan u interfaxi .srednje repetltivne sekvenee Fakultativni:.visoko repetitivne sekvence b) lnterkalarni .i~9 ZOO nm J..Struktura hromatina . i ~.romox 0 m (Barovo tel~) .Hromozom (SEM) : .nesto bogatiji A-t parovima Konstitutivni: a) centromemi . I-. ..~:J•Jj~ti:~~Ti:t~~"C~~~ftH J:: l ~65i~~ii#:i2Qii!jll~t[~:k] 1 1 t ' rtrn ~~~l F~~t§i!1>iif!io/$itt~~~ · :So nrn t 1 T ~c~~~f9~~ ~ie¥.@I . ·~\ . SfM!tt![!)'f!t!ftt!tt. '70(• nm I I ~.

Humana aenetika . h~lazi iu:acil (lJ)~ Svi ~povj. pri cemu svaki deseti nukleotid stoji u centralnoj osi. · ·.·: ~.-··-- . ..iRNK. membranu j~dra.Reoetitorijum . : u euhromatinskim (svetlim) poljima odvijaju se p... Hromatinske~'riiti su ]ednini ·svojim krajem vezane za unu~rasnju .::. Molekul RNK ·se javlja u cetiri osnovna oblika (kao i u mnogim drug~m).: vee l! qbliku_ ~romatina koji predstavija nuldeoproteinski kompleks (slika 6).·:. . . Najkr. <. svanove celije itd. H4).rocesi replikacije i geriske ekspresije i ta poija su izrazitija u . vezuju odredenu grupu proteina · .i pericentromerni regio·n (kaji ·se nalazi u blizini centomere) se ·sastoji od visoko repetitivnih sekvenci (sekvence odoko 170 bp ·koje s~·uzastopn~ ponavijaju veliki broj puta). a_ formiraju hromozome (slika 7). m • . histonima. Kod~n je po svojojp~~i_-.. -:i .lzmedu dva . Molekuli DNK se-preko.·: ~ : ·· · .cemu se ilUkleozomi gusto..repliciraju i . ~NK. · .sabijaju cik-cak konfonnaCJjom.. : 3{ :_.. .).:I:I~~~~:~.:. petlje ~iti. a kao primer se navodi inaktivisan X · hromozom ( Barovo tela ). Uloga centromere je da u 1nterakc~ sa nitima deobnog vretena abezbedi pravilnu segregaciju (razdvajanje) homologih hromozoma u deobi.: --~ ~ . •. --------------------------·-·------... .~~~-. •r. -fosfodiestarska. ..· je ta sto se u RNK molekulima nalazi drugi tip seeera pentoze po kojoj Je RNK i dobDa ime. Sirina heliksa iznosi 2 nm. : istom principu komplementaran kodonu na iRNK. Hroinatin Hromatinom se u si rem smislu podraz~me~a i . · . .. a to su konstitutivni i fakultativni.·.. '..-~~· nukleozoma nalazi se /iriker'{vezna) sekvenca-DNK_'~!J~Ieotida'Cija duiina iznasi 20-60 bp.. sekundarne konstrikcije (satelitna DNK) i matriksa.v~za : u :·(.zenskih jedinki sis·a ra/:· .cavisi:-os ·alcti\mcE~ datog regiona DNK): . Celu celiju ispunjava citoskelet koji u regia nu centromere cini specificnu strukturu nazvanu kinetohor. celijama koJe su intenzivn·o sintetski aktivne (Zlezdane celije. · . liziri? . DNK malekuli·se ne nalaze .Jsa.~radnji male i velike . sto za posledicu ima ogromnu raznovrsnost u prostomom izgledu RNK molekula (linearan. kondenzuju 'i poprimajuobliktipiean za· vrstu. . prema poloi.• . Oktamersko histonsko jezgro sastoji se od cetiri duriliraria 'tipa. preko koga se 'koJa 2 . .. s'e ja~lj~ kad~-J~.:<. . rRNK i snRNK ion je za razliku od molekula DNK jednolancan· i mnogo podloi:niji konformacijama aka fosfodiestarske veze. ~:~: ·:. ·: :_.·. niti Kada se jedro posmatra:·pod svetlosnim~mikr!Jskoporiijnogu :se ·uociti tamnija· i svetlija palja u njemu (slika 8)> Heterohromatinska: (tamna) . H2B.:~:::... . Matriks se sastoji od proteina (histona i nehistona). . Ribozomalna RNK (rRNK) ueestvuje u .i ·arginina. ' • ..~celija ~ fazi deobe..~~~~f ~if~:~-~~~~~~~i~-~. . Svaki hromoiom sastoji ~e ' ad . Sol~noidi obrazuju petlje. · . · Hro. . lnformac_ · RNK nastaje_u pro~~u .a.. estarska. ozallli. .-·.~: ~_:_ :-~-._ oblik~. interfazi celijskog cikh.34 nm. 'M·~· . 3.--------·-·-· ·--.anizaCiju hrrima.tiri~. ·histona {H2A. ~~s~ajanje izmed~ dya nukleotida iznosi 0.tipa -heterohromatina. Postoje · dva:..:·~. :oko koga se namotava DNK ·'Jff-: heliks.·· ·· -· .k<?_mplementa~ kodu·'.4 _m. a centromera ...f~s. na DNK molekulu. ..· . a rastojanje izmedu pomenutih rukleotida !znosi_ 3. · . ribozoma uz pomoc enzima aminoacil-tRNK sinte~e i da prepozna sifru na iRNK (antikodon). _ nalazi u svom ciklicnom enalnom obliku kao beta-0-ribofuranoza). vodonicna). koji se odlikuju po tome .. Transportna· RNK ima ulagu da u procesu translacije. predstavlj~ju . pa'cal< T oa'·se··oraZiiktijC(rrteou·cianOvima 1mrno1ogog -parcrllromozorr.:.na~ledni materijal· organiz~van 't:J }~dru celije u· f~zi mirovanja tj.koliCinu . _ subjedinice prokariotskih i eukariotskih ribozoma Mala jedama RNK (snRNK).... .polja : su visoko~ kondenzovani segmenti koji se u . . · . a toje riboza (koja 'se ·. ---------------··· ·- k~o posledi~a te pojave ONK ima oblik spiralno uvijenih merdevina. Ovakva struktura naiivase nukleozom i_n~ se~i sadrZi DNK duiine oko 200 baznih parova (bp). . Fakultativni heterohromatin predstilVIjainakfiVI1i otilil( nekih: ~romq~oma.. u somatskim celijama..aci su u metafazi eelijske deobe .'·. farmirajuci male ribonukleaproteinske cestice. · · · ·. stO se on nalazi u svim hromozomima u razlicitim kolicinama i P~)?~jima (pri eemu polazaj i koftci_na mogu davariraju u_ razliCitim tipovima eelija i urazliCitim etapama Zivqtnag ciklusa...(slika 9}: Hromozomise na pocetku celijske deobe ·skrilttiju. ~ .aju centromera .fcfma·Iqseline·. _.trofisna detelina_. .): Jedna od razlika· · izmedu DNK i RNK je ta sto se u molekulima ~N~ na mestiJ ~min~ k~d-~NK. · ' · :·· .: ' Hr~mozomi pr~dst~vljaj~ drugiiciju org.. ···.u ~_olenC?idnu ·strukturu.. sto · u_ svojoj :'aminokisefirys!<oL~~kY~hci ':Sadrie ~ veliku .··stc •tlglav:'lcm-·.. · · · _ · ·--~·.S ·fazi kasno . ·: : . 4. Vise nukleozama se uz pomoc H1 histon a specificno organizuje . · : :· .·poveZilju sa ·baznim proteinima. n . . n Karakteristika konstitutivnog heterohromatina je ta.. Antikodon Oje po _~:: _". '. pri 9emu ona nasi sifru (kodon) za sintezu protein~.. koje ucestvuju u pasttranskripcionoj mOdifikactji ostalih RNK mol_e~ula.·niakrofagi. H3.~~. · : .:_. pri . ~ >... Jos jedna od razlika izmedu DNK i RNK. s isti kao i u molekulu DNK (glikozidna..~· iona transkripCJje... inaktivne· sekve· ce · DNK .QH~ grup(.u · ogoljenorn. Svak! hromoi:om se sematski _ deli na p·i q krak. 1.-1:. primame konstrikCije (centromera}. . dopremi odgovarajtiee aininokiseline·do· . . · • .

Proseeno 10.. .. ..f¥J@fff!iWiflj.~§jW16f . : i¥-~~~~~~"!:!8:: f :. !..: : .:.. Slika 10..l.:~juca sekvcnca· termin01tor matriCni l~n:Jc · · · • mesto otpoclnjanja transkrlpclja mes. !· 'r • ..200000 ·: :· • ·: · tip·· .=t. ..Humani genoni ... ::. ef.rtiN.~Gi·h'_f$1 5:.Struktura gena p. Vel~lna i·': r..tltlvna ON)( rtf41.hromozomi (FISH) ~: .. ' .ltlh DN)(tnolekub Bro) DN.. dtmna euhromati~ 1 000 .15 Kb HISTON H4 -1Kb...D NJ( ..etkn t....juC• . •.. · -: ·1' 1.C rnolekula poc•IIJI · DNt( • protelnl broJs•n• re. .. .. .... . promotor RNK kodir.·•· ·· -: ..MI#kiaMaMWf@J!VS 10-101 kopU~· ·· iittS•=!·.pt-1 .. u korelaclji sa velicinom gena (od o.30 Kb) Slika 11 .· Slika 13 .y·. . · % "ocUr:.i:l&.i=·i~?..6i~A.Osnovne sekvence eukariota .. ...j . '·1 :qt!j : Bro) . . .t.... j:\~~:~<:¥9~~j _ · u ko.: ...-.kripeije '.J.\"iNi-P.j.~ · ~. M!Oi·IG·i.E:f~J®Q lntronl . -•..QJW¥M~tfld~t3=+@#e§S·W@lJ .iJi r J.lfra Slika 12. . •: .ni l:an:t( .6 Kb) · . ...lt. .r. :.~. duZina ~s·a~3ocibp···..GEN nomatrit.laciji sa velicinom gena gen za distrofin 79 (apoB gen 7.. ft..:o Z"3Yr$.l=4sa..r..ran:.... ·.10 bp vlse od 105 koplja heterohromatin · .Humaoi...Ai.J. OISTROFIN 2500Kb ·.s.

gena takode ulaze i regulatorne sekvence koje omogueavaju da dode do transkripcije.· . Pri gubitku telomernih regiona. koji se nalaze u .000 gena (slika 12). druga podela izvrsena je prema izgledu. . Moguce J8 . ~ .broju specifi.. umnozavanje spermatozoida tokom celog zivota domacina iz primordijalnih germinativnih celija). Skup hromozoma neke celije ili organizma opisan brojem.. uzima se uzorak periferne krvi u kojojse nalaze limfociti (koji. . Idiogram predstavlja sematizovan kariotip u obliku dijagrama: Genom predstavlja gametsku garnituru hromozoma ( 22 + X ili Y). U jedru svake somatske celije nalazi se 46 hromozoma. dok je ostalih 97% u vidu repetitivriih sekvenci.. potice o~ oca.. skup svih gena. .· javljaju u same jednoj kopiji u haploidnom genomu. pa se na taj nacin celije zadriavaju u stadijumu metafaze. lineam1 hromozom1 mogu da se transform1su u nng hromozome.ih regiona ali same u malom_.h~?moz~~a i nakon svake replikacije se skracuju.. . sa slike se seku i i slaze se kariogram. a 1 par _ gonozomi (polni hromozomi).. Metafazni hromoiomi (tada su hromozomi najdiferenciraniji). Jedinstvene {sing/e) sekvence su one koje se .. velicinu DNK molekula.se dele ekvacionim deobama) i krv kultivise uz dodatak biljnog mitogena (stimulator:deobe) fitohemaglutiniha. odnosno gena. ·: . broj gena i mesto gena (genski ·lokus). tj. Da bi se izolovali humani hromozomi i potom proucavali postoji vise nacina. Svaki gen se sastoji od kodirajucih i nekodirajucih sekvenci DNK nukleotida (slika 13). U sastav. · . Od 23 para. broj hromozoma.[vletoda se sastoji od nekoliko etapa.za proucavanje. Kariogram predstavlja materijalnu tvorevinu. tako. cime se razbija celijska·membrana i posebnim nanosenjem na staklenu plocicu izbegava preklapanje hromozoma. Postoje i enzimi nazvaili telomeraze koji_ reguli. ~ ·--.. kada· su hromozomi najkondenzovanijiJ najpogodniji . ali se u posttranskripcionoj modifikaciji (splajsovanje) gube i ostaju samo kodirajuce sekvence nazvane egzoni. Metacentricni hromozomi imaju jednaku duzinu p i q kraka. .vi~a pi~.(npr. · ciji redosled riukleotida odreduje sekvencu aminokiselina u polipeptidu ili kodira odredenu RNK (oko 10% gena)(slika 11 ).-=--.somatski hromozomi).Repetitorijum hromozomi povezuju za niti deobnog vr~tena.. . 22 su autozomi (telesni. · . iako pripadaju nekodirajucim sekvencama ponasaju i kao regulatori genske ekspresije. . U zavisnosti od duzine p kraka hromozomi su podeljeni na metacentricne. pri cemu je kod vrsta iz istog roda yrlo slicna (covekov i simpanzin genom pokazuju oko 95% homologije).DNK molekula.Genom predstavlja kompletnu naslednu informaciju nekog organizma. iseku i sortiraju u ·grupe. Telomerni regioni se nalaze na ~raje. Gen predstavlja segment.telomere i telomeraze ne regulisu duzinu zivota neke celije.. submetacentricni nesto kraci p od q kraka. Organizacija genoma • . a nakori toga se hromozom.eaml ~~terg1tet .------ --4 "-'-·. tj. Jedna hromozomska garnitura (23 hromozoma}. celije embriona do kraja blastOCIStnog razvoja I polne gonade tokom celog ZIVOta. dok kod telocentricnih hromozoma ne postoji p krak. pri cemu se u svakoj hromatidi nalazi jedan molekul DNK. a zene hromozomsku garnituru 46. . Muskarci poseduju hromozomsku garnituru su 46. ·• • • ••· •·• ·~ . pri cemu se smesa inkubira oko 72 sata.. velicinom i konfiguracijom hromozoma naziva se kariotip.. ali je najprostiji i nafieftiniji nacin kultura limfocita periferne krvl. Kod coveka su zastupljena samo prva tri tipa hromozoma {metacentricni. · . . Celije se potom uvode u hipotonican rastvor KCI.. slikaju.L • · --·• . . cine geni. Mada · treba naglasiti da se_odredeni introni. ·.. krak~va i sastoje se od velikog broja tandemskih repetitivnih D~K sekv~nci (TI ~~~~): Telom~r.su postoj~nost telo. . .i koje na odredeni naciri modulisu gensku ekspresiju.fl!~rn. akrocentricne i telocentricne hromozome. Preparatu se dodaje fiksator i odgovarajuca boja (veliki broj tehnika i boja primenjuje se za vizuelizaciju celog hromozorha ili nekog njegovog segme~ta). .. pri cemu ove sekvence u procesu transkripcije kodiraju iRNK.mJe cme_ de? b1oloskqg casovmka :~OJI det~rmm1se duzmu zivota svake vrste. .· ~ . Po"red podele hromozoma prema funkciji na autozome i gonozome. Proucavanjem hromozoma se bavi citogenetika. da _ najverovat.da .haploidnom setu gameta. submetacentricne.- · Human a genetika . formiranje deobnog · vretena. a druga od majke. .. . . subinetacentricni i akrocentricni): .--- . .. Posle tog vremena dobija se . 23 para homologih hromozoma (slika 10). . Raspofed svih gena na hromozomima naziva se genska mapa koja "je razlicita kod svake vrste...cn~h celija kao sto su gameti.~ _o.drza~aJU hn. na osnovu' l)avedenih osobina. XY.. 3 . ·vec im ·daju mogucnost beskrajnog umnozavanja .. Zapravo vecina gena coveka sadrii nekodirajuce sekvence nazvane introni. • • I . koji se prepisuju na RNK. . sastoje se od dve iste hromatide. U genomu eukariota definisane su tri vrste sekvenci. .~•· ·· -- . ·. __ . . ah u slucaJU prek1da hromozoma mogu vrs1t1 funkCIJU telomera. sto za posledicu ima njihov gubitak u toku deobe i de~integr~c~u gen~tickog materijala koji nos:: ~riptic~e telomere su sekvence koje se nalaze unutar hromozoma.. Genom coveka sadrii oko 30. 5. · . Svaka vrsta ima specifican genom ij. . Od ukupne duzine genoma coveka oko_ 3% . koja se dobija kada se hromozomi fotografisu pod mikroskopom u metafazi. " ..veliki broj celija koje su usle u mitoticku deobu~ U ovakvo pripremljen preparat dodaje se alkaloid kolhicin koji blokira. XX. _ _ •' -···•--. akrocentricni imaju mnogo kraci p od q kraka.

.t· ( 3' J.... '" ·:.. ~~i.. · Slika 14. ··:. · '·.Opsta shema replikacije .Replikaciona viljuska (Y-fcirmacija) . . .:.• {.'. ··~..:. 5' Slika 15 .:' ! i.

.B. Replikacija · :::. . ·Nakon prve deobe (lj.. Drugi tip enzima DNK topoizomer?ia 11. kontroli transkripcije single sekvenci (npr. . rRNK i iRNK odgovorne za sintezu histonskih proteina (H1..ije lanae-. · . a drugi sa 1SN. . i jos jedna vazna odlika ovog genoma je ta sto on nije asociran (povezan) sa histonskim proteinima. koje omogutavaju vezivanje RNK polimeraza..koja kodira lake i teske lance imunoglobulina (hromozomi 2. a kod coveka u hukleamom genomu.lanca . za · sta je dokaz geri za subjedinicu .D.. .li'w~. ·'!.se.. ~ . tj. dokazafi da hOVC?ilastali ·Janci DNK imaju intermedijernu gustinu.ifili ·koniplementamog. . u regionu euhromatina. . ~ ---. Takode su bitne.. omogucavaju brojni enzimi i ·pomocna jedinjenja. tRNK. 4 . mitohondrijski je cirkularan i kod coveka kodira samo 37 gena. prtmia· sopstvenoj · matrici)... sprecav~ njegovo sabijanje u tokureplikacije.K. _3. ·. formira replikacionu ·: ·:" viljusku (Y-formaciju) (slika 15). 14)~ . . pri cemu je ovo jedan od primera :odstupanja od ··mendelskih pravila nasledivanja._~ 11 i 16. .na.. Oni su jednu vrstu bakterija uzgajali na podlozi koja je . Naucnici · · Meselson i Stahl su 1958: godine dokazali ovu pojavu..Reoetitorijum lntermedijerne repetitivne sekvence se j~vljaju u 10-_105 kopija u genomu.. Ove sekvence grade gene koji kodiraju .1::.'izotop azota· 14N.. dok se·kod svih baktenja u DNK nije potpuno ugradio taj izotop. Neke . koje ce translacijom dati protein~ koji ?e nalaze u mitohondrijama (ATP-aze i drugi enzimi oksidativne fosforilacije).'.. Mitohondrijski genom se nasleduje matroklino (preko majke). kao i familija gena (na hromozomu 6) koji grade MHC-Iokus (major histocompatibility complex). · . Replikacija se odvija u S fazi zivotnog ciklusa celije. . CAAT i TATA box).Replikacija-omogucava konstantno prenosenje.. u cilju da .. erlzi'm helikaza nastavlja proces ·~t ..prokariota ~ n~ modelu Escherichiae·coli · Kod ·prokariotskog genoma koji je cirkularan. jer je svakoj deobi prethodila replikacija).. .. ~ . ··-·--- . zato sto se · novonastali molekuli sastoje od jednog starog (parentalf'\og)' _i novosintetisanog polinukleotidriog lanca. S obzirom da polinukleotidni l~nci imaju·jak afinitet'jedan prema dru_gom.- 6. U humanom genomu najpoznatije familije gena su familije globin-kodirajucih gena koji se nalaze na hromozomima~:.. . analizirali su pNK :cerki celija i preeiznom fizickom metodom . .9995% ukupne geneticke informacije. _ . despiralizt. pa se drugacije riazivajy spejseri. koje su nazvane familije g·ena. vrsi privrenieno raskidanje . · u cefijama coveka pored genoma koji se nalazi u jedru (nuklearni genom) i koji cini 99. Ovaj tip sekvenci..prirodan. koji potom rotira ·oko s'v~je ose za 180° i na taj nacin olabayljuj~ ~NK heliks i time ~· · . pn cemu se dobijaju dva Jdenticna novonastala. Replikacija DNK kod .sekvence (GC.u genomu eukariota gradi eemtromeru_ pericentromeme regione hromozoma .": .· 14. sto dokazuje da svaki novonastali DNK helik~ sadrii jedan polinukleotidni lanae sa 14N..jejedin:Lmolek. · ·. dvadeset dva gena za tRNK i trinaest gena za iRNK. H28.ul (zanemarujuci RNK nekih virusa) koji je sposoban za autoreprodukciju ~na ·osnovu mode1a' {za·: sintezu··ist6g ~. Za replikaciju DNK molekula s~ kaze da je semikonzervativna. odnosno blokiraju translaciju· jer njihovim transkribovanjem nastaju start i ..·--··-·----··--···. sadriala n~radioaktivni izotop azota 15N. Pod lerminom replikacija podrazumeva . · :. DNK:hefiksa (slika .sledne informaci)e sa roditelja na potonistvo. Postoje tvrdnje da se tokom_evolucije vr§io transfer delova mitohondrijskog genom a u ilukleami genom. Za razliku od nuklearnog genoma koji je linearan. .. .. fosfodiestarskih ·veza na ob a :polinukleotidna ..-0ve sekvence se nalaze H izmedu single sekvenci. glavni kompleks tkivne podudarnosti. •udvajanja molekula DNK. . H4).. odnosno razlicit od genetskog koda nukleamog genoma._ nasledne bolesti vezane su za nasledivanje mtDNK .ina iznosi 16 kbp. Nakon slo su larici prekin~ti. Nairrie ori( su po gustini bili izmedu DNK sa 15N i · pNK sa 14N.NK. . ~ · Jeplikacije... · . 22). Visoko repetitivne sekven~e se javljaju u prek() 195 kopija i cesto se oznacavaju kao satelitna DN. stop kodoni na iRNK. ·. uz ocuvanje genofonda. Najveta familija gena u humanom genomu je superfamilija imunoglobulina. podlogu -koja. Njegova dui.. ... je~an gen za 16S rRNK..azotni~· ·bai. Da bi replikaeija zapocela potrebno je da se prethodno despiralizuje DNK heliks i ~ormira repli~aciona viljuska (Y-formacije): Eni:im DNK topoizomeraza I zaseca (raskida fosfodiestarsku vezu) · Jedan polinukleotidni lanae heliksa._ . Nakon toga -~"[?"' ~~ · bakterije su premestili na hranljivu . a taj proces .9 · ATP-aze · kojL se kod kvasca nalazi u mitohondrijalnom genomu. U okviru svakog gena se nalaze start i stop sekvence koje iniciraju.proces . U f11i!ohondrijalnoj DNK je ge'netski kod jedinstven. Geni u okviru mtDNK su: jedan gen za 12S rRNK. na taj nacin sto raskida· vodoriicne veze izme'du . i U genomu coveka zapazena je velika grupa izuzetno slicnih DNK sekvenci. enhancer-i koji pojacavaju ekspresiju gena).1£ · i?f·: . : replikacije.i promotorske .-:-:. proces i-eplikacije -DNK zapocinje na jednom mestu i takvo mesto se · naziva oridzin (origin) replikacije.. je sadriala . Humana oenetika. ..0005% ukupne geneticke informacije.(spa_cer) i im~ju ulogu u regulaciji genske ekspresije .. postoji i mitohondrijalni genom koji cini 0. ti2A.

_... . Slika 16 ~ Tok replikacije Slika 17.. .X Pllll£1 i!-jl ..&?. 5' 3' _-. g r:if. ... I PRIMAZA --------~·3. ~· J' E'+:? . ._ y tire.:sainokorigujuca aktivnost DNK polimeraze ..)-:$ rll#q r:Wii (' ... 5' 3' 3~ replikaciona viljuskw- s·: - 3' Iprava~ po~eranja r~plikacioneviljuske ~ j ~.<¥::.UTi . ·. •._'- ~7.' .GJ Piih .. .r-~- ~- -. -:A GG~ f' 011 ..t .-· . oH ·' p~ . -~?!': Slika 18. .Aktivnost primaze "PROOFREADING" AKTIVNOST DNK POLIMERAzE ·.:.:.-. :.~s 02 -'~ ..··.· 1 f 1 1· 1 r r 1 Eft P£2t rl.. 'I''. .on I "-::.t: : i -··~ .. ' ' 5' l' ·~ __ Okazaki fragmenti 5' : ..\ A <\ -' .'.. .l~ -~ >.(' .. .. .i .1plqc r~& . 011 . :. :.:r. 3' ONK POLIMERAZA Ill 5'--------~-s· ""3' '\ .3..t}l ..

e kao matrica.· a ostale· cetiri u nukleusu. :· .da je replikacija semidiskontinu. kao posledica uklanjanja prajmera. Ovaj prekid nestaje uz pomoc . enzinii ce samim tim morati da rade u suprotnim smerovima (slika 16). . ! ugradila i pryog nukleotida koji je ranije ugradila.strane enzima DNK polimeraze I koji se krece duz prajmera i zamenjuje jedan po jedan RNK nukleotid sa DNK nukleotidom. Zato se kai. . prekid izmedu zadnjeg. na koju ce DNK polimeraza Ill_ vrsiti dodavanje novih komplementarnih dezoksiribonukleotida. gama. Za replikaeiju se takode kai.raza.eGtida·. Gt S i G2 fazi. nuk.zato kompleks . koji formiraju socivaste strukture· (lens structure) (slika19).3'. 'Bitnq je naglasiti da sve ONK polimeraze imaju . .ckoga je . Drugi parentalni DNK polinukleotidni lanae ima smer 5' . 3'. 5 . Samokorigujuca'{proofreading) aktivnost se ogleda u tome sto DNK polimeraze ispravljaju sopstvene greske. 'Za' po!inukleotidni lanae koji ima srrier 3'. one raskidaju fo~fodiestarsku vezu i zamenjuju ga ispravnim. koji se posle spajaju u kontinualan lanae uz pomoc dejstva enzima ligaze. Zavrsetak replikacije prati problem replikacije krajeva DNK mOiekula koji se ogled a u skracivanju DNK molekula za odredeni broj nukleotida po svakoj replikaciji: E. se spreci ponovna spiralizacija i reorganizovanje heliksa. nakon svake replikacije dolazilo bi do skracivanja DNK heliksa. 9vi segmenti sintetisanih ribonukleotida na zaostajucem lancu nazivaju se prajmeri (pritner). Telomeraza dodaje na stari DNK lanae nukleotide prema RNK inatrici i na taj nacin ga produi:uje:.ustanovljeno postojanje pet vr~ta DNK polimeraza (alfa. Na ovaj lanae se prvo ugraduje · enzim primaza·. tRNK.. lanca sintetise male segmente ribonukleotida (slika 17). Kao produkt transkripcije mogu nastati iRNK. koji · slui. poliinerizadju nukleotidnih prekursora u novi lanae. · . enzima ligaze koji na mestu prekida stvara fosfodiestarsku vezu.ama naciena u mitohondrijaina.3' pravcu.5'.5' egzonukleaznu aktivnost {proofreading' activity). · · pokretanje ·DNK' polimeraze ~ Ill duz lanaca.5'. Takode je g zapazena proofreading aktivnost DNK polime.Repetitorijum . dok·kod ostalih celija organizma nisu aktivne.. tako sto se ve.e da je semidiskontinualna.5'. tenzitet transkripcije u Go fazi n izuzetno smanjen. · pa se ovaj lanae naziva zaostajuci lanae.replikacije_ kbd:eukariota su isti kao i kod prokariotskog modela. · Specificno je to ·da se kod eukariota nalazi· veliki broj oridi:ina replikadje. .alna.i u. ·a drugi u 3' .zuju za deo na starom :lancu ·(koji je ostao nerepliciran) i ugraduju nekoliko nukleotida uz pomoc RNK fragmenata kao matrice.ugradeni u novi lanae kao dNMP {dezoksiribonukleozid 5'-monofosfati)..e . koji.:s obzironi da je u okviru DNK heliksa jedan . Posto je na 5' kraju ni:rstala praznin·a (gap).'.. Treba naglasiti da je i.Telomerazna aktivnost Qa ovaj nacin obezbeduje konstantnu dui. pa time smanjuju verovatnocu javljanja greske na 10-1o(slika 18). s tim stq jedino DNK ponmeraza alta nema ovu aktivriosf 'Molekuli DNK eukariota su linearni. Transki-ipc. sto znaci sledece: enzimi koji omogucavaju odvijanje replikacije vrse svoju ulogt. sporije kod eukariota ~ nego: kod··prokariota:Ger:-prokariotski ·genom nije·asociran·sa histonskim proteinima): ·' . Skracivanje krajeva DNK molekula je jedan od uzroka celijskog starenja . vrse obnavljanje ovih praznina. pa se javlja specifica~ problem replikacije telomemih region a.:ga·meli i embrionalne celije). naziva se vodeci lanae. rRNK ili snRNK_. :ana ostavlja jednolancani . koji znatno usporavaju. koji dui. Nukleotidni 'prekursori predstavljaju slobodne molekule dNTP . beta. ce polimerizacijom u polinukleotidni lanae osloboditi dve fosfatne grupe (u obliku pirofosfata) i biti . pa: se . vezuje se enzim DNK polimeraza Ill koja katalizuje (ubrzava). jer je celija u toj fazi u stanju "mirovanja" i pokazuje mif!imalnu sintetsku aktivnost.n:iplikacione viljuske krece oko 10 puta . polinukleotidni lanae orijentisan u praveu 5' . U eukariotskim celijama je . Lanae na kome se kontinualno vrsi sinteza novog lanca uz pomoc DNK polimeraze Ill. · Replikacija DNK kod eukariota Osnovni inehanizmi .inu DNK molekula kod celija koje se dele tokom citavog i. vodecem laneu. epsilon) pri cemu je DNK polimeraza . .Hum ana genetika.nzimi telomera~e (koje :su aktivne u ranom embrionalnom periodu). na oba polinukleotidna lanca umecu se molekuli SSB (single-strand pinding) proteini. tako sto proveravaju poslednji ugradeni nukleotid i ukoliko je ugraden pogresan nukleotid (verovatnoca iznosi 10-7).ija . · 7. .3' i na tom lancu ce se sinteza novog vrsiti u suprotnom smeru od sinteze ~a. DNK polimeraza Ill iza prajmera. Kod eukariota se DNKteplikacija odvija znatn·o sporije zbog postojanja nukleozoma. . Nakon sto DNK polimeraza · zameni ceo prajmer sa DNK nukleot)dima. (dezoksiribonukleozid 5'-trifosfate). U toku celijskog c~klusa transkripcija se odvija u Go. Transkripcija predstavlja proces prenosenja nasledne informacije sa molekula·DNK na niolekul RNK. delta.ivota jedinke·(npr. . Medutim postoje i brojne razlike. Na zaostajucem lancu replikacija se vrsi u kratkim fragmentima (Okazakijevi fragmenti 1000-2000 nukleotida). Pre nego sto se izvrsi povezivanje Okazakijevih fragmenata prajmer je prethodno uklonjen od_.

..: . ~:. isecanje introna ... 1 : :. · hn RNK (primarni transkript) egzon 2 =t:n~ ·t::.. ..:.. __ A"'"... "' • .. 5' 3 . ! ... j '. egzon 2 ...Obr~dp'primarnog transkripta::: . : ·-~ :-. tcnd matrieni lana_c ONK . · RNK polimeraza 11 Slika 21 . :·.0 4~ ·. . :_.J ~t~1~.re-ta-m-RNK·r $1ika2~. transkripcija egzon 1 m 7 GpppN 1 i!!:f. !-.·..... _.. TF JIB .Formiranje inicijalnog transkripcionog kompleksa jedinica transkripcije egzon 1 intron f DNK 5' lider .es~_on_. · · ~ . .: . r!: OH .:::!flp:_i:J~~~...:~ ·: ·. ~ -· intron .. ...·•.. . egzon 1 ·.Z 1 :~.. AAAAA. ~. m 7 GPPPNI ...i :~7::· PROMOTOR TAT. egz~m..: . ...~ <~' ·~ ~· ... . ~! · .......Asocijacija tra11skripcionih faktora sa promotororn Slika 22 ..~·n~ ··!..:·· ·. · ·1._.' ~. .An-rr '"'" ' · · ··~- .. -.t! ..:-::.·. ~ .... .:·~.\.:...AAAA ATATTTT DNK TATA box t. :-.:-.-::~ \:1 : ( :.~r-:t.•.··. t~~Cf I poeetak transkripcije . egzon 2 3 !·: ·. .· .. .. r:·•::~~:.. · RNK polimeraza 11 ..•lil(..· · ·i. ~ . :· intron (Cap) 5· egzon 1 3' m.GpppN. intron 5' 3' pre-m RNK m 7 GpppN 1 ~ . ....·... -·-.: 3' .:··.. poly(A) rep · · . : .:·~i.. . ~... : -~. . ~ ."~·· <~-. IIF T ' 1 . ··'.. : •: "~~ ... . :~ .:.~...:. • ._ /"V"V'V"\ 3.·.:... .:c~~ . TF. ~. .: ! :~·-: .:!~t. ::! -:.~. ...::.. _·..k..·.'-z.._:••_·.· 5.. ~2./. + .A!-~ .~-· .~:~:..~·: 1·....

eukariota se odvija po istom modelu kojfjE? .t. Proees transkripeije zapocinje kao proees replikacij'e.:! Utvrdeno je da TATA box u_cestvuje upreeiznoj deterrilinaeiji ol<vira citanja DNK koda j samim tim preeiznosti sinte.':. .se: ·on· :u ..I... kontrolisana ·preko vise. . jer se i rad transkripcionih enzima vrsi u 5'. Prvo se vrsi dodavanje CAP strukture na 5':kraj pre-iRNK... ·zapocinje prates prepisivanja DNK nukleotida sa matricnog lanca u komplementame RNK nukleotide. ..: · · = Proees transkripcije. :~.'... ... a RNK polimeraza Ill za sintezu -l"f tRNK.. Kod rho-nezavisnih terminatora RNK moze sama da zavr5i proces transkripcije. .skripdje je ta sto se sinteza hovog lanea (u_~lucaju transkripcije RNK lanca). ·sekvence.. ./. .. . polyA.·· . ···:· a . ~- . ~Primarni transkript u svojoj . vrsi samo sa jednog lanca. dok. ·.~'.. Obrada primarnog transkripta · Kod prokariota je zapazeno da prlm~rni transkript odmah ul~zi uprqees:translacije.:pocinje:prepisivanje). . '.. DNK:sekvenei .jnicijaciju .vezuju '. ·.koje se nazivaju· regula~omi elementL... "!W Najbiiza promotorska sekvenca je TA.se v~zuje sigma-faktor.Humana genetika. . ce . .. elongacije· i terminacije lranskripcije . RNK polimeraza pripada . ·· < · ...··· ali. __ .::"':. · transkripcio~u ·viljusku. ·Ovaj faktor. modifiko. Ovakva prostoma· konfiguracija RNK Janca..identifikuje promotorsku sekveneu. Matricni lanae.terminatorske sekiiende . jer se kompletan enzim ·vezuje za promotorsku sekveneu. . Faza inicijacije. ne dolazi do skracivanja ili modifikovanja sekvenei.grupiholoenzima.::. CAP struktura predstavlja 7-metil guanozin koji se za 5' kraj pre-iRNK vezuje neuobicajenom 5'-5' :fosfodiestarskom vezom. transkri pci oh eda kto re.-:procesct·i'transkripcije•. nematricni lanae ima 5~ .· a fragmenti ·· spojiti u.: ·. Transkript ove sekvence gradi petlju. ·.: ·:::·::. tj.kodirajuce . :: --~ . · .b~-~. kao i kod prokariota..Repetitorijum Transkripcija kod ·prokariota. izvrsava je do kraja kodirajoce ~sekvem::e. rho::ravisni terminator. veze. ·-. o. Na taj nacin usled transkripcije. s·ekundarni tra~skript. odnosno predstavlja zrelu iRNK.. . Medutim..::>r· ·.ebni>:. .' destabilizuje kompleks DNK-RNK·i dovodi do terminacije proeesa·transkripcije~·· ·.5'..:rianskrlpcija:k~d:·eukanota •.- 8. topoizomeraza i helikaza koji prave· lens s'trukturu. · · -· · · ·-. B..3' praveu. . . . RNK lanea. 'POtr. Postoje tri vrste enzima koji vrse p'roces transkripcije.NK polimeraza se vezuje za promotorsko mesto koje se··nalazi uzvodno od kodirajuce sekveence (koja ce dati iRNK). ·tako:sto ce ·Se ·nekodirajuce~iseci J :odbaciti.nukleotida· adenina ·na ·DNK··.:.::·: . --:-.TA (5'-TATAAA-3') box i nalazi ·se ha oko 30 bp uzvodno od startnog mesta. nakon 7-9 sintetisanih ribonukleotida. ...~(povecanje) ·ili inhibicij~~(smanjenje) nivoa transkripsije.~. Primami tran.a isti··. · · · ·= · · : · Kao ·proizvod transkripcije ·dobija ?e RNK.····~--.nacin.:· amplifikaciju . · ·: :·· .skript drugacije· je.odakle. u. l<qji_poma~e da. koja se zavrsava sa sekveneom od vise uzastqpni~ nukleotida uracil a (transkribovana· sa vise uzastopnih . . kod eukariota neophodno ·je posttranskripciono obradivanje primamog transkripta i iseeanje introna k~?ji predstavljaju nekodirajuce sekvence (slika '23).· .subjediniee.. i uoceno 'je da mutacijom CAAT box-a dolazi do smanjenja nivoa transkripcije. ··'katia.RJgulatorni elementi·ir:naju ulogu da zctseber:· · · · .uzvodno od startnog ·mesta i za seb~ veiuju RNK polinierazu itranskripcione faktore (siike 21 i 22). sigma-faktor se disloeira od RNK polimeraze. _ima pravae 3'.rep). .:·'i ."· .na modelu Escherichiae coli . . Nakon sto transkripcija ude u fazu elongacije (kontinuirano cidvijanje proeesa).. viljuske (lens structure) uz .>".(egzone)'. kada naide na specifienu sekveneu koja se nalazi na 16-22 bp uzvodno od..3' pravae. Promotori su 'regulatome sekvence kcije. lj. za koje. take se DNK heliks iza nje ponovo spiralizuje. a to su RNK ·polimeraze I. koji . tzv... . lici na ukosnieu. . !· . Kontrola prekida transkripcije odvija se uz pomoc rho-faktora.koji'·~-·su. : ..:·. . Na_iug9ljeniia sekvenea_ od ~tC?rt.pomoC: erizima helikaze· ~oji ·raskida vodonicne . . RNK polimeraza s~ sastoji od 4 ... oznacen kao pre-iRNK i njegova 'obrada se yrsi u jedru. vidu· primamog· transkripta. matricnog !anea.. kod eukariota zapocinje n.procesu transkripcije (slika 20). ! ne ucestyuje u .. eukariota ·transkripeija ·je . 11 i Ill.:Ovi elementi nalaze se uzvbdno od . ..inieijacionog ·r:nesta.i nekodirajuce' (introne). Prvo ·erizlmi'DNK topoizomeraze vrse despiralizaciju i stvaranje transkripcian'e. · ...i. Kod . Nesto bliza · promotorska sekvenea je CAAT box kOja takode -Licestvuje ·u procesu stvaranja preinicijacionog komp'leksa '(RNK · ·· polimeraza i transkripcioni faktori). -udruzenim defovanjem en'zima DNK:. rrcrilazi ·na '"tem}inatursktl"'sekveneu (rho) ·t~ ovakav' ·mehaniz·am 'naziva ·sa . · ... Osnovna razlika izmedju repl!kacije .G) je GC .. ..se Rt':lK: polimeraza veze blizu startne tacke. Kako se RNK polimeraza pokrece (uz pomoc ATP) duz matricnog lanea DNK i za sobom ostavlja sintetisan RNK lanae. Nakon sto se formira transkripciona viljuska. Nakon stvaranja CAP 6 ..:za•.~e ··.:::..transk~pcije~(mesta.posttranskripcionom . koja.vanju svesti samo na kodirajuce sekvence.. se · nalaze .... ' .·sekvenci sadrii .. .'''"~:i::c ' objasnjen kod prokariota. dezoksiribonukleotida.: -~. RNK polimeraza I je zaduzena za sintezu rRNK. ·. rRegu Iatorn i-' -faktori<~~vrse ··· ·.. RNK polimeraza 11 za sintezu iRNK. kod. ako· postoji kontrolise transkripciju.:::~.i tran. .

. ·.. ~ aminokis~llna . - . ~olipeptid ·. . . : . · . ONK matricni lanae: ~.. .::-=... .. Slika 25. ~ - !. . .:.. antikodon Slika 24.·· :· ·• ::".. mRNK . . ~ ..-:-:-=. ..--::~-r.. . ' .: . : . RNK transkrlpt Egzon 1 (pr~-ryiRNK) : ....!~! ~ ~ _ ·kodon ~ .:. ·.--::t~z:aac-==- .. p •. : ·. --T!~ ..-.-·. : • ': Sllka 28 -Kompleks tRNK-aminokiseliria ·. Eg~ 2 • .::::.:--:"'. :.~ · .. _ ' _ -_ .... .Formiranje splajsozoma. : . '...:::. . ·~ ·kornponenle splajsozoma 1 iseceni intron •" mRNK ~- Egzon 1 Egzon 2 ..' _ ·..Transportna RNK .:..:· mRNK ~~::!ill ": ~~-... .. · -~ ... ...=..:.•.:. . •. ..:.:-..._ .• 5' .~ . .::::. 1 . ~ . ·.. r:.. •.

Nakon sto se izvrsi modifikacija · 5' i 3' krajeva pre-iRNK.. lspred inicijalnog kodona nalazi se mesto vezivanja ribozoma (RBS-ribosome binding sitt::t) .nu aminoacil-tRNK sintetazu Oednu ili vise).. cija je sekvenca AUG i kodira aminokiselinu metionin (Met).ice •.za Shine-Dafgamo sekvencu. . · 9. pri cemu GTP hidrolizuje u GDP. Uloga snRNP je da obezbedi da se isecanje (splicing) introna vrsi na tacno odred~nom mestu. Na ovaj kompleks se zatim vezuje 50S subjedinka ribozoma. potrebno je delovanje tRNK koja sa svojim antikodonom (koji je · komplementaran kodonu). ·· . Nakon sto se u procesu transkripcije polimerizuje oko 30 nukleotida vrsi se dodavanje metrilirane CAP (catabolicaly activated protein) strukture delovanjem capping enzima. ·-·. lnicijalni kompleks je sada potpun i sastoji · se od 30S subjedinice ribozoma.sekvenca k9ia. . Faza inicijacije zapocinje na startnom AUG kodonu. i modifikuje se dodavanjem 5'-CCA-3' sekvence na 3' kraj pre-tRNK · (i kod prokariota i kod eukariota).zasniva na povezivanju male i velike subjedinice ribozoma za iRNK.ie boqata . Takode pre-tRNK trpi niz drugih promena koje se odnose na modifikaciju ribonukleotida duz lanca. Ovaj proces vrsi se pomocu splajsozoma. Ovaj modifikovani oblik metionina do ribozoma dovodi inicijatorska (prva koja ulazi u proces) tRNK.. .~ koje ·doezbed'ctje··pr·avH~o ·orijent~. Faza inicijacije se ovim 7 . lntroni se iz pre-iRNK isecaju aktivnoscu nukleaza i shRNP i kao :takvi odbacuju. koja se. Translacija predstavlja proce~ sinteze polipeptida na osnovu i. a i pomaze u transportu zrele iRNK iz nukleusa do slobodnih riboioina ~. dok se egzoni spajaju u kontinuiran lanae kodirajucih sekvenci. ·CAP ·struktura je neophodna za pravilno vezivanje male i velike subjedinice ribozoma u procesu translacije. koja je determinisana za prenosenje metionina svojim 5'-UAC-3. i GTP.sa. je .nema formilacije meti6nina). Proces translacije omogucen je preciznim prenosenjem nasledne informacije. koji bi se sastojao od 40S i 60S subjedinice ribozoma i Met-tRNK. dalje se vrsi isecanje introna i povezivanje egzona u kontinuirani lanae. Oodavanje ove sekvence znacajno je za obezbedivanje pravilnog vezivanja aminokiselina u procesu njihovog transporta do ribozoma u translaciji. . sa aminokiselinom.. Ve.m~!e "subje9iP. koji predstavljaju ~ompleks pre-iRNK i snRNP (snRNK vezana za proteine) (slika 24).na modelu Escherichiae coli i . Susedni 3' kraj pre-iRNK niodifikuje se sintezom poliadenilatnog repa -(polyA tai~. praceno je i vezivanjem tri faktora inicijacije (pet fa~tora kod eukariota).DNKna RNK. da ne bi doslo do pogresnog ugradivanja aminokiseline u polipeptid. koja odlazi iz jedra u citoplazmu i nakon traflslacije daje !J9Iipeptid. antikodonom.c!toplazmi. G1.· ___________________ _________ ___. ivanje aminokiselina za tRNK omogucava enzim ' z · aminoacil-tRNK sintetaza ·(slika 28)..To _ mesto. Na peptidilnom mestu se nalazi tRNK koja je vezana za rastuci peptidni lanae. otpustaju se faktori inicijacije i nastaje 70S inicijalni kompleks (kod eukariota to bi bio 80S inicijalni kompleks. neophodno je da dode do inicijacije.Repetitorijum strukture vrsi se metilacija sa po jednom m'etil grupom na prva dva ribonukleotida primamog transkripta.fMet. Ceo kompleks oznacava se kao fMet-tRNK. · Translacija .. Da bi proces otpoceo. pri cemu se inicijalni mt?tionin (koji je kodiran od strane AUG).. Vezivanje male podjedinice (30S) ribozoma. u okviru ribozoma nalazi se i A (aminoacilni dzep) mesto na koje dolazi tRNK. . fMet (ima antikodon 5'-UAC-3'). Translacija se odvija u citoplazmi na slobodnim 80S (kod eukariota) ili 70S (kod prokariota) ribozomima. Primarni transkript pre-tRNK nastaje aktivnoscu enzima RNK polimeraze Ill.. jer sadrii formil-metlonin vezan za formil-metionin tRNK (tRNK. a njegovu formilaciju kasnije vr~j enzirn transformilaza. Ta sekvenca je komplementama sa regionom na rRNK ribozoma koji je bogat pirimidinima. GTP i fMet-tRNK. sto dovodi do formiranja specificne prostorne konfiguracije tRNK. Triplet nukleotida na DNK (kod). tri faktora inicijacije. Tok translacije kod prokariota . S i G2 fazi interfaze.anj~. modifikuje u formil-metionin (fMet) (slika 27).Met.a u cilju dobijanja adekvatnog polipeptidnog produkta. purinima (5'-UAAGGAGG-3') i naziva se Shine-Dalgarno sekvenca (ne postoji kod eukariota). Enzim poly (A) polimeraza dodaje nukleotide adenina: (50~250) uz pomoc ATP-a na 3' pre-iRNK. Svaka aniinokiselina ima specific.RNK matrice. Poliadenilatni rep omogucava stabilizaciju pre-iRNK na taj nacin sto je stlti od degradirajuceg delovanja ribonukleaza. fMet. pa se po principu komplementamosti sparuju. prepoznaje kodon i dovodi aminokiselinu koja je njim (kodonom) determiniscma (slike 25 i 26). Ovakvim nacinom abrade dobija se zrela iRNK. lnicijatorska tRNK se sada nalazi vezana za P (peptidilni dzep) mesto ribozoma. . je u proce~u transkripcije preveden u komplementaran triplet RNK nukleotida (kodon) na iRNK. koja podseca na trolisnu detelinu. Takode je znacajno naglasiti mehanizam posttranskripcionog modifikovanja pre-tRNK.. Da bi se prava aminokiselina ugradila u polipeptidni lanae. Proces translacije zapocil')je od inicijalnog start kod9na (na iRNK). tj: da se prilikom isecanja ne poremeti sekvenca egzona.tibozor:na . Metionin se prvo veze za tu tRNK._ Human a genetika .. Pored P mesta. i to u Go.fMet).

·!T .Cys.Ptwt.. Slika 32.. · • preraspodela · • poziciorii efekat heterohromatinizacija Slika 31 . :I ampll~kacija (umnozavanje) elimiriacija (gubitak) .. :. .J Slika 29. --~~:·: ·~ · -~ '· ~ • -i7' . ..-lol. ..Faza elongacije TERMINACI~A lAb..: ..-:· . .. .. Gly \ Ab. ·' .Tipovi regulacije genske ekspresije na nivou DNK .: histona 'l !:... . ' . ... .. Slika 30. ·.~·.. ·.· ~ ~-. . ··. .L•u....Asp. ·.Faza terminacije ··7'.: Regu/acija genske al<tivnosti (sinteze proteina) kad eukariota \. •. • Regufacija genske aktivnosti na nivou mo/ekula DNK hef"!'lij~ke modifikacije na nivou molekula DNK • na nivou transkripcije • na nivou post-transkripcione obrad~: · • na nivou translacije • na nivou post-translacijske abrade :.MM......oNK .• .:-:.V.....V J~ -T)'I~A*P :-Phe-L"'a. . :.Tyr.Tipovi regulacije genske ekspresije · :a . : i . ·..t faklor -·m · .

genetskog ·materijala. da je u' regionima ·aktivnih gena.: ~ .sa novom tRNK koja nasi aminokiselinu: Faza elongacije se u ova tri stupnja kontinuirano odvija. stop kodon.e stvaranje vise identicnih polipeptida. Na primer geni (specificno . zl~zdane celije) ili ostati u sastavu celije.·Medutim · ::. pri · cemu odlazi ·u cistemu granulisanog endoplazmaticnog retikuluma (GER) i tama·poprima .ukl~otida (slika 33).. Bitno je naglasiti da u toku prevodenja ·iRNK ·u polipeptid ucestvuje veliki broj.genomu postaju manje ili vise skloni ekspresiji.. ··: ' Regulacija genske ·aktivnosti maze se vrslti navise naciria (slika·31}:·Ti nacini se odnose·na·hemijske promene sa .odredenu . . tada zapoci. gena}.Hum2na aenetika . koja je. Time se postii.gulacija genske aktivnosti na niv. Za translociranje . · u . u. Take je uoceno. UGA). Ovaj vid regulacije uocen je kod valjkastih crva (Pseudocoe/omata) i nekih vrsta insekata.:od ·polrebe···za ne~im proteinom·'koji preihodno !Jlelil!. Amplifikacija gena podrazumeva da se odredene DNK sekvence nakon' replikacije nalaze u znatno vetem broju kopija. jer se koristi ista iRNK.ijevog kompleksa. .rcmi.ribozo.vrsi selektivna genska ekspresija: Euhrom~tin (djsperzan). nivoa transkripcije. .. .g~n. Kada se na A mestu nadje. Na primer kod rod a vodozemaca (Xenopus).{tRNK koja na svom 5'-CCA-3' kraju nasi kompletan polipeptid koji je u fazi elongacije sintetisan).· Pod 'pojmom hemijskih .(e~hromatin). Za stop kodone l'le postoje komplementarni antikodoni. . .e amin. Postoji veliki broj... .tra~slacijom preveden u . ·Acetilacijom ili· fosforilacijom histonskih proteina. ' 8 . molekulu :podraztJmeva :se dodavanje alkil grupa ·{metil..· vrsi se ·njihovo odvajanje .oki~eline. Time dolazi do raskidanja veze izmedu tRNK i polipeptida.·. :. . Tr~ci stupanj predstavlja translociranje (pomeranje) ribozoma 'za jedan kodon duz iRNK.1)-globinske lance hemoglobina·u jedrima centralnih neurona su 100% metilisani. polizomi).Recetitoriium zavrsava. tj.utice na steperi ekspresije gena.:tako:da·selektivna meblacija·predstavlja model regulacije. dodaje vodu na . efekat) se odnosi na pojavu da odredeni geni menjajuci svoju poziciju u . ~ dru~qm stupnju. . pozicioni ··· . .oiavanje). Stvaranje peptidne veze katalizuje enzim peptidil~transyeraza. Sada se upraznjeno A mesto pon~vo puni. . a za njih se dir~ktno vezuje faktor terminacije translacije koji je proteinske prirode. U prvom stupnju dolazi do vezivanja nave tRNK za slobodno A mesto u ribozomu. koja je sama Ger je ugradila aminokiselinu u polipeptidni lanae) otpusta. umesto amino grupe. dolazi do pojaeavanja aktivnosti g~ria.obliki hemijsku prirodu. · : efekat {E)romenu polozaja· gena) i heterohromatinizaciju:(slika· 32).tR~K sa f:.. Razlicita tkiva poseduju .od DNK.· ·.okviru DNK'n.' ·. prelazi heterohromatin (kondenzovan). ribozoma (poliribozomi tj.Ii ce odredeni gen biti aktivan ili ne i kada ce· se vr5iti.CHJ)::azotnim:bazama. .. · . nego u parentalnom DNK lancu. podrazumeva s~ da 1i ce taj gen · · -·~··:. Ukoliko se histonima adiraju funkcionalne grupe (acetil. Ova pojava je· narocito znacajna za diferencijaciju celija plazmocita koje produkuju antitela. hromatin disperzan . da·taj prot~in sinte~su. Nastali polipeptid ..polipeptid ·ilL sa mer transkripcijom u.· . dospela na A polozaj preko tRNK.finalnr .vrstu ·. ·. fosfo). kodira. . samom D~K molekulu. dodatnom spiralizacijom {superspiializacijom)' koju omogucavaju proteini {histoni) koji se na odredeni nacin vezuju za DNK .' podleze posttranslacionoj niodifikaciji. DNK blastome~ je na ranim stupr:Jjevima brazdanja (dq osmocelijskog stadijuma 100% metilirana. koje postaju aktivni u oogenezi.nje faza tenninacije {slika 30). .ou ·molekula DNK .· pana taj naCin mogu u odredenom momentu. 10. . dok ribozom ne naide na jedan ad stop koqona (UAG. pri cemu se . medutim nema podataka da je zabelezen kod sisara. Oni se obicno nalaze na udaljenosti od 80-100 bp ribonukleotida. obe subjedinice ribozoma napustaju. Hemijska modifikacija histona. Re. U toku razvoja maze doci do selektivne amplifikacije gena u odredenim tkivima ili celijama. citozin u okviru gena) za..ma neophodna je energija koja se stvara hidrolizom GTP u GDP i a~tivnoscu enzima translokaze: Tada se: tRNK h~ P mestu.. . dok je kod neaktivnih gena uocen kondenzovan hromatin {!leterohrom~tin).vr5e eliminaciju metil grupa). mesta.. u : zavisilosq·. Pod pojmom geriska ekspresija {a~~vnqs~. Elongacija obuhvata tri stupnja.RNK. izlueen_van celije (npr.iRNK i time se proces translacije zavrsava.cinilaca koji uticu na to da . Sledeca faza translacije je elongacija (slika 29).. ..·aktivacija ili inaktivacija odredenog gena. ·u dodt~ma je zapaiena amplifikacija gena za rRNK. Metilacijom ·azotnih baza u okviru gena postiie se njegova inaktivacija (gene silencing).peptidil-tRNK .' specifrcne enzime :demetilaze (koji. eliminaciju (gu~itak) ili amplifikaciju •{urim. a potom nastupa demetilacija i pocinje diferencijacija celija: Eliminacija geiia predstavlja pojavu da se odredeni deo genetskog materijala gubi i.' predstavlja jedan:od mehanizama regufacije genske ekspresije. · · . tada enzim peptidil-transferaza {koji je do tada katalizovao stvaranje peptidnih · veza). Preraspodela ·gena (pozicioni.. · • . . protein maze bjti egzocitozom uz pomoc Goldi.·.. ·.·promena na DNK . pa na taj nacin DNK heliks postaje pristupacan za prevodenje u RNK. . :' · ·. se stvara prva peptidna veza izmedu karboksilne (-COOH) grupe metionina i amino (~NH2) grupe nov. Kao takav. UAA.· a na' njen6 mesto dolazi . · · ·~ ·p'ioces metilaGijeje reveiZibilari.biti transkripcijom i .' Heterohromatiriizacija je kondenzacija hromatina. (nastaju nukleozomi)..

0 ~..' .. :· .. ~- ··.}:j.. .:.. . .. ... ~. .:. o...: ·"·· . :· . tri· . . .· :'!-~---- ~ACETILACJJA. ~:-~: . :~. ' FOSFORILACJJA METILACIJA ·_. _-:-· _i. :. .¥~#.:. t.• .' . :_~ -' - . "·........ .... .":. Hemijske modifikacijeii::-~... ~ ...t]idJ.: .f-:H Slika 33 ~ Putevi hemijske modifikacije DNK i histona ~ 0. · • modifikacije ......~. .. .. CITOZJNA . .. : .~ ...·•· . . • modifikacije .·' · 3 0c~ . . .. . .... ·:-~"": DNK:. . :.:• 0 •• :'o ... . . ··. --:~. ' · .. ..fiji· . :.... . . . :! ...·. ·..histona: .-:·._":·:. -· • • • • • • .. ·:· . : : . :!:'!' ·: :!·-~_ . ···' .: .. ...(:.I. : smetl-~ . :...:·.:. ' .·. .. . . ..._~! -_ .: ~ · ·\.: • • • u ... . . .:·.. .\":.. . . . ~ . ..j . ·· METIUAQIJA: -~' :..... ·. . . ::· ~< :.._: ••..:·· :: ... ... · ".... ' . .. ··DNK i histona · -~0'.

koji kada nagrade kompleks sa ?ktJvatorsklm ~ole~ull~a •. kao i neki od brojnih transkripcionih faktora. Postoji-oko? proteina koji. . zatim CMT box i najblize. 11. . On se nalazi uzvodno od gena i sastoji se od nekoliko vrsta sekvenci.:i Prema postulatima Britten~a i Oavidson-a. ~ RE~ ·elementi su od naroeitog znacaja u procesima embrionalnih indukcija i diferencijacije celija. : Pod pojmom .dojke doda luteotropni hormon (lTH9 . promotora. do . Prema hemiJSkOJ pnrod1 akbvatorsk1 molekuh mogu blt1 prote1n11h iRNK-aktivatorni molekul. genu integratoru (GI). Gl se aktivira tako sto se razne indukcione supstance (iz celije ili okolnog tkiva).3tnog repa na 3' kraju primarnog transkripta . faktori rastenj~. Najdalje od kodirajuceg region a nalazi se GC box.su. Drug a klasa ge~_a su gen~ ·receptori (RG). I • • . ali se mogu naci i u okviru kodirajuceg dela gena. Tada senzomi gen aktivira gen integrator. Oni omogucavaju dovodenje HNK polimeraze ll (koja sintetise ·~ iRNK). Ill). kod eukariota postoje cetiri klase gena. lj. a uz pomoc snRNP dolazi do iskrajanja introna (nekodirajucih sekvenci) i lepljenja egzona. . Drug a grupa cis-elemenata su pojacivaci (enhancers) transkripcije· Oni se ':najtesce nalaze uz\. Treca grupa cis-elemenata su REs·: (responsible elemimts) :elementi. . a to su TF 11 (A.me~anizmi stabilizacije iRNK i kao primer se navodi stabilizacija hormonima. kodirajucem tegionu nalazi se TATA box. razlikuju od pojacivaca jedino .opsti transkripcioni faktori i deluju na RNK polimerazu 11. pri cemu pojacavaju intenzitet transkripcije. i"njeno vezivanje za promotorske boksove · (GC. pri cemu se primarni transkript znacajno skracuje i ·prelazi u zrelu iBNK. senzornog gena {SG). hormoni. Na ovaj nacin se pojacava ekspresija specificnog gena. · indukcije sa odgovarajucim hemijskim signalima (molekulima).Humana genetika .o?~~ nisu bili aktivni. CMT. Nakon njihovog . TATA). i deluju tako sto pojacavaju intenzitet transkripcije. Prisustvo opstih .. koji se aktivira fosforilacijom preko ATP i zapocinje transkripciju. . Regulacija genske aktivnosti na nivou post-transkripcije Nakon sinteze iRNK. . B. Prva klasa su geni produktori {GP). Jrans-elementi' su podeljent i prema prostomoj konfiguraciji molekula u cetiri klase. na: cijoj m~trici se sintetise iRNK i sekvenc~ ovih ·~en a cine ~!ngl~ s~~v~nce. • . Poznati su .. F. interferoni). E. Da bi se gen integrator aktivirao. faktori su precizno deterrriinisani za . H i J).trans-elemenata podrazum~va·. zavisi od aktivnosti gena produktora.. vezuju za senzorni gen.odno ad gena u sastavu . a to su opsti. Zrela iRNK koja ucestvuje u procesu translacije je jako labilan molekul i podlozan raigradnji. . ali i za PIK. REs elementi se. Ovaj kompleks gena predstavlja komplikovanu kaskadu procesa.transkripcionih faktor<Lustanovljeno je u svim tipovima eukariotskih celija. U cis-elemente spadaju specificne sekvence koje omogucavaju i modulisu gensku ekspresiju. Specificni transkripcioni.vezivanja za RNK polimeraiu 11 na promotorskom mestu. akti~lraJU g~ne prod~ktore k~J~ preth. ali se celije medusobno razlikuju i diferenciraju zbog intenziteta transkripcije gena specificnih za te celije. · vise·grupa transkripcionih . lnducibilni faktori se vezuju za REs elemente. "cinkovi prsti"~"tinc fingers" (riletalo-proteini koji sadr:Ze dvovalentne jone cinka i u regionu koji se vezlije za DNK obrazuju pr5tolike tvorevine). "zavojnica-petlja-zavojnica"-"he/ix-/oop-he/i. ·regulatomih· proteina koji · ~e kontrolisu inicijaciju transkripcije. stvara se preinicijacioni kompleks ·(PIK). neophodno je prisustvo cetvrte klase gena. Pod obradom krajeva se podrazumeva dodavanje CAP strukture na 5' kraj i sinteza poliadenil. U klasu inducibilnih transkripcionih faktor~ spadaju regulatorni proteini koji moraju da · budu aktivirani delovanjem hormona ili nekog drugog molekula. I .sio wse pojacavanje transkripcije.Repetitorijum 11.odredemi tip ·celije.· Postoje·tri grupe· transkripcionih faktora. Promotor predstavlja mesto za koje ce se vezati neka od RNK polimeraza (1. Ovaj tip faktora vezuje se za poja~ivace. dolazi do njene modifikacije. Njihova u)oga je pojacavanje intenziteta transkripcije i sinteze iRNK. .DNK-+"hefix-turn-he/ix"). D. koje po hemijskoj prirodi mogu biti peptidi. pri cemu stepen aktivacije gena. abrade k·rajeva i isecanja introna. Regulacija genske aktivnosti n_ nivou transkrip~ije . Prva grupa cis-elemenata su promotorske sekvence.u tome .niod identicnih regiona koji se vezuju za . jer su vezani za histonske proteine . REs elementi su odredene sekvence koje odgovaraju na prisustvo signata· (hormoni. ..: ~- . kao i za odredeni deo zivotnog ciklusa.promotota . To su transkripcioni faktorisa homeodomenom (sastavlje. a . tj. ' . · Prema danasnjim :gledistima u kontroli ekspresije gena ucestvuju delovi molekula DNK (cis-elementi) i transkripcioni faktori (trans-elementi). . . cAMP itd. .x" (vezuju se za DNK sa delom koji podseca na _ zavojnicu) i "leucinski rMsferslus"-+"leucine zipper" (sadr:Ze veliku kolicinu leucina ikao polimeri se zatvarajusli9no rajsfersiUS\J i na taj nacin vezuju za DNK). Taj iRNK aktivatorni molek_ul se sintetis~ ·na treeoj klasi gena. U procesu splajsovanja.. 12. Gl sintetise iRNK-aktivatorni molekul (AM). fiziolosko ili patolosko stanje.faktora. Veliki broj gena kod eukariota je transkripciono aktivan. . Kada se in vitro kulturi zlezda~ih c~lija . specificni i inducibilni faktori. vrsi aktivaciju gena produktora. tek nakon •. koji locira receptorski gen i vezujuci se za njega. koji su po hemijskoj prirodi proteini.

: · : .-.-:--r. . ~-··· · . · . · • ·~ .. ... :. . .~l...Opsta svojstva genskih mutacija ... ..l~·~~. ··. :· · · ... . · -.1 TR~:. .~r=....I . ~~ -~ '• . .. ..Ef~kat genskih mutacija na feriotip ~maat~~ ... ~:~ ~-: DNK ·. .. ~ Slik~ 3S~. Slika 34.E1 ..ti: .• ·· ·· ....J..'· . . · ·:·· ..s1p~yENCI . Slika ~~- ~aktori koji uticu ~a biodivei'Zitet .. .E··.. ~ ~ .. . .·~Nf. .P:~oM~N..:..

·.
.· · Human a genetika - Repetitorijum
. . .

.

·-·-··--

· -~~· -·;:

.

. prolaktin), on deluje tako sto akti~ira sintezu kazeina, glavnog proteina mleka. Nakon dodavanja prolaktina, zabelezena je oko 100 puta veta kolicina kazeina,_ .n~go kod _ ~el!ja koje nisu_tretirane hormonom. Oodavanje istih prolaktina, delovalo je .tako sto je tri puta povecana transkripcija gena za kazein; sto" nije u korelaciji sa kolicinom produkov~nog proteina. Zakljucak je da su iRNK u prisustvu prolaktina 'stabilizov~ne i da su mogle duze da se koriste u procesu transla.cije. U procesu translapije otkriveno je vise.. regulatomih mehanizama, koji ucestvuju u odredivanju intenziteta genske ekspresije. Regulatijom translacije moze da- se vrs! sele~cija iRNK na cijem modelu te se sintetisati polipeptid. Nakon sto je polipeptid sintetisan dolazi do rjegovog posttranslacionog obradivanja . .Ova vrsta obrade odnosi se na hemijske i geonietrijske {konfo'rfnacione)promerie molekula koje obezbeduju specijalizaciju ·njegove funkcije.''Kao · prime~:- navodi se · obrada ·· primamog .: ]anca ··preproinsulina · (prekursora insulina). lzmolekulapreproinsulina:moraju .da se-eliminisu 23.aminokiseline da bi presao u molekul proinsulina. Proinsulin se sastoji od tri lanca (A, 8, C) i da bi presao u aktivnu formu insulina, neophbdno je da mu se prethodno eliminise C lanae. · · .. · · Regulacija sinteze proteina ne zavrsava se ovde: Stvoreni proteini mogu se koristiti ili odmah razgraditi u zavisnosti od trenutnih ~potreba . celije; 'njenog..metabolickog: pqtencijala i potreba..~rganizma u celini. .Brojni drugi faktori nakon toga odlucuju o sudbini proizvedenih'proteina: Na primer, neki proteini da bi mogli da se transportuju dalje moraju da se vezuju za specificne transportere. Ako ih nema proteini ce odmah podleci dezintegraciji. Stvaranje i razlaganje bilo koje materije u celiji naziva se turn-over. ·

'13.1ipovi genskih mutacija
. . .
~- -

. . :.

·~·

.
•". · 1 ·

Mutacije predstavljaju promene u genet.s~qf-!l ril_a}?_rij~h._!,Za·-razlik~;od _ rekoJ'!lbiQacija koje 'oznacavaju samo -razmenu, kombinovanje postojeceg nash~dno~fs~·~rzaj~'(sllka;34)~~,-~,;t-;-<;,~;,~~,l;,,;;,;,;".,_ . :. · . . . .·.. · . . ·· ·Mutacije ·su izvor novih gena, pri eemu mogu bi~ stetne:po·orgaqiza01.;(obolje_nja),ili.korisne (znatno.:rede) za evoluciju • - _ nastanak ·.•. .~~~·:· ·· · vrste ·'(slika ·-35):' Jecina -od teorija ;specija~i)e}:j~ J~~(rJ~J~.4}:Jili.ita_~lje:;.uslo'{iiet()groman.~ biodiverzitet::i • novih vrsta (slika .36):.Ukoliko se ·na .divljem _{normalnom1~prv6~tv~ienorii.f9enri;ikoji je .siroko·iasprostranjen •· :.:,· ::,_ . · ... · u prirodi) genu dogodi mutacija i pri tome .on ~pred~ ·unovLgeii;·~takvamutadja~se·:oznacava kao direktna. Ova • :- · promena je reverzibilna, ali je,njena frek\fencijaznatnQ .rrianjapdJrekvencije.:-di[ektnih mutacija; Jedna od klasifikacija > ,,-. · mutacija odnosi se na tip celija ·!J :kojiiri_(()~~::ria_st~ju ~(~l!k~-:~!) :?;fako;:s~:3prna.tske ·.-rnutacije nd nose .na'one ·mutacije :• koj~ su nastale . · telesnim celijamcfmekog-·6rgariiziria;:qca'6:-:takv· :ne1·prenose :se' ila potomstvo.U tom slucaju . ·· u e .. . organizam,.-nosilac •.somatske~mutacije;jef·.rno~~ik~{uk91iko.ose ,:s()r:na.ska ,.Jllutacija ,dogodi ·:U embrionalnom .. t . . pe ~iod_u );'je r:jed na ,celijska i~i~ija:¥~~~-: rn.~fa<;!j~rf#;d~g~i~ne :jK,aocnaj~igfedniji ~primer, rnutacionog ,mozaicizma;' ~ :' -. za',;bojti: ,ociju~;mo~ejrrfati;~u ;<luzici 'smedi .i pia vi pigment,-: ili: . . , ··, ·: , navodi ~e J)oja :ocijli .kodi;ooveka:-:'Coyeld<ojkje:;mqzajk'z m ·• ·.moze'.imati:oci-razliCitih boja.--U~oliko je·mutadja:lokalizovana:u germinativni_ celijama, onda ·se on a uvek prenosi na . potomstvo i oznacava s8,· ~~9·9~,r.Tr,l!.~.Ci!iY[l.~ ,VJ.~Ja~ij~~:i;()v,e;_!!J.~!~cij~;-!,l~,~,taj~}JPfl?C~Su gametogenezE;! i znacajne su . _ .. . sa ~;v.oJu,tivoe _ e. gle~ista,,_·p~s '~bo~f.r~D9~~~utacije ;;~? ; ou91JC~-:fi~.E!Ff1cije~.¥5!fuili.m.tr~~ mczaic! _ tack .mogtL d? _ _ . nastanu i --~ - toku 'rane .embnogeneze - kada~: za'.p6sledici.J rriogu1mati :·abribrmalni .,f~notip, ~indrome i1i sindrome sa ,,:_ . . . ..ublazenom :tenotipskom simptomatologijom. Kliri!cka s!ika takvih pacijenata .zavisi direktno od celijskih linija .koje stf . ·_ · c zahvacene· mutacijana; . odnosry~:-P?stei,de~~-i iljutacija..,: ~oy~~m~~Qll~~~J~~-C.~,::~, ~,!~P~-JTay-Sachsova bolest), ·._ ·. ·· subletalne•(hemofilija) ' iti_' reae·,~ijabifnejmozaicizam~za':,boN;.~ij4)~:;f~fk~d~; se : ~nogu- podeliti na domiilantne (nasledena od jedrlOg roditelja, jedna'gamitura mtitiri:u16g gena:··ispoljavajii'se'tiheterozigotnom obliku) i recesivne .(~asl~d~ne qd oba ro,ditelja, ·dve 9an:Jit~re fl:!Utiranih gena, isp~ljayaju se u homozigotnon1 obliku) mutacije~ Mutacije ... "._ mogu)ezultovati tizickirn:ili hemij~~im limenar),a _: ~ien.efickOg ·iflatelijala:;\U:iavl.s'ri_~st(od :velicin·e·;oNk:zahvacene' .mut~cijom i/Hi intenzitetom' p()s(edica ' date:'lfnitaclj~;-~ 6ne~mogh;iia:btidu1~pod,eljeni:na :·genske :(mikrolezije}.:i ; ,,: ;-.;·. •: .. hromozomske (makrolezij.e)mutacije ·<·:,;·~;;.~ .;: ~i,;,::.<:.~:;·g~·:'t"Jc;,.;c:,#?,J:~~! :::::-r:t::s,~":;f.,~i~''~v(;'l:~x~· :.;- .:· ·, .· :.;. . , · : --.. . . ' ·:·· · .Generalno gledano mutacije ·mogu d~ dov~d~ d·o;sintei~~'iz~~~}~n6~;-~ ~~t;~:n6~~~f~n~cio.naln6.9 ;rot~ina -~·,·'•:::,:. .krajnjoj liniji z· ustavljaju sintezu proteina.:'Genetske greske:mogu .biti"sup~titucije;·. delecije ili insercije. ·. :·· ,, ,·.. •. ·:~·:, . a Slipstitucije su one mutacije koje se karakterisu · amenom 'jednog bainog.:para nukleotida :drugim.: Supstitucije se . z mogu dogoditi po tipu tranzicije i transve!f:ije ·{siika 38). Trarizicija :je ·.oblik.supstitucije;· kod koje dolazi za~ene purina, · purinom _ (A-G ili G-A) ili ·pirimidina_ pidmidinom· (C~T ili T~C). Tranverzija je oblik supstitucije, kod koje dolazi do zamene' pt.iriria pirimidinom {A___;T, G-T, A-c, G-C) ili pirimidina purinom .(T-A, T-G,C~A, C~G). Bazne supstitt.i'cije se klasifikuju'i_ prema fenotipskoni efektu {aminokiselinskoj sekv_enci i.r polipeptidu} koji uzrokuju i 'mogu biti ·misens, · n~risens, neu.tralne i tihe. Misens . (missense) mutacije su one koje dovode do ugradivanja pogresne aminok_iseli_e u polip.eptid, Nonsens (nonsense) mutacije se n
. y .

.. ~ . .· · . '· < ·...'. ·

::_. ·_.-:_:~.: -:,._, : : .~ ::, :.·

.. ···.··:· ..

·:

.m:u

··-

do .

10

.~ ...
·: ·

,..

' ~

:·.

.

.. ; ,.

~

':..:

.. -...... ·, ..-, .... ~ ..

·l-

..

..

~8~~- . .

.,._

•'

1 ::.: . - ~

-~

.·· :

..

.-:~·

.;

':•'·:

: t-

--~~-:~
_ ..:..]j,'
""~.:.:_

..,;"

....,~

fh(,~

~~·:.r:
'•.
- ,~

Slika 38 - Klasifikacija point-mutacija
-.I;
i:
:"'!

.'

..·.!

: ;

.· :-

·: .'

. .·:

·,

Human a genetika- Repetitorijum javljaju kada se mutiran kod za odredenu aminokiselinu, transkribuje u jedan od stop kodona (UAA, UAG, UGA). Ovakav tip mutacija dovodi do prerane terminacije transkripcije i uzrokuje sintezu kraceg polipeptida, pri cemu duzina polipeptida zavisi od mesta na kome je stop kodon lokalizovan. Ukoliko mutacija dovede do izmene kodona, prf cemu se aminokiselina, zamenjuje sa aminokiselinom vrlo slicne hemijske prirode (Leu-l-lleu ili Lys-l-Arg) onda se govori o neutralnim (neutra~ mutacijama. S obzirom qa su supstituisane aminokiseline vrlo slicne hemijske prirode, ova izmena nedovodi do promena funkcije polipeptida~ Tihe (silenQ mutacije podrazumevaju promenu koja dovodi do remecenja sekvence kodona, ali se kodira ista aminokiselina. Ukoliko za primer posmatramo da je kod za lizin 3'-TTI-5', i ako dodje do silent mutacije na ovoni kodu pri cemu ce se modifikovati treci bazni par u 3'-TTC-5', po tipu tranzicije, opet ce se ugraditi ista aminokiselina u polipeptid. Delecije su genske mutacije koje dovode do gubitka nukleotida, pri cemu se remeti sekvenca gena. Frameshift mutacija uslovljava pomeren okvir citanja i dezintegraciju kompletne sekvence aminokiselina u polipeptidu. Kod insercija dolazi do umetanja jednog ili vise nukleotida u sekvencu gena. I insercija ce uzrokovati frameshift mutaciju, jer se time gubi okvir kodirajuce sekvence divljeg gena. Posledica insercije ili delecije je sinteza nefunkcionalnog proteina.

14. Mutageni
Stopa mutabilnosti kod coveka iznosi oko 10-10. Mutacije su spontane i mogu biti indukovane faktorima sredine i nastaju i pored dejstva repair-mehanizama (mehanizami popravke). Faktori (agensi) sredine koji mogu biti fizickdg;·hemijs'kogilibioiosko!:r pcfre'kia,--:nnogu·prouzrokovati mutacije, nazivajuse mutageni. Uocena je pojava da purinske i pirimidinske baze postoje u oblikuketq-enolnih izomera (tautomerija). To znaci da citozin i adenin na polozaju 6 sadrie amino (-NH2) grupu, koja moze preci u imino ( -NH-) grupu, dok kod guanina i timina koji na polozaju 6 sadrie keto grupu moze doci do izomerizacije u enolnu grupu. Posledice tautomerije se ogledaju u toku replikacije, kada dolazi do neadekvatnog sparivanja azotnih baza, i stvaranja mutacije po tipu supstitucije. ; · Fizicki mutageni koji su najcesce jonizujuca zracenja koja mogu biti talasne (X"zraci, gama-zraci) ili cesticne (elektroni, alfa-zraci, neutroni, pozitroni) prirode. Jonizujuca zracenja deluju tako sto usled velike kolicine energije koju poseduju, jonizuju molekule, pretvarajuci ih u slobodne radikale (visoko reaktivne cestice), koji prouzrokuju ostecenja DNK molekula. Ta ostecenja indu~uju greske pri sparivanju baza u toku replikacije; sto uzrokuje baznu supstituciju. Takode mogu .izazvati raskidarije:estarskih veza (izmedju ·secera i fosforne kiseline), stvarati prekide na DNK molekulu i onemoguciti ekspresiju gena (transkripciju) .. UV-zracenje koje nije jonizujuce prirode spada u klasu fizickih mutagen a. Ono deluje na celije epidermis~a ·Gerima malu prodornu moc) i na nivou DNK tih celija izaziva · stvaranje. pirimidinskih dimera (dimeri timina), tako sto slabi dvostruku. vezu izmedu cetvrtog i petog C-atoma timina, omogucavajuci..stvaranje dimera izmedu. dva ·susedna .timina,. umesto ·komplementarnog vezivanja sa nasuprotnim. DNK lancem: Osobina dimera· timina je da zbog stvaranja ·praznine (gap) sprecavaju replikaciju DNK i dovode do . p.ogr£:..,SO.OQ.$pari:v:a(lja_baza. U. slu.ca.iu'citozina naisl91TJ:POioz~ju dolazi do hidratacije, pa nastali produkt nije u stanju da uspostavi vodonicne veze sa guaninom, pa se DNK heliks despiralizuje. ·Visoka temperatur<fkiaslfikuje· se i<ao · fizicki mutagen, sto se eesto zanemaruje. Vazno je napomenuti da prilikom suncanja izlozeni deo koze pocinje da trpi ostecenja nakon jedan minut. Medutim jos je vaznije. istaci da mehanizmi. opravke .stupaju· u dejstvo nepos red no nakon toga, tako da konacno DNK ne trpi bitna ostecenja izuzev, ako nije koza izlozeria iiuzetno jakim i dugotrajnim UV zracima. Posebno kozakoja ima dosta melanina ima i bolji odbrambeni mehanizam protiv suncanja. Hemijski mutageni imaju tri nacina delovanja: transformacija baza, ugradivanje analognih (slicnih) baza u toku replikacije kao i umetanje akridinskih boja u sekvencu DNK molekula. · Najpoznatiji hemijski mutagen koji vrsi bazmi transformaciju je azotasta kiselina (HN02) i vrlo je snazan mutagen. Deluje tako sto transformise aden in iz amino u imino tautomerni oblik. Adenin se u ovoj situaciji transformise u hipoksantin, koji je komplementaran sa ·citoziriom (ugradice se za vrenie replikacije) i ovom prilikom doci ce do supstitucije po tipu transverzije {A-l-C). Po istom principu· deluje i etil-metil-sulfonat, koji transformise guanin u etil-guanin. Etil-guanin je komplementaran sa timinom, pa ce se u toku replikacije naspram njega ugraditi timin, a nakon druge replikacije, naspram timina adenin: I u ovom slucaju susrece se bazna supstitucija po tipu transverzije. Hipoksantin je poznat kao jedan od faktora ubrzanog starenja. Uoceno je da osobe sa prirodno visim nivoom hipoksantina u proseku krace zive. Dobra je stvar, sto se na nivo hipoksantina ipak moze uticati farmakodinamicima. Mutageni koji su po hemijskoj prirodi vrlo nalik nekoj azotnoj bazi' (analogi azotnih baza), mogu se ugraditi u toku replikacije na mesto normalne baze. Anal,ogne baze se pogre.sno ,sparuju i na taj nacin povecavaju stepen

11

I,

.. .:-... .·. . : Sfika 42 ~ Ekscizion·a reparacija · !:~'=: ro. : ~~.. ·..a cija ( fotorcaktivira)uci enzim) ·... . !. nr-!i<~r~toliaia .c .. ~ 'C ! ..9 .-. t.· .•. . l::l' . .. .. ~ · N ·.• _~.~ 4 VT•....H 0id 0 ~· '6' p0 oD o o p 0 o fl' "] J• 5' ' ·. ___ . ·. N-11 =o c CH _. CH.She ma reparacije pirimidinskog dim era lSECANJE BAZA :..·. (· H 0 . DIMER TIMli'iA : ~· -·· ·· · .i Slika 41.... r~ DIREKTNA (IN SITU) REPARACIJA Fotorcaktiv.: ~l ~ =0 Ill REPARACIJA POSLE REPL1KACIJE · + "Mismatch" reparacija +..· ··. .. o"· : (' ...~· ·· '" ' + 11 Dealkilacija lsecanjem baza (alkiltransferaza) ~ 1 REPARACIJA PRE REPLIKACIJE + + lsecanjem nukleotida : ~ ':>: · ..: · .J?N~J .-~~ ~-· -·~ }j '\ ~: timin " .Ce nuklootid 'ispru.. . . " i'i-11 SOS Slika 39 . .:.. tlmm .. .·· ... -· . m· . 0 ' P9r'....• .r . !. ' .J !l"J :• 0 .ruje o~~ lig>za .... + :· ...... .... ·rsocanje n~kl•otid• .g~_8l~] -~· B. .• _· ..-·$~:8 -~_. ... : .Tipovi reparacije DNK molekula Slika 40 ... c::l ~JEHANlZM~_ REPARACI.~:. ..•·. _i.. ..·..·:. ~: UY Zl'accnje .. · 6· '''t"•O"!Jll_ ' 0 . .. ..C···.· · · .. '? ..~ ] ..... ·...""" " ~L..C . •.. . . . 01\1-: ~olim•ruzo um....:. ib'. . l. ' CD oc· L. ·· ··· . .:..~""'··-:_ ·-~i·. ...: .~~. ....~ ... ·.- +- N<:=:<>=o 0 11 Cll..Rekombinativna rcparacija .··'d....TE .. • :. . · )-J\N§.·~n p$.:·'_·. .E~:f~.ffi' .'·_.PPo o 8 Jr.~J ~ i!..1· -r~· .Strukturna formula pirimidinskog dimera ---~ OIREKTNA REPARACIJA PlRJ i\110INSKJH DIMERA .

koji se vezuje za UvrA-UvrB kompleks. yrsr p_otr~gu 'za distorzivnim lezijama (ostecenjima) i nakon sto je pronade vrsi isecanje fosfodiestars. koja blokira replikaciju i ekspresiju gena (transkripciju). pri cemu se citozin transfonmise u uraciL Frekvencija deaminacije citozina izr10si oko 100 baza po genomu dnevno. Ovaj gap se popunjava udruzenorh aktivnoscu DNK polimeraze I i ligaze. tako stci uklanja alkil grupu (u ovom 'slucaju metil grupu) vezujuci je za cisteinski ostafak saaiian u ·sopstveiioj ·a~inokisefiiisk6j"s'ekverrci:·-oa·-bj·se·izvrs1tcr'dt:alltil-acija·jedn-e·azoti-tc baze. dolazi do stvaranja distorzija (iskrivljenja).(ctimeri. Nakon sto se . Medutim ovaj enzim ima 3'-5' egzonukleaznu aktivnost.pirimidinske. Nakon sto se izvrsi depurinacija.e·. koje z_ posledicu dovode do sinteze nefunkcionalnog a proteina.isecanje distorziranog dela lanca. · 15. Uloga UvrC proteina je da omoguci precizno . isece ostecen region (oko 13 nukleotida oko jednog pirimidinskog' dime:ra). Jedna od · najcescih situacija je metilacija guanina na poloi:aju 6. potreban je enzim. direktnu reparaciju navodh:. Jos jedna od promena··na·SNK·melekulu ·je . pri cemu se Sp?ruj~ sa guaninom i time dovodi do bazne supstitucije po tipu transverzije (T-+G). C-C. sto dovodi do distorzije · heliksa.. Ovaj proces naziva se depurinacija.Human a genetika. delujuci na.razlicite: alkil-grupe.. Kod Escherichiae coli se obrazuje kompleks sacinjen od dva molekula UvrA i jednog molekula UvrB. ·· · · : • ·: U bioloske mutagene spadaju neke vrste virusa. koji se vezuje za DNK i uz pomoc ATP-a se translocira dui: lanca i trai:i distorziju. koji se nakon reparacije inaktivise.· · · :: . svih organizama).l'rova!eRtn~g.susedne . · · : . Direktna:reparacija se·odvija:i kada seodstranjuju. Mehanizmi opravke DNK molekula U toku replikacije. UvrB i UvrC. ona postaje osetljiva prema endonukleazama koje je isecaju uz pomoc proteina UvrC.· . pridodate na azotne baze. .'izmedu dva susedna-timina (slika 41): Vezivanje DNK-fotoliaze za pirimidinske.v. T-C). koji svode stepen mutabilnosti na najmanju mogucu meru (ko~ sisar'! oko 10·10 ) i ispravljaju nastale greske (slika 39).· · · Akridinske boje (proflavin. akridin-orani:) se ibog slicnosti u velicini sa. .-prom0dja-. Podaci kazu da se dnevno iz DNK molekula svake humane celije izgubi oko 5000 purinskih baza. kojLraskida kovalentnu vezu. Reparacija isecanjem (eksciziona repa:racija) .haze . Zapazeno je da kod Escherichiae coli mutacija gena za 8-subjedinicu DNK polimeraze Ill znacajno povecava mutabilnost sto ovaj gen cini genom mutatorom (MG). Nakon sto se u molekulu DNK formiraju pinmidinski dimeri (T-J. Nakon sto se kompleks ·UvrA-UvrB. koji se· u toku :repllkacije ponasa kao adenin i sparuje sa timi~<?fTl· D~?!kJI~ciju vr5i enzim alkil-transferaza.taj nacin mutageno..000 ugradenih baza.e korekcija pirimidinskih dimera.dimere odvij_a se u mraku. a nastali gap se rekonstruise udruzenom aktivnoscu DNK polimeraze l i DNK ligaze: Eksciziona . ana proverava da li je korektan nukleotid inkorporiran u polinukleotidni lanae i ova~va . Nakon~sto dode do obrazovanja pirimidinskih·dimera. zbog raskidanja glikozidnih veza (kojima su povezani secer i azotna baza). Liz koriscenje ·svetlosti plavog del? spektra.kih veza · (endoriukleaza) sa obe strane lanca oko lezije (zahvatajuci i nekoliko korektnih nukleotida) (slika 42). Nakoil sto se lanae isece DNK helikaza ga odstranjuje iz heliksa stvarajuci prazninu (gap). distorziran lanae se uklanja delovanjem DNK helikaze. Evolutivno se razvio veliki broj reparacionih mehanizama (repair mechanisms). sto zilaci da k13da ugradi nukleotid. Enzimski kompleks koji se sastoji od vise enzima. Pored nekorektnog: sparivanja ··baza DNK je jako osetljiv: prema naglim temperaturnim promenama. kao i pored nje moguce je da dode do pojave greske (mutacije) u normalnoj sekvenci DNK.akcija naziva se jos i samokorigujuca (proofreading) aktivnost. Kod citozina uocena je deaminacija (gubitak amino grupe). na mesto azotne baze dolazi hidroksilna grupa. Direktna reparacija Kao primer za ·. veze za distorziju.· 12 . nastalih delovanjem UV-zraka (slika 40). purin-pirimidinskim baznim parom ugraduju (insertuju) u DNK sekvencu i dovode do frameshift mutacija. Kod prokariota postoji ekscizioni reparacioni mehanizam koji se sastoji od tri proteina UvrA.ezivanja -9v. koji imaju sposobnost da se ugrade u humani genom i time poremete normalnu sekvencu gena. Tipican predstavnik analogne baze je 5-brom-uracil koji se ugraduje u DNK molekul na mesto timina j cesce prelazi U enolnu formu. DNK polimeraza Ill u toku replikacije ugraduje jednu pogresnu bazu za 10.Repetitorijum mutabilnosti (broj mutacija).. timina -:nastaju pri delovanju UV zraka). aktivira se enzim DNK-fotoliaza (prisutan je kod : . I ' .

n) __. · " j ·... E?--: ~.. 0 ~5~.\P Mf.. .'"' s•gn~enata hornologlh hromozotnn.......~u Li~ua pep11Rjava pr:uninw JNYftYjr ait i 0 & 'Otli-=~~ll~ e .UEPAUACIJA .Reparacija posle replikacije ''MISMATCH" REPARACIJA .lja genetlekog matcriJ-"ID hornologih 4«. .STA e~roe~e~ \ - E~:zoDukluu U:\J.kog rnateriJala garneta se prl · · · oplodjenju nalaze u xlgotu.. lf!tlkemijeo brcino.I Aui1oi.:· : ~~ . ···'··o \ : . ..A < .O~obine vezanih gena .. CROSSINGOVI!R.. ...e fl'!clDnnmi . . Rf.:. Slika 46 .. · · ..:.•tlluinu!'r ·.llt:ite komblnaclje hi"OrnOXoi'T\a u yametlma nast•ju slu~ajnorn kornblnac::ljom raz.' ···._·:.. u profad I mejotiCk• deobe Slika 49.JA ! .Mismatch reparacija ·"..uC'mij• Xeroc.deobe .Podela postreplikatorne reparacije {: ~:: ... .n:scnt'!_Slllr{ . AMFJMIKSI.-tthlr IIIC'Ip•rnw biii7. Slika 44.Faktori genetickog polimorfizma ·· Slika 50 ..oma u anafa~l I rne j otiCke. ~: }~/" • ~:..KOi\IBli'IATIVNA REPARACI.mi ku>...\RACIJA 1'0!'-U: REPLIK.· .\CJJA . Humane nasledne bolesti asocirane sa ~efektima sistema repar:icije preosc-tljh·o:st t~h•ngiffUtsi. "" IN. r Komblnacijc genotll:.\ pilimidindiiclift\Cri medilike. · Rekomblnac.ff. SOS REPAR.an 0:"\K l""limcor..\CJJE .le•·n•• pi.. Slika 47 ..J.. ~:.·•· Slika 45 .l. I. __ ..-· Raz.. . ''~IISMATCW' REPAR.dvajanja hornologih hrornoz. :~ ~ .: r-fi • H AU • fi.m5!1W+ti~~~M1... .. .C'- 3.Verovatnota nastanka genske mutacije ~- Slika 48 . rzraCf'nje nlkilinjuCi ·~et•si limfunti ~rcinomi Uloom~n· ~ indn•n' F~\nc•nli limfn m i kukcornije ..\CIJA po1rrino spannr b•u • 2..\"I C . ··· :· IIU'-· Slika 43 .· .Bolesti uslovljene defektom reparacionih sistema VEZANI GENI ltif!W!dJH&etiMiit4ii*!ttJi. fl -.AP reparacija J~EP.._ ~·G .

ostecenja stvara signal koji indukuje . koji su neophodni za hitnu reparaciju DNK.) u molekutu DNK. Fankoni·· nemija i Xeroderma pigmentosum (mutacija gena koji obezbeduju a reparaciju nakon UV-zracenja.· baze sa otvorenim prstenom itd. Sto su geni udaljeniji na jednom hromozomu to je veca mogucnost njihovog 13 . . ' · . stanja hromatina. Ukoliko dode do mutacija na lokusima MutH. i nastali gap remodeliraju DNK polimeraza I i DNK ligaza (slika 43). hromozoma. itd. protein (suprimator SOS sistema)-je kodiran od strane LexA gena koji blokira ekspresiju RecA. koji reaguje na temperatumi sok. MutS se vezuje za nekorektno ugradenu bazu. proofreading aktivnost DNK polimeraze je znacajno redukovana (slika 47). Da bi reparacija bila ·uspesna ·mora da postoji mehanizam koji prepoznaje koji od polinukleotidnih lanaca nasi ispravnu informaciju. ~ .). prenosi se autozomalno recesi~no) (slika 48). po potrebi. i to je dodatni faktor pojave polimorfizma (razlicitosti) (slika 49): U okviru humanog genoma.toga AP endonukleaza odstranjuje AP mesto i nastali gap rekonstr~isu DNK polimeraz~ I i DNK ligaza. Odasiljanjem ovih signala aktivira se RecA protein. pola.- . ukljucuje se proteazna aktivnost RecA · si m gena: Proteaze neutralisu LexArepresor i brnogucavaju sintezu velike kolicinereparacionih enzima SOS sisterna. UvrB. Kada se udvoji DNK molekul. Mutatori · Mutatori su mutantni geni koji povecavaju stopu mutacije druglh gena. SOS sistem Kod Escherichiae coli uocen je poseban mehanizam. majcinog i ocevog. brojnih faktora (udaljenosti gena. uzrasta. jer ona kao novosintetisani lanae nosi gresku nastalu u toku replikacije. pri cemu se ne mogu ispraviti pirimidinski dimeri i bolest se ispoljava kao preterana pigmentacija koze. a to' da li i koliko cesto ce se razdvajati zavisi od .. ukoliko dode do mutacije MutO lokusa. Najpoznatije bolesti koje su uzrokovane mutacijom reparatornih lokusa su Ataxia telangiectasia. Enzim AP endonukleaza vrsi prepoznavanje secera. Kada dode do aktivacije SOS_ ste.esor. osobe su oko 1000 puta osetljivije na UV-zracenje. a Mutl vrsi protragu za jednolancanim prekidom na DNK nastalim u toku replikacije (nick= prekid na jednom od dva lanca DNK uzrokovanom nedostatkom ·fosfodiestarske veza): Kod prokariota MutH vrsi isecanje nemetilisane GATC sekvence novonastalog lanca. iseca se AP mesto. UmuC. Vezani geni ponekad mogu u procesu rekombinacije da se razdvoje. Mismatch reparacioni sistem preferencijalno iseca nukleotide iz nemetilisanog (novonastalog) lanca. dolazi_ povecane stope spontanih mutacija. lzmenjene baze (hipoksantin. Znacajno je spomenuti i MutS i Mutl proteine koji su zastupljeni kod svih organizama.i " 16. Takode. jer su onemogucene reparatorne sposobnosti do produkata ovih gena.. pri cemu enzim adenin-metilaza· vrsi metilaciju na polozaju 6 svih adenina koji ulaze u sastav GATC sekvence. · Mismatch reparacija Mismatch. jer adenin-metilaza sporije vrsi metilaciju nego sto se DNK replikuje. Nakon. SOS sistem omogucava sintezu reparatornih enzima (proteina). pojava ozbiljnih ostecenja koze koja se razvijaju u kancer koze. termin vezani nije apsolutan. susednih gena. Krosing-over Krosing-over -(crossing-over) je proces ra'zmene. koji raskida glikozidnu vezu i time stvara AP mesto.Repetitorijum reparacija se ukljucuje i u slucaju rekonstruisanja apurinisanih ili apirimidinisanih nukleotida (AP). Najznacajniji faktor je medusobna udaljenost vezanih gena.(regulatorni protein) koji suprimira (ne dozvoljava) transkripciju seta komplemenata SOS sistema: Ovo. nakon cega se gap rekonstruise delovanjem DNK polimeraze 1i ligaze (slika 46). nego zdrave osobe.Humana genetika . Medutim.· MutS.genetickog.a. g·eni _koji . koji inaktivise repr. dodatno potrebnu zbog temperaturnog soka.Kod prokariota je z~pazeno da se markiranje osnovnog lanca vrsi putem metilacije. •. dok -~e. a koji denaturise proteine celija. zato sto SOS sistem · nije uvek aktivan. Kod coveka postoje 22 grupe vezanih autozomalnih gena i jedna grupa gonozomalnih · vezanih gena. Blumov sindrom. se desava. SOSsistem i rekombinatorna reparacija su tipovi reparacionih mehaniz_ma koji se odvijaju posle a replikacije (slike -44 i 45). Regulatorni. rekombinacije . geni se slobodno kombinuju u potomstvu.materijala izmedu homologih ·. vec se ukljucuje.su linearno rasporedeni u okviru jednog hromozoma prenose kao "vezani geni'' (korelativni geni) (slike so·I 51). Svaki replikacioni blok Qedinica replikacije-replikon). odstranjuju se delovanjem enzima DNK glikozilaze. nakon . novonastali lanae je manje metiliran.·UvrA.povecanje transkripcije preko 15 gena odgovornih za replikaciju. Mutl.

.riv::~nj• I I I I I I' I I !I I! I' I I homologih hromo~em• .J.... ~ $1Zffl1101ffii ~ w:o :t~ !. I I 11 I I 11 I 11 I I I I I 11 I I 11 I J I I I I I I I 'I' t . it I d i1 I I I I I I 11 11 I 11 I I "': · I 11 I I I II I d I I I I j I .~: .I I! I I I I I I ...s... ft•Jednaka JtSH (razmena ••~trinskih hronuatlda) .!!! ~ '.Ufti !tOM 1cM -1Mb Fizlcko ra5tojanje izrazeno u baznim parovim~ Slika 51 .:--!.= 0"*' neojednakl cr~ssing heterodupleks .!!I•!III!!I!!I!!It!!I!I~......U... 3 ._ . . . ·· ~~ . !.U.LOO vrednost Slika 52 • Morgan-jedinica geneticke rekombinacije tr I I I I 1 I I I I• 11 I ! I I 11 I I I I 1 1 I t I I I I I I . . •: . .....l.f11 1 mo~ulav ~. ~:~. . I!. \!!J!\JI!! liilliillllil .l..! ~ ! 1 .LJ. · 1 d d I I 11 I i l l 11 I l l d I l l :..LL.. . Slika 57 . .I .L. ..· ...· . ·. I I I I I I 11 I I Ill """"'~''''lf'!!ill''"'"' p.''.U. ".·-... -~- . pavazuje slabod..~ . '· .._ I I I I I 1 I I 1 1 --'=...J.hromatida '. r \ -=··...J l I I I! I I I 1 lllllllllldl l•ncima late •rijentaclj• :... 00 Slik<. I I I I I I I I l l I ll!!jll!l f · .• .. - . ap.·-·.Holliday fo~macija · Slika 56 . "... .'> . .. ·'~~-i..:~1:.. ~ 1 d II I ti I If I I I I I I I! I I' I 11 I 11 I I I I I I I I I I I 11 I I I Ill I I I I I I I I I I I I !1 I I I 1 I j 1 I 11 I I I I I I I I I I !1 I I I I •ndonukleau u•eca po Jecian I~ illi:ffiiliiliiiilllllil·iiiiilif DNK l ..:_·. ~: ' .Razmena sestrinskih hromatida .. ..' ~~ \! . ·. I I ~I I J-~.skirn 4 .... .. .. j .n• knlj•ve hra...U.. ..Tok genetickog krosing-overa Slika 54.Rekombinovana.·:..tid- 11 I I I I I I it . Slika 53...~55 . . .UJi I (..·· .1 Ill .'. .· .: •f . ..Cenl hartel .'~'·-~' .I ~ Crossing-over u mitozi NEMA REKOMBINACIJE -\< .' V . . .~~ ­ ..· \..'. 'I I I I I I Uga:~:a . ....:..··=-·. • •. ' ' Fa ..strin.Tok genetickog krosing-overa Id I I I I I I.... .tif!iri4*?5iF · .I I I I : : : : : : : : : : IJ) 1i I I I 1..' HOLLIDAY STRUKTURA REKOMBINACIJA ·:·. +s• x .:~:i:. tllomplftnwH'Ibmo umeCu i pove&uju •• J.Nastanak heterodupleksa Slika 58.l.llUl..

Molekuli DNK koji nastaju...·sPC!Sobnost. .formiraju fizicki .jmdonukleaze:il ' bakterijskim.. ~~:: :. · · .metilaze) 'testrikcionih •·.:.·. · . pri cemu su dve ·· · · · lateral ne :trake·spojene:. Humana oenetika.· ·dvolancane -prekiq.i. PCR. a ·druga rekombinovana ·(slika 56). ----·-'"'··-·---. dobijaju se· dve niti..:...·Repetitorijum razdvajanja u toku procesa krosing-overa. ~.ka 57): u.hromatida.·. ·· •·· ··~ Gel elektroforeia ·se. "· ..~ · .' u ·onim · d~lovima hromatide . .: :· ·.·-. ..su::iden. .: ..endoriuk~eaze.:pojednoj. .molekularnoj genetici. . : ..---·--··---·· ___ .coliseee DNK..delimicnog::razdvajanja sinaptonemalnog kompleksa· zaostaju'hijazme.~:a·zasniva se ·na .~~f~~~~. a sredisnji deo jednolancana DNK.:·:· :·. ·. ~ }f.::.tJ. -~aktenja za ·. .DNK na gelu nevidljiva.. kloniranje]ena:i sekVendranje 'DN!{. hibridizacija.Spqsobnosti :.· polinukleotidni lanci.(RSH~ra~mena·sestrin_skih:..~.je~uocen. uyodel')ja ·(introdukcije) virusnih genonia u . ... hrcmozorriu):· Dakle J<rosing-over. . koji obraZuju distorzije.fragmenat~):· Restrikciona .>. ··.. Na gel. · · = .. 54r Presecerii < .tii:e i~ vitro amplifikacija.::a . pa se ovom metodom pos.rriejotickoj . · · . · ...)<ada se·citaj4. ··~ se -nas1edliju'po..-·.~restriktaze}-su . -.preko ·centralne. · .d::sopstVen ih:'. .~5:is'~3~ smeru) :od.u kojima se desila rekombinacija.Restrikcione .. nesestrinske::hromatidei'. ···- .:medutim mnogo je ·· :(·~>i · redak i uoceno je da se povecava·nakon :stetnog ·delovanja·spoljasnje sredine (slika :ss).pahitenll :a:zavr. bojenje se koristi etidijum-bromid.. . . a. _.::..·.O. . : ·. overi koji 'Se desava 1zmedu·sestrinskihhromatida. ·Sinaptonemalni ·kompleks ·sastoji se od tri trake proteinske prirode.. .~:na .sto·....:.".::i\ : ··.. ·- .. Jedinica ·genske mape je jedinica .e ..·.ficna. . · · . molekularne . PCR (polymerase chain reacfio.'od .4-8 . koji ima ·afinitet prema DNK. koristi)adaje DNK·za ispitivanje dostup.speci. : ·._ ·.opisano). ..da:: prave.) struktura (slika 55). pa se tako uocavaju segmenti DNK.:Nakon-.:celi]amajmaju·:ulogu. Sto je relativna molekulska masa riekog jedinjenja manja.mesta.::selol.ence :{koje.. biologije:. . ·.1 . ~ ' ·: .· Restrikcione ·.~ "-:~· · · . sintezu".· ~. Ukoliko se segregacija (razdvajanje) Holidej strukture dogodi u pravcu sever-jug. · · ·Osnovne tehnike . . jer se na ova] riacin -mogu kombinovati genetski materijali bile ~ojih..krst.-' ·.lla TazliQitqg po~klq_Uz.. Broj jedinica genske mape je·u direktnom odnos~. gde god se pojavi GMTIC ..' hrornozoma. : ~ ' · u regionu:hijazmi.9el-elektroforeza...i:Z'balcterijskih'celija.kros irig~ /::·[(-:{. nastaju·Jepljivi ~rajev. .. . '!f.materijala izmedu homologih · hromozomai :potrebno·je.sta-nci~Enziril 'ECORI izolciv"i:mizE. ~ . ·.njihov : · ·. . 3.::::: ..T.:tOOP. ... deobe (mejoze).m~sta . . se ~ . · ·.·.to e:e·se taj molekul brie kretati .u:·DNK ·molekulu: ..sa ~olicinom rekombinacija izmedju lokusa.. ::1?:"·: ~estrikcione endonukleazej njihova-:primena·u rnole}<ularnoj :genetici . .· koji imaju·· . . (slika 52) . .mejoticke . .• . koji je puferisan (u blizini katode) se nanosi .jedan polinukleotidni lanae u obe . pa se hijazme jasno uocavaju . 1c~=1% rekomb~nacije) . sto je d. · Razdvajanje korelativnih gena desava se u pahitenu .sekvenca ·(humani :genom seee na· preko.e.:(rariije ".' .ticne.. endonukleaza.5alla·se:na. . .nasprar:n: dnigog· (spajaju ·:s~ homologi parovi) i foriliiraju ··· · ·· sinaptonemalni kompleks. .upotrebljava kada se :Zeli odreqiti .ov_elo cto revoludje u .'nalaze se nekorttplementami lanci i nazivaju se heterodupleksi.korLdlplotena:d:tiimitozi .·· · . · . ..zapocinje. ::·. Ova krstolika formacija naziva se Holidej (Holliday R. pri eemti ce posle odre~enog vremena razliciti molekuli DNK razlicito migrirati.· --· .~]w~~~j:~~.:Nakon::Sto:Testriktaze:::izvrse:sece·oje. proizvodnju lj.{pomocw enzima 'DNK..:...kroz gel.~spojenih. · · s~edini (slika 60).:mendelskim pravilimai-jm~dstavlja_ju polimoifiiail:i•restrikcionihfr~gmenata~~-:'i:t. tacno'·'odr:edenim~::mestima:. repair-sistemi koji ih opravijaju (sli. ·. .profaze . homologih ... Morgan · (M) je jed.s obziro. ia . . preko poprec~ih .tako:. hromatida:.~ .orga~Jizamamedusob'no.iestrikcionjh :~.· is: o:~thit~hpikem~~~~i~t~!Ji~g~~::". ·· ~ ~. : : >c. ako se desi u pravcu istok-zapad. ---·--..· (naelektrisanih) ·molekula da se krecu u elektricn6m poiju od negativnog ~a·pozitivnom · polti ct~lektrode ugelu ili 'drugoj.. da. kpji se :uz ·pomoc 'ligaze mogu spajati sa · kompleliu~ntarnim · krajevima DNK razlicitog porekla.:zapocinje·.: bivalent) · (slike · 53 i. Ovakva formacija izgleda i<ao . ___ .endonukleaza: . '· .·/~:.. hromatida). receno~ :rekombinO'varii ili ~ibridnl) ·oNK niolel<uti. ciji su "kr. j>Dtr]oC :fe$triktaia ~nazi_vaju himerni (uslovno · .genom::-Ovi·'enzimLre-gistruju:·palindtonisk. . onda se dobijaju dve rekombinovane hromatide...• . .aci dvolancane DNK.. . -~---------. lzracunavanje procenta rekombinacije posluzilo je u preciznom mapiranju gena (linamog raspore_da gena na hromozomu). to znaci da 1% rekombinacija odgovara ·Je?noj jedinici 'mape. . ' ~ . .. Krosing-over se odvija :·. pa se aktiyiraju.----. . ·. . istog smera . .:~:~r:·:~·.~/. .'Se:·stite :metilac_ijom. 1.(kod . (tetra·da..n) ili reakcija lancane polimerizacije se..·:s~: :•• upotreba··.inica koja oznacava procenat rekombinacije (1M=100% · rekombinacije.1\~~1aJiajve'tli"'pnmeril[~·:jOO~stenju. .. niti koje povezuju sekvence nesestrinskih .:.~ . trake.. .·. enziml izolovani :(oko'300 ':Vrsta).estriktaza::bakterije......coveka. -::~i. .mo1ekula:{slika:59). rastojanja izmedu gena na hromozomu. ·.:'. deobi postojL55 hijazmi po jednom '·· ..' pri cemu je jedna intaktna (nepromenjena}.' / . . ·kontakL'Homologi ·hromozomi · se ~ jxJstaYijaju jedan .: . · • . a n malim kolicinama. ·. .·:. kombinovanjem vise DNK ·!Jlolekl.humanih hormona i drilgih proteinskih sup. '. se oni ·priblii:e i . .nu kleotida:.:.. :pri cemu odredena sekvenca DNK ne mora u 14 . ..uzorak koji se ispittJje i nakon toga se ukljucuje struja.. _-----·.OOO . ·----.~da ih ~astf~..preseca . 'Dva l>oj~~a'je'. -[ .se umecu u nesestrinsku hr~matidu delovanjem DNK-Iigaze.m da je..· . .diplotenu se vrsi segregacija . koji su ..duiinai 'Cistoca·'DNKimol~kula. Da bi doslo do ··razmene· genetickog ·.~~~~\:"?.

Southern blot metoda . .Primena molekulamo bioloskih..... : f'. .hibridizacija prajmera ·: i• ·· ~~ '•: 3.· .fluorc:scentna hibridizacija i11 situ ~ ..PCR metoda .. . antnionsloJl 1«nust. Slika 61.J _ :i ./ancana reakcija polimerizapije' mo!ekula DNK Southern blotting ili test hibridizacije 1. .. '·· su ~"' hnrlonsL':e r-t"Skc...~}~+~J..:.' ii. . • Detekcija genoma · . Slika 63: FISH metoda . ' ' :.. . ··.·. . : ·: ' >~:"t: : ~-~ ·~ · -. Hibridizacija situ....:' ~~:'\ Slika 59..:: ... . Primena DNK amaliza. ·..sinteza novih /I j ' lanaca ...•. J. ·::. Ciklu• l: -1 no<>le~a•t.a l.:_? ...P.i ·!'·:.denaturacija DNK .r. . \ 2 mu1ckul. DNK analiza lzvot·i DNKza aualizu . .:.. ·:"' .~j:• . .i~~::Jl4~?l~· ~. ~!. .f~S$~f~::l~~~~~~~?~~*~~~~~~~~.t f'UJ•(-ornik. .. • ·· •·.~si!~~~{:tM~t. ~ iDl ~.f. .~~ -~~- nslr..~ :... .: !I ~ -polimerizacija DNK . · na· ~= ·~ ..·.~ .'~ ..DNK otisak .! rC"Ic...lzvori DNK za analizu PCR. 2..:~~ · · ·. ·. :1 Si: .JDI\I~"'I:is:jlll' Cildus l : .B~jerfje etidijum .. test hibridiza~ije hrom6zomskim Hi in ·· .··i .. : Geneticka :predispozicija za '·' . ~ .. '8molckt. . · .Gel-elektroforeza ·I knren di:.~:.:- .Ll" ~~~-.lndireJctna ·-·'. 'slika 64.nJe"Dl'\~ .u medicini .:· ' ' Genska terapija· i · farmakogenetika . bromidom . . .. metoda ..u medicinl.· ' ~~~ - -~~ . .....poligenske bolesti ··. FISII.dlrektna ·.UV prosvetljavanje . ldentifikacija osoba... 1 !:. ·.~~?:. ~· . . ..·.' t~~ .: "-!!. ~ ·''. ~l!llom ·. Gel-elektrofore::z:a..daDi'\~ '.~E.:a D~~ Cikhu 1: n. : . .J.:: .. mikroorganizama · .r.n· i. Ri<Jlaski rnat~rijal u k(omc rrlijc S2 jcdrom: .. . .· .!li huk:thlt' ~lu7nk•~i.. !· ~ ii . .. Slika 52.-sm: lt"Crt•r~li ~{E .~:~?:.Siika 60 ..: . .eO. ...t" tnl:.

Naime.. kl~novi prvon.~~~. .i pojam ·izu~etno j~--~~r?~o-~astuplj~p:ig~frTii.DNK. a narocito se koristi u evolucionoj biologiji. koja .dobijeni restrikcioni . . .DNK.. ::_el~ktroforeze . _. -_ se . Marker se obelezayp i tako sto se razdvajanjem oba lanca DNK na odgovarajucem mestu._ P!?!~~loJumora) celije.• .·:_'_• _Je~noJaJ~~~~ bhzan_cJ ?u . pri cemu enzim Taq DNK polimeraza ~mplifikuje nukl_eotidne lance.Jedne mahgno ..eki ·_o vektora). Bakteriofagi su o .potJcu :od . medutim.markeri ·na povrsini ~ .6eliju. prajmerima) dodaju prajmeri koji se vezuju za matricne lance i sluze kao' vodice za DNK polimerazu. u n.: .. Koriscenjem metoda molekulame blologije doslo se na ideju da se izvesne nasledne i turri_pypgene anOf!l?. .Repetitorijum da se klonira (slika 61 ). ·· -. dok ·optimalno delovarije. koja~·:pronalazi : 6dg0varajlfci f' ' komplementami region. -. .transformrsane (monoklonallio ' . Western biotsluzi .pase zato kaze da suti.. -DNK se :u ovakvim. Kozmidi su modifikovani plazmidi._' · · _ · _ --. Da bi se ova metoda izvela. ispoljava na .. · denaturise ·i inkubira sa markerom.ti .{xi cemu . Taq DNK-polimeraza). pufer.-:. su n:ia. · · : · .-·~.bakterija. c moze :ispitivati . · · ·. Postoje modifikacije PCR metode koje obezbeduju ponovno obnavljanje ciklusa amplifikacije. : -.antitelomrdok ·se kod dot-bl. koji je ·izolovan iz termofilnih ..ili Roirnidi {koristi:se r~strikcioni fenomen da bi se strani gen ugradio.~~~. pri cemu oni determinisu-koja sekvenca ce se amplifikovati.P9sle. ' -._ : .· · · · ·:. ' za ispitivanje 'hibridizacije protein a sa .Human a qenetika. Marker se moze pripremiti nick-translacijom.~%t~~i~ii1f~:f'}'t' i --.Mibridizacija se .avljaju ·u_ bakterijskoj celiji. Ptva fa_~· . neophodno je imati radioaktivno obelezeni marker koja se specificno vezuje za odredenu sekvencu nukleotida.:-~-"~~~'.' receptori.boja -kojima:·se..<~.s~. a nakon tog vremena dobija se 1os kopija DNK molekula. a joni magnezijuma katalizuju vezivanje nukleotida. spajanjem komplementarnih lanaca dve razlicite nukleinske kiseline. za DNK polimerazu._ _ -. koji se sad a nalazi u znacajnijoj kolicini i kao takav mnogo lakse podvrgava drugim metodama ispitivanja. Danas se koriste . joni magnezijuma.~e vez. :Medutim pojam kloniranja najcesce se vezLije'uz ·molekulan16 bioloskEi.razdva}aju . Prajmeri su komplementarni vezujucem regionu.uje uzstvaranje · ~?pija ili . Jedna od metoda hibridizacije je Southern blot (slika . hibridizuje se sa njim i nastali hibrid se moze pstanoviti autoradiogiafijom. uz pom· e: ~ektora (preno~i~ca)::Taj yektck mora da bude kompetentan da ude .se DNK sekvenca .-pa ·se metoda miziva..pr~"~-~j!Q. Norm~lno ll prirodi. kojrse rialaie van hrorriozoma. ·~-g~na se vrsi uz pomoc bakterijskog cirkulamog genoma. Komplerrientamo vezivEmje-prajmera se vrSi na 50-70°C.filtere inajl6. hibridisation) (slika . · uslovima inkubira'.: .-keri-'obelezeni\ ' . • 9 u .~iq~0~£r~Yi. . membranski .(kao -j na hromatimi' interfaznih jedara).mogu.rn. U sledecoj / fazi se vrsi ekstenzija.fluorescentnim bojama.blot.9P_Iode~~lB~liJ~..:~: .jSri ~emu ~ogu da tigrade svoj genom (a sa njim i strani gen) u bakterijski. Plazmidi su 'cirkularni DNK molekuli..FISH'(f/uorescent in situ.:gel~elektr~forezo. su genet1ck1 klonov1: CehJe -tu mora po JeQnor hrpotezr . k-onirimje ·· l sadrii neki strani gen. "koji· sl:l pmthodno radioaktivno obeleieni.a najcesci vektori su bakteriofagi.i1Jl . pri cemu. Danas postoji vellkt . ~. Test hibridizacije se koristi .na metafaznim hromozomim~·. pr~vlj~.se. · . Kornpleks vektor-gen: naiiva se himenii '(~ekornbiryovani) DNK molekul. ukoliko je oko ~jih sint~tisan kapsid.-·fra·grneli.. : _ ·. _Da -: bi se · prajmeri produzili neophodni su prekurskorski mol~.._:y}:/-)·-· Kion!~a_nje j~ pojam k~ji -.? · ::. On se zasniva na vestackom formiranju dvolancanog polinukleotidnog lanca. Slicna metoda :~ So ut~ em blotu-je_ Norther'n . pri proceni komplementamosti izmedu DNKIDNK.llijersaniraju _ _ p~menom genske terapije (slike 64 i 65).•.62).·6elija.. . .}. i _. dodaje smesa heksanukleotida koji . 1 .a . sto ima znacajnu ulogu za utvrdivanje srodnosti. koje ce DNK polimeraza I degradirati i ponovo popuniti no vim nukleotidima._··. .ovom metodom se ispituje hibridizacija DNKsa RNK. prajmeri. sadrie oko 100 gena i zasebno se nasleduju. :·. .·:_ -~. baktetijski virusi koji zivotni ciklus ob.istovetnih uzoraka (slika 66).se vetuju za DNK i ·obrazuju plajmere·.anje gena.uzorka. . .\{N()~ir~n~~ k~o · ~iolo.nske:friembrane. plazrnidi . · : _ .kuli (dNTP). obelezavati razni hromozpnii. ~lonoyt Sve C:hJe IJ~d~k~g ~rgan~7m~ :~~C:l!'9.. _pa . Ciklus se ponavlja 30 puta.' .: ' .miorske eelije.:. pri cemu dezoksiribonukleaze nasumicno prave jednolancane prekide.~~P~9"-~IXJ9. a ·nakon toga se u fazi odmotavanja (annea/ing-zagrevanje i hladenje DNK u cilju odvijanja dvostrukog heliksa i indukcije kombinovanja sa komplementarnim fragmentima tj.~..W~2~Q~~~~4li'.· .· . sa jednolancanom radi6aktivno obeleienim ·: genskiri{ markerom/. .rezultati se .ocitavaju u vidu t~~ke manjeg ili veceg intenziteta.ce sintetisati novi lanae probnog segm'enta (koja u sebi saar:Ziradioaktivno obelezerie nukleotide).~~I~f!jff6l~~!~*~~i~1~~f~1~t~J~~~l~*j1i{. DNK se u prvom stupnju denaturise na oko 94 oc. Enzim Taq DNK polimeraza je termostabilan enzim -uer je ovo svojstvo od kljucnog znacaja za proces). metodeJ klonir.. ·::-..ne' iseca)ve6 se .: _· •.63).astale maligne celije.~qD9:iJ_ ~~:. umnozavanje. Nakon sto se zavrsi ciklus dobijaju se dva molekula DNK koji je ogranieen prajmerima.J~?~~. /'. pri cemu se u reakcionu smesu dodaju svi neophodni molekuli (nukleotidi. . . denaturacija (blotting) i prenosenje fragmeriata mi nitrocehilozne . nukleotidne sekvence itd. DNK!RNK i RNK!RNK. : . ov~ metodeje.isecanje DNK restrikeionim · enzimima.-vrsi .koja _ ugraduje u bakterijski genom. 72°C.ot metode . : ·· ··· -broj fluorescentnih. PCR se zasniva na modelu replikacije. 15 . : ..

/._ :~..:. oOrift-. : Edin.· . .-. . . infektivnih bolesti (postoji nov ili neadekvatan genski produkt) Na nlvou: DNK .' -~. <.·· ...W: ...-· . . sHka 68·-'Efape c~..·· . -~. KOREKCIJA CILJNE MUTACIJE: .t·· ... : ~~-:-. ~~.domlnantno~egatlvnlh mutacija . :_:·· :·:< ~_. . ..-: -~ -. :-~·..u~l<69 ~ikiusa :..· ·.i. . Uvodjenje ekstra kopije gena da bi se : : : .... .- ~ ~ :.--...· :~ ·.~-~ :~: " ''~ · · ·. ....zbedio ~rodukt • .~ . : obe... . ~-.. .:.bur:. i~t.• :.· . ~kotsl:a .. ~jf:i~:/: ~-~ ..~··. ..:_: ..Kod. -. .\~0~t~~~.· ~ ~ -~ :::_r~:=·_-:· ~ ..ili RNK .... :: . : ·. ----~:. .•..~:~~-.: . RNK proteina ..· Na nivou DNK.Osnovn~ nacela genske tera. .. . . _ . .. _... . _ : .·>· .. " . . :..: ...· .:··-:-.. -··· ~ .. _. ·•_ j ..J~' ·.. . . CILJNA INHIBICIJA GENSKE EKSPRESIJE: Kod maligniteta.: :: '·-· ..·.. : ... . - . .-.~·': ·..'·_:.Olac. k~~::<··:_.L ··:· . ..... .. . . '• GENE AUGMENTATION (GAT): ...n llflm.pije ·> ! • · : ~ ~- .." ... .::.. .Kod maligniteta Slika 6S.-... CILJANO UBIJANJE SPECIFICNIH CELIJA: · .: .::::--..

kao i ekspresija gena i replikacija DNK. Princip genetickog inzenjerstva se zasniva na cinjenici da nukleami genom svih zivih bica. zato ·sto bakterija ne metabolise strani protein.ifs1Erdica··ne'\7e~ivanjapbkleotfda·(A. Sangerova metoda zapocinje tako . G+A. Kompleks domacin-vektor se tako sukces1vno u~n~zava. U genetickom inzenjeringu · koristi· se· delovanje: restrikcionih: endonqkleazarDNK ·ligaza l specifi~nih vektora (bakteriofaga.i autoradiografija. prepoznajuci ga kao svoj. u zavisnosti 'od delovanja signalnih mehanizama. kozmida i .{-palindromske· sekven~e )~-£tvar·aj~J. Najpoznatije su Maxam-Gilbertova i Sangerova metoda. . koji su uglavnom. ~PI. Nakon sto se izvrsi elektroforeza . Himerni molekul se~ sada nalazi u bakterijskoj celiji i podleze svim osnovnim procesima..Repetitorijum vektori koji mogu da ugraduju velike sekvence DNK i nazivaju se YAC (yeas~ artefi~ia/ ~~romoso~e) i BAC (bacte!!a~ arteficial chromosome). molekuli ONK se odvajaju u cetiri grupe.umnozavanJa (kloniranja) vrsi selekcija klonova sa himericnim DNK. dok drugi kraj nece biti obelezen. proteina koji ce ucestvovati u replikaciji (enzimi replikacije).· ·· plazmida}:> bF sem·ekF·humani::gen· ugradio.produkata (insulina i ostalih .) (slika 67). koje se razlicito obraduju da bi se svaka azotna baza modifikovala i mogla pratiti u nastavku procesa.~u· bakterijski. G2. 20. Secenjem jednolancane DNK na dva dela. kao i ·u istovetnosti u mnogim · procesima. dri. pa se nak~n .Human a genetika. S obzirom da je kodirajuca. Jedan od cetiri dezoksiribonukleotida je markiran sa radioaktivnim 35S. Nakon markiranja. jer se na ovom polozaju vrsi graderije 'fosfo.hormona. Sastoji se ad tri faze: G1. koji se sastoji od tog gena i vektora. ·moze da zapocne nov ciklus celijske deobe.!PU. pa se na taj nacin ocitava poredak azotnih baza. Za ·ovaj postupak koriste ·se restrikcione endonukleaze :· · koje' ·za·secaju"V~ktor i -gerr·na··tacno· 'O'd reuenonlmestu .pa ..t. coli): koJa r~pl~kaCIJam vlastltog genom~ vrs1. principu. Bakterije obrazuju kolonije i sekretuju plak (talog) koji se sastoji od korisnog p~odukta.· -c.akn gen i vektor po principu komplementarnosti hibridizuju i delovanjem DNK ligaza obrazuju himerni DNK molekul. Uz pomoc ovako dobiJenlh produkata form1ra]u se genske biblioteke.duzina fragmenta odgovara udaljenosti mesta preseka od kraja lanca koji je markiran radioaktivnim izotopom fosfora. na kojoj se vidi da velicina fragmenata odgovara udaljenosti od pocetka prajmera do mesta gde je prekinuta sinteza novog:lanca. jer u toku procesa ne postoji 5'-3'orijentacija lanca. produkti lucenja drugih celija. U reakcionu smesu se dodaje mala kolicina 2'-3' didezoksinukleotid trifosfata (ddNTPs) koji nem~ju 3' QH. . interterona itd..se njihovo odstranjivanje iz smesa (da ne bi smetale) i dobijaju se cetiri alikvotne grupe (G. sifra· 1. koji je odgovoran za sintezu drugog lanca u prisustvu nukleotidnih prekursora i ostalih faktora. · · 19. da zapocne diferencijaciju ili da ude u stanje "mirovanja" u Go fazu.o . . pre toga •je potrebno stvoriti •himemi (rekombinovani. 16 . Da·. patako lanae DNK ne maze da raste. U interfazi'se vr5i priprema ia sledecu deobu. proteinske .6i. 1 replikaciju uvedenog gena. Ova faza je ujedno i najduza faza celijskog ciklusa i celija maze da je. tj.miverzalna. pokazuje:·un.. · · Sekvenciranje je odredivanje redosleda nukleotida (sekvence). Maxam-Gilbert metoda zapocinje markiranjem (sa 32P) 5' kraja jednolancane DNK. G}'"je•ta ·da ce 3<: dobiti onoliko fragmenata DNK lanca koliko je puta taj nukleotid (koja nije nagradio fosfodiestarsku vezu). jedan kraj ce biti obelezen sa 32p Qer se vezuje samo jedan atom radioaktivnog fosfora za samo jedan kraj-5'). Nakori elektroforeze.--T. S.diet~m*e veze.iverzalnosLu. prisutan u ONK fragmentu. Prvo. Na celiju uticu brojni faktori rasta. odnosno transfera gena iz jednog organizma ·u drugi. On je podeljen na interfazu i deobu. cilju dobijanja korisnih .sto se jednolancani DNK hibridizuje sa prajmerom. Geneticko inzenjerstvo Geneticko inzenjerstvo je ·skup metodologije koja .ak ·se formira.. . Genetski modifikovane (GM) bakterije se kultivisu na hranljivim podlogama u Petrijev)m soljama nC! specjficrioj pH i temperaturi (37.C) radi pracenja svake baze.m~sto. gena ili nekog dela DNK. Kao tipican primer genetickog inzenjeringa navodi se ugradivanje humanih gena u bakterijski genom u . sprovodi se autoradiografija. sad a bakterija pored sinteze sopstvenih proteina.A+ T. ugradenog gena. Vektori se uvode ·u celiju domacina (E. sintetise i protein koji je produkt.Jgo. Pozicija fragmenta na autoradiografiji odgovara polozaju baza u fragmentu DNK.iln. zapocne na tri razlicita nacil!a. kodirajucem . hibridni) DNK molekul. U G1 fazi se vrsi priprema za replikaciju i sinteza proteina. ~eyijht.5°C)... vec ga egzocitozom deponuje van celije . Posle modifikacije baza vrsi .''P.dovodi do stvaranja genetskih hibrida (ukrstene DNK). odnosno replikaciji i genskoj ekspresiji. Celijski ciklus Vreme koje obuhvata period izmedu dve sukcesivne celijske deobe naziva se celijski ciklus (slika 68). To prvenstveno podrazumeva sintei:u RNK ·. sekvence DNK.

· . . Mitoza ·: .J~olus b•-omozont ... nui..- -~·cri:~· .--· .-..···.._ _ .::~.....~~~ -~. rw:tubi~:~ii~~i$~:< ... . :~-~ ~.Faze mitoticke deobe .' i. : jed•·ova mtmbrana ... ::i:. ·. '{.. -·.' '. ~.... . .. __ piTnwjatilb inlt-rl:u:a :~t:_~ r ~~..~< ' ''~ r tt~: r-.----. . ::1$f_-~ .Faze mejoticke deobe ! . ~ it-t.. ~::­ ~... Slika 69..."~:r(:r\(~) .." Slika70. : .·· ··. ..·:--. Mejoza ~k . I I ~ -- ·. .. ··..~·--~ .

u citoplazmi. lzmedu mejoze I i mejoze 11 postoji kratak perio.moze bit~ mitotska i ·mejotska. odnosno sve . R~zdvojeni hromozomi migriraju pr'ema ·polovima eelije i kada dospeju do polova eelije. predstavljaju mesta genetickog krcising~vera: ·Dijakinezis :je· posfednj.hromozome) i fragmentaciju jedrove membrane... putuju na suprotne.poreklom od Goldzijeybg. · Mejoza je slozena eelijska deoba. . koje . o: • ~ • I · .P. u~ :nestajaiije nukleolusa (koji su bili zakaceni za .. a pri cemu se u obe deobe opisuju profaza. su' bili spojeni hijazmama. Mejoza je deoba karakteristicna za polne celije.ko krajeva koji su povezani za unutrasnju nukleamu membranu. Celijska deoba kod vecine eukariota . segregacije {razdvajanja) hroriiozoma kontrakcijom niti deobnog vreteha koje vode . lz tag razloga se mitoza oznacava i kao ekvaciona (ujednacena) deoba.la prqc~s~ kro~ing-overa..'. i odlikuje se dodatnom · spiralizacijom i pomeranjem. smesteni su u ekvatorijalnoj ravni. Pahiten se odlikuje po tom~ sto se formiiaju tetrade {bivalenti) i dolazi !.. U 5 fazi se vrsi replikacija DNK i sinteza histonskih proteina i proteina hromozoma.Jru.ekvatorijalnom .dye '6erke ceiJjei :koje. Tokom telofaie dolazi do ponovriog organizovanja jedrove membrane uz pomoc fragmenata EPR-a.tenu se hrpmozomi jos vise skracuju i zadebljavaju. U toku :teptotena pocinje spiralizacija hromatina .nose identicni nasledni materijal u jedrima.mpl~ks. U ekvatorijalnom delu citoplazme dolazi do · konstrikcije (suzavanja) citoplazme i obrazovanja deobrie brazde. hromozma ·'pr~ma ·periferiji jedra. dok sintetska aktivnost eelije biva svedena na najmanjt. u telofazi mejoze I se vrsi reintegracija jedra· i eelijskih: cirganela. Nukleolusni regioni iseezavaju.as...s. a jedrova membrana se polako dezintegrise na molekule . a i proteina neophodnih za proces deobe. 70).jE:ldra se.Humana genetika .d. d centriola do centromere. anafaza i telofaza (slika 69).Repetitorijum prirode i neophodni ~su za rast i diferencijaciju celije. pa izgleda kao da :se polovinci'njih izgubila.Jiozu~ Na taj nacin:nastaju. i 'pocinju. .:sinapsiraju 'pre. • . a· afaza T . ' .·· · ·.~!tan proces. aeabe~ .i pocinju da .: ' ' . U interfazi se vr5i udvajanje i centriola koji ucestvuje u stvaranju deobnog vretena u procesima celijske deobe mitozom ili mejozom. metafaza. zbog pns·ustva celuloznog zida:.pa se dobijaju dve cerke celije sa diploidnom strukturom hromozoma. Duzina deobnebrazde .regionu·celije t krecu se pretna·zidcivirila·celije. pri o cemu ovaj proces omogucavaju motomi proteini i ATP.. sinaptonemalni kompleks delimicno . polove celija.Ieptq.Se. sr~ini :celije obrazujt{ekvatorijalmi ravan: U .. pri eemu je bitno napomenuti da su najvazniji ani koji ce izgradivati deobno vreteno (alfa i beta tubulin}. diploten i · e o dijakinezis.hrornqzomi. U blizini. Mejoia ' 11 se desava tako . Metafaza je najkraca faza celijske deobe :i karakteristicna je po tome sto su hromozomi maksimalno spiralizovani.polnih (spermatozoidi.. uz cifokiriezu. kojim se postize konstantnost u prenosenju genetickog materijala na buduce cerke eelije. aparata ili'EBR FpredstaVIjaju vezikule·koje. se uoeavaju hromoneme (hromatinski konci) koje su spojene sa unutrasnjom· nukl~arr}ol')'l m~l')'lbranom :· U zigo. moze uociti centrozom sa dva para centriOla ·kojr cediii"kraju p· afaze zauzeti · PRiazaj ·na ·suprc5tnlm 'fJdloViirr~f't~iije. ' ' •. Spoljasnji biofaktori deluju uglavnom tako sto se vezuju za membranske receptore i signalnim mehanizmima dovode do ekspresije specificnih gena.lika ove deobe je da se odrfava · konstantan broj hromozoma~ tako sto s~ broj hromozoma udvostrucuje pre deobe. · Hromozomi koji se sada okvimo nalaze na .i mogueu meriJ. tada prestaje njena osetljivost na spoljasnje signale i celija napreduje uS fazu.se akumuliraju i spajaju u·. ciklusa dolazi do zavrsetka sinteze proteina koji ce uvecati celijsku masu.tP.wat~ijU~najdu7i. Metafaza mejoze I se odvija identicno metafazi mitoze. Kada eelija pod delovanjem faktora rasta dostigne restrikcionu (prelaznu) tacku. ~igoten. 17 . metafaza.. Odvija se u dve etape: mejoza I i mejoza 11.Fragmozomi su. izuzetno' . kao i onih ~oji okruzuju same centriole (asteri) . se ··sada hroniozomi koji se sastoje od dve hromatide postavljaju u metafaznu 11 deobnu ravan i u anafazl :11 :deobom centromera r povlacenjem hromatida-sada hromozoma sa se ' • • ~ ' o • t .pif: cemu ·:. . deo prb6esa'koji' nazivamo g· metogen·eza. nastupa . l. sac a. udvojeni hromo~omi od kojih se svaki sastoji ad·po dve ~romatide.koji ostaju. da.. anafazi dolazi do . Proces sinapsin1nja naziva se sinapsis i ·hromozomi koji su sad a jedan blizu drugog obrazuju sinaptonemalni ko. pnblizavaju·.d interfaze ili se interfaza ne uocava. :.. r-·l?astoji se od mejoze I i mejoze 11. ·rmormiti ·dEmo no -vreteno:·ueobno · r vreteno se sastoji od mikrotubula koje se pruzaju ad jednog do dnigog centriola {polami mikrotubuli). dok· se·he formira deobna ploca koja sa obe strane . kao i unutarcelijski faktori ukljucujuci i nukleame. Mitozom se dele somatske (telesne) · celije.eo. sto .·. homologi hromozomi . akumulira ·celi. oahi~IJ. as obzirom da redukuje 2n na n·obelezava se kao redukciona deoba.telofaz~ (slika . · .ten •.sem . opJ>.iJaza profaztf mejoze I. a i onih koji se povezuju za kinetohore hromozoma {kinetohomi mikrotubuli). 9ezinteg~se: . U anafazi mejoze I celi hromozomi razdvojeni na mestima ~oji~a.'jajna celija). ali se za · razliku odmitoze u mejozivrsi redukcija diploidne (2n) na haploidnu (n) hromozomsku garniti. formfranja nukleolusa i ostalih organela. U G2 fazi celijskog. a glavna od. Mitoza se sastoji iz cetiri faze: profaza.telofaza.redukcione.. U·diplotenu se zavr5ava krosing-over. o~tajli spojeni preko hijazmi. Profaza mejoze I je · n najkomplikt. : Replikacija je. :.fi .se postepeno smanjuje i · uzrokuje citokinezu :{podela:citoplazme): kod biljaka~dolazl do formirahja fragrilozoma. dfaza::. Take hromozomi dobijaju jos jednu hromatidu (sestrinska hromatida) koje su povezane centrom~J"9rn. U toku profaze mitoze dolazi do spiralizacije hromatina i obrazovanja hromozomskih struktura koje ~e postepeno skracuju i kondenzuju.

.. Sell .~':. · Gametogeneza fonniranje visokodiferenciranih polnih celija. .. .. :.. _... .. 0.' .'n) .:/{ ~ . Gametogeneza .. .spermatogeneza Sg -~ : · Scl .J ~- . ..· . ..embrionalni period Og 2"ii· i~ . ovulacija . mirova. · : ·..Metafrte I Metazoe ·. gameta • izogamija • anizogamija • oogamija . .. L... rn: .'! /'~ Slika 73 . .• :: ...nja u toku oogeneze ·Spermato·geneza ·.. l' r Slika 74. / . .Podela gametogeneze Slika 72 .! Slika 71 . (-. .. Std (n. -·.Endokrina regulacija ·' ~ i · - .:.Oogeneza • . : :~ ·~· ~~fll· ~ :. '. Gametogeneza ..-· 2ri iri zn· in · ·· ·iJ· t 2 fa:za razmnoiannja: ' mitotske dcobc gonlja: stadijum mirovanja -diktioten · ·~ rodjenje - ·polna zrelost f>_l- . sz /:nJ · .· -.oogeneza • pocetak y=· Aktivnost oogeneze..) I Gj)-~· (Q) .Spermatogeneza .kraj mejoze I · . .:.Aktivnost"qageneze ~aze.' Rm-iMMfi&itrt!Mf3Wati!! nasti:ivak sazrevanja u ciklusima .' (il> . . sperm~togeneze : Slika 76 .. . .·regulacija ~ .... . ~ .oplodjenje ~ metafaza 11 .

celije preme1 ·uticajima spoljasnje sredine (npr. koji se nalazi · u na glavi spermatozoid a. mitohondrije rialaze u vratu spermatozoida . koje se nalaze u vratu i · sintetisu ATP. aiL ima identican genetski sardzaj kao i oocita. zonae pellucidae i plazrn-a. odlaze na suprotne polove celije. a intenzivno se r.· nastanka visoko diferenciranih polnih celija (gameta) iz nediferentovanih germinativnih celija.od puberteta do menop~uze i ~mdropauze (slika . a . spajanje pronukleusa (jedarnog sadr:Zaja spermatozoida i ·sekundarne oocite) . tj. Spermatozoid definitivno sazreva! postaje pokretljiv.i. zapocinje u fetalnom periodu. .se n. jer se u njoj vrsi replikacija DNK molekula. U fazi razmnozavanja dolazi do intenzivnih mitotskih deoba primordijalnih germinativnih celija koje time postaju gonije. Da bi spermatozoid dosao do jajne celije u Falopijevom kanalu (tuba :uterina). Nakon mejoze 11 nastaju kod muskaraca cetiri spermatide.itiVne niaterije Li :serrieoim kanalicima obezbeduju Sertolijeve celije.. J . :. celije . Kod zena se uocava qa nakon mejoze I ne nastaju dve morfoloski iste celije. .membrane oocite i heposrednb tmiogu'citi oplodenje. . Spermatide su loptastog oblika i . Oplodenje se sastoji od nekoliko etapa: kapacitacija..menstrualnog ciklusa). temperatura. a kod zena jedna ootida (koja je sposobna zaoplodenje) i tri sekundarne polocite. · . Na racun Gold?ijevog aparata ilastace akrozom. ductus epididymidis.tl do inf~rtil!teta (neplodnosti) ili. staros~o doba. Spermatogeneza se odvija u semenim kanalicima testisa.71).kada 11apusti pasemenik tj.(deo . ' ~ :: ! . Proce~'s ukome se spermatide tr'ansformisu u spermatozoide. .apoptozu (geneticki programirana celijska smrt). dok grupa Lajdigovih celija vrsi sintezu androgena (inuskih polnih t16hnona) ·(slika 76). U fazi rasta se spermatogonije i oogonije povecavaju i prelaze morfoloski u primarne spermatocite· i primarne oocite. prethodi oplodenju (slike . . . . zato sto se u njoj vrsi jos i previte!ogeneza i vitelogeneza. . • . ' . akrozomska ' reakcija spermatozoida u genitalnom traktu zene. .J7: i 78). :. Oogeneza se odvija u folikulima jajnika. koja ne ulazi u diferencijaciju definitivnog zenskog gameta i ne ucestvuje u procesu oplodenja. Kod muskaraca nakon mejoze · I nastaju sekundarne spermatocite (dve celije). Faza rasta ~dgovara interfazi celijskog ciklusa. : · ·! . . kod muskaraca to su spermatogonije. Muska i zenska gametogeneza se sastoje od tri faze: faza razmnozavanja. Faza rasta je znatno upecatljivija kod zenskih gameta. Na suprotnom polu celije nalazi se centrozom i jedro. dok se.. : . ili u slucaju mejoze oogeneze samo jedna jajna celija i dve do tri polocite.· neophodan je normalah motilitet (pokretljivost) (slika 79). penetracija spermatozoida kroz plazma .. .nuklelisa·i da bi se·diferencirale u spermatozoid potrebno · je da produ kroz fazu spermiogeneze.Kod coveka proces ovulacije . • • . U toku: ove.! .a!$z~ ' hidrofit}cki enzimi kojr ce . prolazeCi kroz niz morfo"fizioloskih modifikacija. Vitelogeneza (stvaranje zumanceta) je proces kojim se sintetisu materije bogate energijom. • .' centrozom i jedro nalaze na jednom. oogeneza .ljutr. zracenje) i da njihovo ostecenje moze doves. aktivacija oocite. I na spermatogenezu i na oogenezu uticu brojni fizioloski faktori 'kao sto su hormon. Kao proi~vod telofaze 11 se dobijaju cetiri haploidne celije. a kod zena sekundarna oocita Oedna eelija). ·Takode treba . · : • . a ako ne moze da se ispravi celija ulazi u .Repetitorijum haploid nom strukturom. . 21 . . Krupnija celija je sekundarna oocita. Faza sazrevanja obuhvata prolazak muskih i zenskih gameta kroz proces mejoze. Oplodenje se kod sisara··odvija u ampularnom delu ·jajovoda.• . naziva ·se spermiogeoeza.. Gonije imaju 2n garnituru. . U akrozbtnu . membra nu. . a kod zena oogonije i zajednicka karakteristika muskih i zenskih gonija je okrugao oblik sa krupnim ovoidnim nukleusom. pri cemu se obrazuje diploidni zigot. 74 i 75). ·. Da bi se. . tako da se hromozomska garnitura udvaja. 18 . . • . : ·. coronae radiatae.Spermatozoid ima i dugacak bic koji je mikrotubularne grade. . · . · I ·._ i : . 'celija· s~ · polariiuje. a Goldzijev aparat na drugom pol. ..Human a genetika.Gametogeneza Gametogeneza je proces . celijski ciklus je precizno kontrolisan putem kontrolnih punktovana kojima se kontrolise prethodno odvijeni proces i ukoliko postoji odredena greska ana se ispravlja. . 22 . . potrebne za rani embrionalni razvoj. faze dolazi do smanjivanja volumena · nukleusa•i njegove kondenzacije. funkcionalnim jedinicama jajnika (slika 73. Spermatogeneza je proces formiranja muskih gameta (spermatozoida). . ) .. funkcionalnirri jedinicama testisa (slika 72).spermiogeneza normalno odvijala'. faza rasta i faza sazrevanja.razvijanja defektnog potomstva.· ' .vrsiti_t~zlaganje cummulus oophorus-a..tastavlja za vreme reproduktivnog perioda jedinke . izbacivanje seklindarne oocite iz tercijarnog ·folikula jajnika. . Oplodenje Oplodenje (fertilizacija) je proces spajanja muskih i zenskih h~ploidnih gameta.· pri cemlLse mitoh9ndrije. pH i brojni biohemijski faktori. . vec se one znatno razlikuju uvelicini. proces tormiranja zenskih gameta Uajnih celija-ovuma). a energiju za njegovo pokretanje daju mitohondrije. a sitnija je primarna polocita (polarno telo). Oba tipa gameta imaju haploidnu garnituru.. ' . oocite i .naglasiti ~ d~ ·su gaineti' osetljiVe .

. ~- ····--'-·-·--· Slika 77. -"~ Oplodjenje i brazdanje zigota . ~:--.I.j ·~":~::: Slika 78 ... .'···~·-·-- hipofiza . ·..~ ·~ . ... ·~--··~---.cJ.·' · . -:-'~..:!.... :~~ll$J:-~-i(~l~~: •.- . Menstrualni cik/us J. fT:3'\:-1~·:. : ...-.. ·-···: ...... :· . :LH ·- ---·•:"'.""O ~..' ovarijum m·uladja '~i:f¥1~~~~J~~~{.:~-1.• .~:!) :~..Brazdanje zigota ... Slika 80 .. <:-!"•• -.··_ .• r ' .: ..~~--------.~~~~~~ '>~ ..Proces oplodenja ·-.iLD ~=---~.·· :.? ..: .":--'""·...~. i.I :.:~·· -:'-:::. .._ . ..Tok menstrualnog ciklusa Oplodjenje kod sisara i _coveka u jajovodu ..Endokrina aktivnost u toku menstrualnog ciklusa · .:c~.. • neophodna kapacitacija sz.~-. :.. dnn .. t...: .. Slika 79 ..proksimalni deo Milerovog kanala .. :.. ..~-----~ .. Meristrualni ciklus f.. ·..-J.- ·-iD· ·.

To znaci da ce u jednom stupnju razvica blastomere ·diferencijacijom dati veliki broj razlicitih celija koje i dalje imaju sposobnost diferencijacije (multipotentne celije). Ona pokazuje brojne regiorie koji sadrie odredene supstance. sto se uglavnom odnosi na prve celijske deobe..omnipotentnih postaju'multipotentne celije. kao i neki drugi enzimi koji olaksavaju penetrabilne sposobnosti spermatozoida. · · · · 19 . Vrh plazma membrane spermato?:oida se fuzionise sa plazma membranom jajne celije. multicelijski . specifican raspored organela. o Vee je receno da u procesu diferencijacije veliku ulogu ima citoplazma jajne celije. to bi znacilo da ce sve celije vrsiti istu ulogu i biti morfo-fizioloski istovetne. Jajna celija tokom ulaska spermatozoida otpusta glikoproteinske granule koje obezbeduju odvijanje kortikalne reakcije. .- Humana genetika . biofaktorima u citoplazmi oocite koji poticu od majke i sadejstva. Normalan proces oplodenja vrsi jedan spermatozoid. pri cemu se celije nakon svake sledece deobe smanjuju i na taj nacin nasle~uju kvalitativn·o razlicitu dtoplazmu zigota. Geni koji ce biti neophodni za sintezu proteina odredene diferencirane celije-ce se konstitutivno (stalno) transkribovati. itd. Prve dve celijske deobe su uglavnom determinisane sadriajem iz citoplazme oocite koja sadrzi iRNK prethodno sintetisanu upravo ·u ovu svrhu. odnosno zapocinje brazdanje. diferencirace se samo:u eritroeiteili neurone.celiju biti utisani putem metilacije ili iranskripcionih faktora. postepeno pocinju da se menjaju. Nakon formiranja zigota nastupa njegovo brazdanje mitotickim deobama i postepeno razvice novog organizma. koji. a proces se naziva miksis. Celija koja je diferencirana osposobljena je da vrsi odredenu funkciju. kolicine RNK itd. celijsku polarizaciju i reakciju na signale iz spoljasnje sredine. Spermatozoidi koji nisu akrozomalno odreagovali nemaju mogucnost da se spoje sa plazma membranom jajne celije. pri eeinu se iz akrozoma oslobadaju enzimi spermolizin i hijaluronidaza. posledica kineticke akcije repa spermatozoid a. pa zatim otpusta nuklearni sadrzaj koji ce formirati muski pronukleus. razlika izmedu diferenciranih celija je ta sto svaka vrsi biosintezu specificnih proteina koji celiji dajli funkcionalnu i morfolosku specificnost. . jedne jedine celije'. a celokupan proces koji obuhvata · navedene promene naziva se kapacitacija. Medutim. Zigot ima osobinu omnipotentnosti. nastaje aktivacija jajne celije. dok. Za zavrsetak mejoze 11 neophodno je da dode do oplodenja jajne celije. nastupa brazdanje. jer nervna celija ne sintetise hem_globin. S obzirom ·da svaka covekova celija sadrii isti fond gena. Spermatozoidi se takode transportuju do mesta oplodenja uz pomoc cilija i ritmickih kontrakcija · misica zida jajovoda i kontrakcijama uterusa. ce kasnije davati ·sve manje i manje razlicitih celija kako diferencijacija napreduje. . Celijskim deobama . .Repetitorijum Spermatozoidi se u kontaktu sa polnim kanalima iene aktiviraju i time postaju mobilni. obezbeduju svojom energijom gusto· napakovane mitohondrije. interakcU~ (komul)ikaeije) izniedu blastomera (celija) kao i razlicitim drugim signalima koji dolaze iz organizma koji se razvija i taste. ·koje se nalaze u vratnom regionu spermatozoida. Konacno nakon sto se embrionalne celije'svedu na jedan put diferencijacije one ce postati unipotentne (npr. Jedra blastomera ce pokazivati razlicitu aktivnost gena. U glavi spermatozoida nalazi se i centrozom koji ulazi u citoplazmu jajne celije i omogucice stvaranje deobnog vretena tokom prve mitoticke deobe oplodene jajne celije ili zigota. Mehanizam : di{erencijacije embrionalnih celija ··se objasnjava regulacijom genske ekspresije i regulacijom embriogeneze. Od zigota. Dakle celijski razvoj ili diferencijacija je determinisan sadrzajerri naslednog· materijala.. dok ce oni kojLnisu specificni.iz. 23. tokom ranog embrionalnog razvoja blastomere postaju manje. ali da bi on mogao da oplodi jajnu celiju. sa oko 200 razlicitih · celijskih populacija kod coveka i oko sto biliona novih celija (slika 80). Akrozomska reakcija spermatozoida nastaje kada spermatozoid dobije signal da je stupio u kontakt sa celijskom preprekom. Motilitet. Tako su kod central nog tu . oocita 11 nastavlja mejozu 11 i zavrsava je. diferenciraju i·time . Od ienskog nukleusa stvara se zenski pronukleus .organizam. nastace. Citoplazma je vazan faktor koji determinise aktivnost jedra. Ovaj dogadaj je pocetak ontogeneze buduce jedinke koja traje do smrti iste.Spajanjem muskog i zenskog pronukleusa nastaje nukleus.000 spermatozoida koji ce prokrciti put svojim enzimi11.1a do i kroz omotace jajne celije. Ova reakcija sprecava polispermiju (prodiranje vise spermatozoid a u jajnu celiju). za _ . ulazi u mitotsku deobu. potrebno je oko 10. Pre oplodenja citoplazma jajne celije nije ni hemijski ni fizicki uniformna.. U momentu kontakta jajne celije i spermatozoida. Nakon oplodenja.neuron a geni za alfa i beta globinske lance hemoglobina 100% metilisani. bas zbog razlicitog delovanja citoplazme. Konacrio diferencirana celija maze se dediferencirati malignom transformacijom. inkluzije. je . nakon kratkog vremenskog i_ntervala.). Determinacija i diferencijacija embrionalnih celija Zigot koji nastane u procesu oplodenja.

) • 0...... ~~ -:~:· :: ~......... '· . .X-~.6°/o J~ . . ~ .'.. .. : . Slika 82 .r 47~~0-: ~-... Cl 5.'•' NUI\in:i. ....!­ . ~·- ·. ..X}lli.t . . . ... .. '"' . ·.JOIDIJE (4n) TETRA r - -~. :1' '· -?:- Aberacije hromozoma su prisutne: ··. •• • .. !'!': ~ .Prist. .. . .:.XXX 4'~' ~Pr~rv .0/o kasrlih spontanih.·. ... ./ . novorodjencadi e 60°/o ranih spolitanih pobacaja .Xi( ~ Slika 81 .. ...~.-'~:. •..- . .itnost hromozomskih aberacija -:.. · SB..1 fi:O).. .le· '..· 48.~ ·~ MONOZOMIJE .. ... • ANEUPLOIDIJE TRIZOMIJE (2n + 1} 4-L)I. pobacaja : ~ ~-~ e 4-5o/o mrtvorodjene:dece ...· .. IGO... npr. . .Klasifikacija numerickih hromozomskih aberacija ·..RICKE ABERACIJE HROMOZOMA • POLIPLOIDIJE TRIPLOHHJE (3n) ·. {2n -1) TETRAZOMIJE (2n + 2) PENTAZOMIJE (2n + 3) !l-S~X ..: . .·""'-:-r•lf.: .~ ~ '-:· ~~. .v'''"'· : 49.. . . . ·.

blastomere-u sebi nositi aneuploidiju~ Faktori koji dovode do navedenih gresaka u mehanizmima deobe. osteoklast. a drug a u manjku. tkivo placente. se naziva i Edvardsov sindrom.ama kao i malformacijom :bubrega itd.. - . Asinapsis je pojava da dva hromozoma ne sinapsiraju u profazi prve mejoticke deobe. Aberantni hromozomisi. 20 . autoimune bolesti. a rede pentaploidni {5n) organizmi. itd.. dok se kod nekih vrsta biljaka javljaju kao korisna odstupanja. on je nulizomican (n-1). Desinapsis je pojava da se sinapticki kompleks rasformira pre vremena.blastomere biti aneuploidne. sto nazivamo anei. . · Trizomija hromozoma 13. Druga grupa hromozomskih aberacija su aneuploidije. U sredinske faktore spadaju razne vrste ]onizujucih _ zracenja. ne formirajuci hijazme. kojaje nastala od. pri cemu ce. Normalan sadri:aj naslednog materijala naziva se euploidija. . dode do aneuploidije u jednoj od blastomera.XY+13). srcanim ma. srcanim malformacijama itd. tetraploidni {4n). rascepom usne j . ' . · Geneticki faktori se odnose na pojavu da u porodici postoje zajednicke pojave vezane za proces nastanka aneuploidija: Tako je uocena je predispozicija za vremenski neadekvatnu podelu centromera (anafazno zaostajanje) ili greske u stvaranju deobnog vretena. Jos jedna od pojava koja je vezana uz pojavu aneuploidije je i mozaicizam (miksoploidija). Etiologija numerickih hromozomskih aberacija Numericke hromozomske aberacije (hromozomske mutacije) su poremecaji koji se odlikuju odstupanjem od karakteristicnog broja hromozoma za vrstu (slika 81 ). Trizomija hromozoma 18. ' . Pod pojmom aneuploidija se podrazumeva povecan ili smanjen broj pojedinacnih hromozomskih parova. Medutim i poliploidija se maze uociti kao normalna pojava kod nekih populacija humanih celija (hepatociti.8elij~ · koja je ostala uskracena za dati hromozom je monozomicna (2n-1) ukoliko se radi o somatskoj celiji. a samo 10% dozivi prvu godinu. - . ali se ne vrsi deoba (supresija deobe). na taj nacin sto se DNK replikuje. ukoliko dode do nerazdvajanja odredenog hromozomskog para u anafazi mejoze (I ili 11) ili mitoze jedna od celija ce imati jedan hromozom u visku. zbog prevremenog razdvajanja hijazmi. Etiologija (uzrok) humanih poliploidija je raznovrsna. Kod coveka poliploidije nisu vijabilne (kompatibilne sa zivotom).jedna Jinija celija. Etiologija tetraploidija . sve one celije koje su nastale od abe'rantne .Repetitorijum 24.na rani m stupnjevima razvica. infekcije virusima.J najcesci uzrokspontanih pobacaja (slika 82) . Fenotipska ekspresija numerickih.· . Ove aberacije mogu da zahvate pojedinacne hromozome. Najcesce numericke aberacije autozoma su trizomija hromozoma 13.nepca. Prema novim istrazivanjima ustanovljeno je da je starost majke. pri cemu dva spermatozoida oplode jednu normalnu jajnu celiju. Tako se mogu dobiti triploidni (3n). toksicne i ktiniulativne (nagomilavajuce) supstance. Odlikuje se mikroftalmijom. nesto manje oca.. Fenotip se odlikuje malom telesnom tezinom. multiplim anomalija. . polidaktilijom. pri cemu se sa staroscu majke statistika menja u korist povecanja ucestalosti.aberacija a~tozoma Kod coveka postoje brojne numericke aberacije autozoma. izuzev monozomije X hromozoma. kao .Human a genetika. vrlo bitna za dobijanje zdravog potomstva. (47.000 novorodene dece. pri cemu .i $tarost -roditelja~ og~otovo m~jke. dok ce on a linija koja je·nast~la od abercmlne. ·Ucestalost ovog sindroma u populaciji je 1/12.. 25. 18 i 21 . drugacije se n~ziva Patau sindrom. Tako ce nakon odredenog vremena. a nakori oplodenja zigot je monozomican (2n-1).postzigotnog nerazdvajanja .. Ucestalost u populaciji je n - . Jos jedan od nacina nastanaka je polispermija. Poremecaji u sastavu i funkciji deobnog vretena jedan su od najcescih uzroka aneuploidija. Monozomije Gedan hromozom u paru nedostaje) autozoma nisu vijabilne kod coveka. Sve tri trizomije su rezultat nerazdvajanja hromozomskog para u toku anafaze celijske deobe. razdvojen hromozomski par u metafaznoj ekvatorijalnoj ravni daje univalente (pojedinacni hrbmozomi). StO Se oznacava kao poJipJoidija.normalne blastomere biti normalna. on sa normalnim gametom obrazuje trizomican zigot{zn+1) :{)ruga . Tako ce jedinka postati mozaik za broj hromozoma. Poliploidije su aberacije kod kojih dolazi do umnozavanja celog seta hromozoma. pri cemu se stvaraju diploidni ili triploidni gameti. a aka se radi o gametu (koji je dizomican n+1). Oko 50% obolelih umre u prvih mesec dana postnatalnog zivota.se posebno naglasava.su najcesce trizomije. Nerazdvajanje je uzrokovano asinapsisom ili desinapsisom. Kao posledica oba slucaja.XX+18}.Jploidijorn kaO j CeO hrOniO?Omski set. pri cemu ce oba univalenta segregacijom u anafazi biti privuceni na jedan pol celije. su p6deljeni na sredinske i geneticke. (47.). pa take nastaje triploidija.od ·6erki . . Celija koja ima jedan hromozom u visku je trizomicna (2n+1) za dati hromozom. Naime. a ukoliko se radi o gametu. multipnim anomalijama. To je pojava da us led .. jer on a nastaje u postzigotnom stadijumu. Ovaj tip mutacija maze nastati kao posledica endoreduplikacije (replikacija DNK bez deobe) u gonijama.

t~ -~'J!(·~­ Jri...: Slika 85 .~utt.. ·:... ~~:.translokacije .~ +:~k~...ij~· . -~..~•tto• CIIIQIIII:IIU.uzroci ·: ·: BALANSIRANE iA.~:·: :~:~t Uzrok: . -~·-: ...· '· ..~:eo.~-~~t Slika 83 ..r .~ . hromozomski • 'NEBALANSIRANE ' .duplikacije · •.... ~.ring hrompzom ~-~~ .EtioJogija strukturnih aberacija hromozoma ..t.· ! . : • INTER hromozomske ..:.:·:_: _. .' De/ecije..parcijalne monozomije Prstenasti..~: . !.~~ l~.. .t!"ca · Oup~_. t:..inverzije Strukturne aberacije .~ :.:~ .}..: .Tipovi strukturnih aberacija INTRA hromozomske .· in~e~iJ~ :-:~:. .(:..:_ trar1St9kac.:i~~.staj<uije u ~as tu · .· -~ ... --~.i:. .·..- .~ ~~.:--. ~tt..: . Slika 87 . ..::. ~."'...-~:~.Nastanak i podela delecija Slika 86... ~~-: ::.· .delecije .-.·· -~ ' • .:.Podela strukturnih aberacija hromozoma Slika 84.. ..n4c_.' Duplikacije ~ parcijarne trizomije · ---~~. 0 ' ' ii \ .ij~ : :·~ · . riestabilan ii deobi celije ~ "ring sindrom" ~ac. ..Duplikacije · . . . " :.· .. / :· ' T.PREKID na hromozomu/hromozomima :. : · . ·-~~ -# i:_li··~ ~~ :~..Ring-hromoz6tn . · ~-- terminnlne intersticijnlnc ·: · ..duplikacije . .:::~i:~Ij~j1'.

spajaju se mesta. 20 i 22. 15.<ukoliko dode dorazmene. neartikulisanom govoru. 10. . Treba napomenuti da osobe koje imaju Daunov sindrom uzrokovan translokacionom trizomijom ili mozaicizmom imaju znatno blazu varijantu prethodno opisanog fenotipa..i gubitak del a jednog od kraka.·'Mog·u~se··p'odeliti 'na·--stabilne ·(aberantni'hromozom -rrorma!:a: prolazi naredne deobe) i nestabilne (aberantni hromozom podleze novim prekidima u narednim deobama). a 10% dozivi prvu godinu postnatalnog zivota. Oko 30% obolelih umire u toku prvih mesec dana. mongoloidnim ocima. : . onda' dolazi :do nerazdvajanja· stO ce . Drugi tip su . karakterislican plac koji podseca na maukanje i ponekad rnentalna retardacija. .' Nebalansirane aberacije se odlikuju gubitkom ili povecanjem fond9 genetickog materijala. ·prema . jer se stetni· recesivni aiel n.XY+21) ili Daunov sindrom (sindrom mongolbidne idiotije).. · Najcesce·:.dolazi .linearnbg integriteta·hrcimozorna. na . · Oni se spajaju .visina. f. cetvrtog i petog prsta leve ruke . Nebalansirane strukturne hromozomske aberacije . Nepravilan krosing-over podrazumeva da se homologi hromozomi asimetricno sparuju.000 novorodencadi. del a nekog kraka. tip su ·• terminalne delecije~ koje podrazumevaju prekid.:. nastanka novih prekida na ring-hromozomu.patogJuomozoma. Medutim. ali su one prava retkost u populaciji take da se njihovom proucavanju ne pridaje veCi znacaj od osvrta na pojedine slucajeve. Da bi doslo do insercije (ins).dode ·do :riormalne replikacije ring-hromozoma nakon · deobe obe cerke-. lntersticijalne delecije uslovljavaju -gubitak. prekida isecaju ~egmeht jednog homologog · hromozoma. a povecava se znatno sa staroscu majke.za niti deobnog vretena. . a treci obezbeduje ugradivanje tog segmenta u drugi homologi hromcizom. Postoje dva tip a delecija. cemu IQ varira od 25-50.a bomologor:n · hromozomu ispoljava: u fenotipu.. · · Ring-hromozom (r) nastaje kada dode do deletiranja oba telomerna regiona na hromozomu (slika 86). celije iniaqe ideritican ririg-hromozom>Medutim. 9.do prekida na hromozomu i gubitka odredenog segmenta (slika 85). Udvajanje maze nastati nejednakim krosing-overom.je k'!rakteristican .Human a genetika . · · Duplikacije (dup) su aberacije u toku kojih dolazi do udvajanja odredenog segmenta hromozoma (slika 87)..od kraka hromozoma. hipotoniji. koja se uocava da ide neprekidno duz dlanske strane drugog.· · sestrinskih hromatida ring-hromozoma.· vecom sklonoscu ka leukemiji i "majmunskom brazdom" (dermatogliD. sto ·znacL njegov gubitak u toku deobe. Ujedno .Repetitorijum 1/6. U slucajevima insercije jedan od homologih hromozoma dozivljava deleciju.ocuvarije.postojanje . coveka . ' Trizomija hromozama 21. a drugi duplikaciju. Ove aberacijesu uvek stetne za nosioca. Sto •se . Fenotipski se ogleda u mentalnoj retardaciji.. Deo koji se izgubi ne sadf'Zi centromeru.p:-. Ked coveka su ustanovljene jos i trizomije 3. ucestalost se povecava sa staroscu majke. Postoje i slucajevi mazaicizma koji su zastupljeni sa oko 1-2% obolelih. . S obzirom da su telomernLregioni zaduzeni. za .strtikturne aberacije. Delecije (del) su nebalansirane strukturne aberacije u toku kojih . Sto je ring-hromozom veci (deletirani segment ·je manji) .(47.. ' ne maze da se veze . sindromom imaju duzi zivotni vek (oko 30-40 godina) u odnosu na obolele od prethodno navedenih sindroma. ·.. neophodna su tri prekida na homologim hromozomima~ Ova . pri . 26. Balansirane aberacije su one kod kojih ne dolazi do gubitka ili povecanja broja gena zahvacenih ·aberacijom. Najveci broj (95%) obolelih ad Daunovog sindroma imaju prostu trizomiju 21. su . pri cemu do·greske najcesce dolazi u mejozi majke. (5.i nes~o. insercijom segmenta jednog homologog hromozoma u d·rugi ili · ukoliko je jedan od roditelja nosilac balansirarie. Ova pojava se naziva pseudodominacija.je i najbolje ispitana od svih ostalih aberacija. Ukoliko .i grade prstenastu strukturu nazvanu ring-hromozom.n? jednom ·mestu . je najcesca humana autozomalna aneuploidija. Prvi. 19. pa •nakon. koje nastaju dvostrukim.deletira ·sredisnji region.stetne posledice · manje. 12. znacajnija je podela na balansirane i nebalansirane hromozomske aberacije. rasporeda genskih lokusa) hromozoma nazivaju se striikturne abera·clje'(s1ik!F83T8il) .rezultat nejednakog krosing~overa .. iz razloga sto osobe sa ovim . njihovim gubitkom krajevi aberantnog hromozoma postaju lepljivi sa teznjorii da konjugiraju.ucicen •:poremecaj ~ vezan -:za . pri kojima dolazi do promene uobicajene grade (duzine. Nastanak ring hromozoma uoeen je n·~ svim ·hromozornima. · dok su oko 5% obolelih osoba nosioci translokacionog oblika mongoloidne idiotije. duplikacije i izohromozom.prekidima jednog . Kod coveka usled nepravilnog krosing-overa izmedu segmenata za ~-lance 21 . sredisnjeg.• intersticijalne delecije. . iing-hromozom. to.~led lica nosioca podseca na maciji lik. 7. ·ring-hromozoma je Iaka mentalna retardacija . kojima su se dogodili ·prekidi: Delecije· f)astaju kao.enotip.) . Aberacije. mC)nja telesna .tome gde nastaju. 16. 8. treceg. U · nebalansirane i strukturne -aberacije spadaju delecije. DO tome sto i?.Ucestalost u populaciji je 1/700. srcanim manama (od kojih najcesce umiru). ili aka je jedan od roditelja nosilac balansirane strukturne aberacijEL Delecije aiJtozoma su uvek stetne za nosioca i letalne su u heterozigotnom stanju..u buducim generacijama dovesti do . Najpoznatiji delecioni sindrom je Cru du chat (maciji plac) sindrom koji nastaje delecijom krat!~f>9'--~ra~3 .

~ti~~. ..~. ' ' ~eciprd~ne translokacije r10i-in:iini hromozomi homozigotna translokacija _. ....ifi:~i Slika 90 ..·~.J ··-··-·~·...'·..ft~~s~:..Nastanak izohromozoma · Inverzije: pericentricile paracentricne.. . • nosilac ima NORMALAN FENOTIP .~I:':~. .P ···. 11 H Slika 89 ..~ ~­ ~ .... : q ...~li...Recipmcne translokacije --~· - .:~~~.. ..Nastanak i podela inverzija · · ····. .. ~·... .~f~~R~~. .~. . ·~·-· · lzohromozoin ...• q q Slika 88 ..

(umesto uzduznim) deljenjem centromere. Nastaju nepravilnom (poprecnom) podelom centromere i u prvom stupnju su telocentricni hromozomi. lzohromozomi nastaju u anafazi 11 mejoticke deobe poprecnim . U. Reciprocne transloka9_ije · : : ·: · . . Ovi hromozomi imaju dve centromere.deo.do promene normalnog rasporeda gena u okviru hromozoma onda se takva aberacija naziva inverzija (inv) (slika 89). Nakon mejoze 11 nastaju cetiri gameta. i ponovo se inkorporira u hromozom. od kojih svaki ima jednu aberantnu hromatidu sa delecijom. Hemoglobin Lepore i Kenya uzrokuju nastanak jake anemije. lnverzije Ukoliko dode .trj ..:~ojih dolazi.segregac~e. dQ. U toku profaze I dolazi do sinapsiranja oba para hromozoma izmedu kojih se desila translokacija i formiraju kvadrivalent (krstasta struktura).a .!skaraca koji imaju azospermiju (odsustvo spermatozoida) ili oligoastenospermiju (smanjen motilitet i broj sperrnatozoida).prer~~po:dele. Ukoliko kvadrivalent podlegne 2:2 segregaciji postoje . sinapsiraju gradeci inverzionu petlju. pa rnorajli na specifican nacin da . Nakon krosing-overa nastaje dicentrican hromozom i acentrican (bez centromere) fragment koJi.romozom sa delecijom usled translokacije. trizomijom 21 i trizornije polnih hromozoma. narocito sa . divergencije gena. Segment ogranicen prekidima rotira za 180° i menja raspored genskih Jokusa i centromere.sa .Repetitorijum hemoglobina dolazi do nastanka defektnih oblika hemoglobina Lepore i Kenya. Jedan prekid je na p. Postoje dva tipa inverzija. Reciprocne translokacije nastaju. a (sli_ka 90). a drugi biti deletiran. lzohromozoml mogu biti i dicentricni. najcesce nastaju u G2 fazi celijskog ciklusa.dicentrika.irnati 2 hromozoma). lnvei"Zije se nasleduju ·PO mendelskim pravilima. Balansirane reciprocne translokacije su . pa grade inverzionu petlju. dok ce drugi garnet biti balansirim. od kojih je jedan norrnalan.qg _vretena . lnverzije su balansirane aberacije.k. segment ogranicen prekidom se rotira za 180°. Jed~m hornologi par je norrnalan.gubi~.kada dolazi do obostranog transfera genetickog materijala izmedu dva hromozo. Kvadrivalent se u anafazi I maze razdvojiti na tri nacina: 2:2 (dva hrornozoma odlaze u svaku celiju).do . Ouplikacije su fenotipski manje stetne od delecija.~u ba!ansirane translokacije. oba hrornozoma biti translocirana. Oni brzo menjaju ... Uocena je pojava · da se: pericentricne inverzije cesto javljaju zajedno sa nekirn aneuploidijama. Ukoliko se kvadrivalent razdvoji alternativnom · segregacijom jedan garnet ce sadrZati normalne hrornozorne. lnverzije mogu biti i pericentricne ukoliko dolazi. a drugi na q kraku.. zato sto u toku njihovog nastanka ne dolazi do gubljenja ili udvajanja segmenata genetickog materijala.onjugir. On~ .acij_~ . ·. tj.dobijaju se nebalans.prostornu konfiguraciju i nakon replikacije postaju izohromozomi koji su metacentricni jer su nastali od dva ista kraka. nositi je~an normalan i jedan h.Human a genetika .anafazi . lzohromozomi (i) su specificni hromozomi koji imaju duplikaciju jednog i deleciju drugog kraka (slika 88).da . · · 28. ~emu ~e centromerq nalpzi izmedu prekida.rani garneti.dolazi. jer obezbeduju dodatni geneticki materijal koji je sposoban za nastanak novih funkcija. Kao posledica susedne~2 segr~gacije . vec samo do njihove preraspodele duz hromozoma. a·drugi je nosilac pericentricne inverzije. prH:emu remeti normalanredosled genskih lokusa. Ukoliko se dogodi susedna-1 segregacija oba gameta ce biti nebalansirana. ne . U toku zigotena dolazi do sinapsiranja dva homologa : para. ·dok'je odnos fenotipski normalnih potomaka i potomoka nosilaca inverzije 1:1 .. 22 u . Paracentricne inverzije su one koje ne dovode do promene pozicije centromere. a takode su znacajne u evoluciji. a nastaju nakon prekida i preraspodele dva nehomologa hromozoma ili dva · homologa·hromozoma. dok kod zena izazivaju infertilitet ukoliko su izm~dju autozoma i X hromozoma. : tok~ .uoceni 2:2 i . jer je fond genetickog m materijala konstantan.Jer. susedna-1 i susedna-2 segregacija. pri cemu ce svaki od njih i kao i kod susedne-1 segregacije..s~ _. zbog specificn0g ponasanja hromozoma sa reciprocnim translokacijarna. pri cemu dicentrik daje dva hromozoma. 27. jer ce . pri. segregacije: alternativna. jedan balansiran sa inverzijom i dva nebalansirana aberantna gameta sa delecijom. ali u toku mejoz~ dolazi do stvaranja aberantnih hromozoma. uoeene kod infertilnih m!.bn.oitima. jedan balansiran·sa inverzijom i dva nebalansirana pri cernu svaki od njih irna deleciju i duplikaciju odredenog segmenta.maze ..: Tran~lo~a~!ie _su posebna grupa strukturnih ab~r. Nakon sto se naprave dva prekida. Nakon mejoze 11 nastace jedan nqrmalan garnet.nacina . U tok!J mejoze homologi hromozomi ne mogu da sinapsiraju praviln<.~:1 tipovi segregacije kvadrivalenata.>. do promene polqz~ja centromere u okviru hromozoma.l. lnverzije mogu da deluju u pravcu srnanjivanja fertiliteta. nasled_ng~ materijala jednog hrornozoma u drugi. 3:1 (u jedn!J celiju odlazi sarno jedan hromozom) ili 4:0 Gedna celija nece . J<od covek~ su . jer ce u svakom od njih jedan hrornozom biti normalan.

: . ·... ._... • .15. .. .._. . j ~ • ' •.. .'. 1 1• I· Hemoglobinopatije Fenilketonurija Hemohromatoza i 1 1 Bolesti ekspanzije· trinukiEio.. . .------------------·---.: . . _ __I Stika 92..--. -~ :- ··• D~tekc1ja _ q_ ogenskih m.. · Centromwric fus.:· . . .tida: Hahtigtoriova hdrea Fridraj~ova ataksija · ...n.-~ .... • • •• .... • I .i .og X: . . : . to :· · : . 1 . . .. . ~ -.... ..Najce~_ce moriogenske bolesti kod coveka · I .f. : Akrocentricni hramozomi (13.~ ~.. : .he..Spinocerebelarna ataksija Bi~eno va/B:~. :' · .. .Sind~bn1_~r?gi_l.. __ . . ·~ ·· .· Nosilac~ormalan fenotip. . . · ~ .. ..Svojstva Robertsonovih tr~nslokacija ... ·.~~ovat mfii~i6na 5 pma 1 na mJsJcna a ro IJa ._ n r-: ··c-i~ti~-r. o• .--·--·i -· ..21 . . l_ :~~ ~----~ ~:-~:~--C~~-:~ =--~J-~-~~-~~---····-...22) • Homologej._. .' Normal Rob. l I· !• · '. . . • .~ologe · · : · . . 14. ~ . ..ion .lrt~onian tr... . distrofija .ansloc::~tion chromosome Slika91. . .a bolesti fi b"r"Oii::-·· -::---· ·--. .. .· .·.. .

. U toku anafaze I ne dolazi do razdvajanja. Problemi sa ovom aberacijom nastaju u profazi mejoze zbog nemogucnosti pravilnog sinapsiranja. pa ce njegovim oplodenjem· normalnim gametom nastati translokacioni Daunov . a centromera drugog hromozoma. Nastali hromozom ima jednu centromeru.2-6. Najpoznatije monogenske bolesti su Hantingtonova horeja. · .trizomije· 21 . pa ce njegovim oplodenjem nastati plod koji ce uginuti zbdg iiionozoniije hromozo'nia 14. sindrom. Monogenske bolesti . 23 ·~ . jer ovi hromozomi sada cine jedan. pa se formira struktura pod imenom trivalent. a drugi nosilac balansirane Robertsonove translokacije (14q:21q). On se sastoji od dva normalna hromozoma i treceg koji je translokacioni hibrid prva dva. Robertsonove translokacije (centricke fuzije) nastaju kada se translokacija vrsi izmedu dva akrocentricna hromozoma. dok je u 5% slucajeva ovog· oboljenja uocena pojava bolesti oko 25 godine duv. dok aka se _vrsi izmedu dva heterologa akrocentricna hromozoma. Utvrdeno je da ukoliko se na genu koji se nalazi na kratkom kraku 4 hromozoma (4p16. . Najcesca incidenca nastanka heterologih Robertsonovih translokacijazabelezena ~je kod kombinacija 13q:21q i 14q:21q.2).za miotonicnu distrofiju se nalazi na hromozomu 19.21). pa ukoliko se izgube sa dva hromozoma ani i dalje postoje na ostalim akrocentricima. dok je kod . cisti~na fibroza.nastaju •nebalansirani gameti. . sto ce kod ljudi nosilaca homologe Robertsonove translokacije za 21(21q:21q) uvek usloviti nastanak potomstva sa translokacionim Daunovim sindromom.. U altemativnoj segregaciji nastaju dva gameta od kojih je jedan normalan (14. 21 i 14q:21q. a drugi dizomican za hromozom 21.2%.pa ce nakon oplodenja normi:llnim g·ametom .· Hantingtonova bolest (horeja) je monogenska bolest k6ja se nasleduje autozomalno-doininantno.Repetitorijum 29. Garnet koji sadrii dizomican 21 ce nakon oplodenja sa normalnim gametom. Gen. paranoja i generalno propadanje centralnog nervnog sistema. Oplodenjem normalnog gameta nastaje normalno potomstvo. susedna-1 i susedna-2 segregacija.3). . . Jedan ce imati hromozom 14. a zatim se spajaju prekinuti segmenti i nastaje metacentrican (homologa R. Bolest se ispoljava tek oko 35-40 godine zivota. ukrstanje nogu. grcevi lica i udova. biti monozomican za·21 sto dovodi do smrti plod(!. Ovaj gen kodira enzim protein-kinazu i ukoliko se na 3' kraju kodirajuce sekvence ovog gena nade veliki broj CTG sekvenci. Kod nosioca heterologe R. .(slika 9. a biti nulizomican za 21' . oba gameta bice nosioci nebalansirane aberacije. onda se radi o heterologoj Robertsonovoj translokaciji (slika 91). translokacija) hromozom. Ove bolesti su jako retke i javljaju se sa ucestaloscu ad 1-2% u populaciji . Duchenne-ova misicna distrofija. ·Njena ucestalost u populaciji je 1:8000 i cesto se javlja sa Hantingtonovom horejom. Nulizomican garnet ce nakon oplodenja sa normalnim gametom.otenu profaze I formirace se trivalent koji ce se sastojati od hromozoma 14. U toku. · · ·· ·· 30.Miot9nicna distrofija je autozomalno-dominantna monogenska bolest.Humana genetika . Najveca incidenca pri nastanku ovog tipa translokacija uocena je kod 21 para hromozoma. ~emofilija itd. jer se radi o balansiranoj aberaciji i pored toga sto je izgubljen nasledni rnaterijal na p . Robertsonove· translokacije nastaju tako sto se na jednom akrocentriku prekid vr5i ispod centromere. Drugi""ce imati hromozome 21 i 14q:21q. . onda dolazi do sinteze proteina hantingtina koji je naden u celijama centralnog nervnog sistema. To se objasnjava take sto se u regionima p kraka akrocentricnih hromozoma nalaze geni za rRNK. horeja). · zbog .toku deobe {minutni hromozom). Nakon mejoze 11 jedan od gameta bice nulizomican. . dok se cetvrti minutni hromozom izgubio. Robertsonove translokacije : . Jedan od njih sadriace hromozome ·14q:21q i)4. nilna Hantingtonova e . . razvoja multiplih anomalija i mrtvorodencadi uoceno da je ucestalost 2. Ukoliko se translokacija vrsi izmedu dva homologa akro'centricna hromozoma onda se oznacava kao homologa Robertsonova translokacija. a to su alternativna. ·kaja na sebi nasi dva para kratkih p kraka se gubi u. Klinicka slika_je sledeca: postepeno pogorsavanje kretanja. propada[lje intelektualne funkcije. Ucestalost reciprocnih i Robertsonovih translokacija je 1:500 novorodjencadi. a nulizomican ' za 14. Kod homologih Robertsonovih translokacija nastaje jedan metacentrican hromozom. ·dok ce oplodenjem balansiranog gameta nastati balansirana Robertsonova translokacija. Prilikom susedne-1 segregacije. :. translokacije 14q:21q u zig.spontariih pobacaja. miotonicna distrofija. Monogenske bolesti (single gene disorders) se nasleduju preko jednog gena. translokacija) ili submetacentrican (heterologa R.kracima. Nakon pojave obolele osobe iive 10-15 godina. nade neuobicajeno veliki broj CAG ponovaka. susedne~2 ·segregacije . Osoba koja je nosilac Robertsonove translokacije ima 45 hromozoma i normalan fenotip.dati trizomican zigot za 21 hrom'ozom. demencija. ana drugom iznad. Postoje tri nacina segregatije trivalerita (6 razlicitih tipova·garneta).. pa ce njihovitn oplqdjenjem nastati translokaciona trizomija 14 i doci ce do letalnog ishoda.-· . doci do letal ne aberacije usled monozomije 21 hromozoma. Drugi ce blti :mol')ozorriicar:i za 21 ·hromcizoni.

-~ .~ ~ - ..· ' ··-. lie . I.. . .· -· • = : .. ~ ' .. ·" ...<<: · . \ _ _ ... i ·_..·i - -···.. . _ .. .oa ~ 'J~p~r~ciji . .a 0' L ... ~: :_..cisticne fibroze . Sliki96 ~ Disfriblicija tazlicitlh koeficijenata inteligencije u populaci. i · :~r. -· T ATC ATC TTT GGT GTT ... · \ DELECI. Slika 95 . 0 "' 0 ..JA -.-.Disenova misicna distrofija ·.: .. .~ Phe _".. ·.' Distribucija'. : .. ----~------------------------------~~~~ f . _ :. ·:.. F: . .VaJ .Be...· .. .a .t . ..'.-.. ·· ·!... a . IQ .. .·~·~-::. NORMALNO lie..razlicitih tele'snih visi.. . .. 1 • !· . :. Slika 93 :... . ' . . Slika 94 .T GGT GTT . .. Nastanak.. ... ... --.. ~~-­ . .Gly._ . .V:al ..lie.· .. .·..__ ~ . . ... .. .my. : ::·~~-~ ~'"'-· ~ . T ATC AT· -. t ·..· > .: -. · ](1) . <: .... -t-:•.

prognoze i nacina lecenja bolesti i utvrdivanja rizika ponovnog javljanja bolesti u· porodici.u . . tireotoksikoza. ':··•!•.ishrane misica). . vrsi determinaCiju neke·osobine. koji zajedno 'za faktorom: koagulacije IX omogucava normalno zgrusavanje krvi. To znaci da se geni koji odreduju oboljenja nagomilavaju (agregiraju) u porodici. Joni hlora se nagomilavaju u ekstracelularnom matriksu i u epitelnim · sredinama uslovljavaju gust mukus (sekret). a njena ucestalost u populaciji je znatno manja 1:40000. hronicni pankreatitis. CFTR (cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) protein ima ulogu da vrsi skladan transport jona hlora kroz membrariu. . . p~fomstvC! sa predispozicijom za multifaktorski poremecaj biti veci ukoliko je veci broj clan ova porodice nosilac nekog· pomenutih oboljenja: Multifaktorsko nasledivanje je tesko pratiti.Hum ana genetika . Ucestalost bolesti je 1:2500-3000 u populaciji. . kqjq je. secerna bolest. Veliki kqrak na planu ran. :Ovo ·znacr da je·. onda se to lako izracunava na· osnovu zakona mendelske genetike. hronicne infekCije respiratornog trakta. Multifaktorsko ' nasledivanje·.omozigota. gust sekret u alveolama.llF508. . koji se ustanovljava na osnovu posmatranja u. Takve bolesti su kardiovaskulani~. diabetes mellitus. pri cemu ~e deletira sekvenca koja ce kodirati fenilalanin. Cisticna fibroza je autozomalno-recesivna monogenska boles! (slika 93) . dok je najcesca uindoevropskoj rasi. 31. polipi. multipli otoci usled krvarenja.i zavrsava se letalnim ishodom oko 18.-. vec ostaje u cistemi EPR-a. ondase zbog n~mogutnosti primene mendelskih zakona koristi empirijski rizik. shlzofrenija. uslovljena od strane Cinilaca·spoljasnje :sredine.• tip nasledivarija.· ': · . Postoje dva tipa hemofilije (A i B) ~ Hemofilija ·A je najcesci oblik ovog oboljenja i · nastaje usled nedostatka faktora koagulaeije VIII. osobinu. katarakta. procenu . kada se radi o proceni rizika za nasledivanje multifaktorskih poremecaja. .lumbalnapogrbljenost Boles! se javlja izmedu trece i pete godine zivota . . ali napreduje u znatno blazem obliku i zivotnivekobolelihjeduzi. U preko 70% slucajeva cisticna fibroza nastaje tackastom (point) mutacijom gena koji se nalazi na kratkom kraku hromozoma 7 (7p31). autizam. koji je ujedno i najveci humani gen (2. Duchenne-ova misicna distrofija (DMD) je X-vezana recesivna monogenska bolest. Ovaj gen kodira integralni transmembranski protein koji je jonski kanal za jone hlora: Mutacija (delecija) se najcesce desava u regionu . miotonija (stanje u toku koga se misic sporije relaksira nego uobicajeno). Klinicka slika: postepeno razvijanje slabosti u misicima. alkoholizam.. bronhiektazije i sterilitet kod muskaraca. Javlja se sa ucestaloscu u populaciji od 1:5000. usporeni i otezani pokreti ustajanja. Medutim pored uobicajenih oblika. artropatija. Uloga distrofina je da povezuje aktinske i lamininske filamente u misicnoj celiji i njegovim gubitkom dolazi do distrofije (smanjene . poremecaji u sprovodnom sistemu srca. ·: od 32. rak. ostalih :srodnika.· tei. koeficijent inteJigencije itd. poremecenom crevnom peristaltikom i atrofijom testisa. Multifaktorsko nasledivanje . a ukoliko dode do vece povrede osoba umire us led masivnog krvarenja. onda se kombinacijom odredenih istih · gena (zbog zajednickog porekla). zbog nepravilnosti u prenosenju (odstupaju od mendelskihzakona) i zbog brojnih uticaja spoljasnje sredine koji nisu jos dovoljno prouceni. depresije itd. pa ce rizik ·ia r?danje .ucestalost od svih bolesti i cine preko 60% svih bolesti. godine usled kardio-respiratornog zastoja.. vrsi · nagoinilavanje stetnih recesivnih h.. rascep usne. Kod multifaktorskih bolesti uoeena je osobina agregacije.delimicna kontrola ekspresijer. Klinicka slika: hronicna boles! pluca. Ukoliko se zeli proceniti rizik za dobijanje bolesnog potomstva usled · autozomne ili X-vezane dominantne ili recesivne bolesti. ·. (slike 95 I 96). · · · · · · ·. slabost srca (cor pulmonale).ina. Multifaktorski~ se ·nasleduju·kvantitativne osobine kao sto su visina.•• ·'> ': : . vrlo slicna Disenovoj miodistrofiji. Ukoliko dode do inbreading-a (ukrstanja u srodstvu). . Kod hemofilije tipa B dolazi do mutacija na gehu za· faktor koagulacije IX. .. Hemofilija se prenosi X-vezano recesivno i fenotipski se odlikuje nemogucnoscu zgrusavanja krvi. ~tkrivanja naslednih bolesti omogucila 24 . Klinicka slika: konstantno·lako krvarenje u zglobovima i misicima.Repetitorijum dolazi do patogeneze.og. . je .. Boles! nastaje kada dode do delecija odredenih kodona na genu za distrofin. postoje i bolesti koje se multifaktorski nasleduju (slika 97)~ Ove bolesti lmaju najvecu . kome vise gena UZ uticaj spoljasnje sredine . hiperholesterolemija. Varijanta misicne distrofije je i Bekerova misicna distrofija (BMD).. tresenje ruku. · . arterijska hipertenzija. Medutim.cestalosti Qolesti kod . Kada je· ovaj protein muti ran on ne postoji kao membranski protein.5Mbp) i lociran je na X hromozomu (Xp21) (slika 94).gena koji determinisu·:neku·. obim ekstremiteta. Prevencija naslednih bolesti Prevencija naslednih bolesti podrazumeva postavljanje pravilne dija'gnoze. Alchajmerova boles!. Klinicka slika: postepeno razvijanje misicne slabosti. bronhitis.

.(1959.. ·.:. .~ z. . Rizik se povecava ukoliko postoji vise obolelih clanova porodice 3.~._. Rizik se povecava ukoliko je aficirani.lot·•·- ..:.~~~(:i.c:7~ {. ·.Mary to je.e...pola koji je redje aficiran posmatrano u opstoj populaciji Slika 97 .) .."iJ. Rizik se povecava ukoliko je ucestalost malforiT1..&.~ .X . !'~~.. Slika 98 . Rizik od ponavljanja predstavlja prosecni rizik ili empirijski rizik koji ce biti razlicit u razliCitim porodicama 2. '~t.:on••""""• .~ B~i-r &Bertr~m {1949~) . ~·\... . . ·::L":· -~~-~ J~~ ~~~7~~~-~ ._ ...ciQ~~. (!.. 1.Russell & Ohno.:v:~l-·ol' .Osnovni pojmovi o multifaktorskim bolestima '/~. ~ .¥-~~ .l_:.lnaktivacija X - #i~r~~­ ~ij:.C!~jj~. ·.'l..~f~a. 5.!)Y?. ..· ~A_R...ili bolesti veci u populaciji ..hroinozom .~:'"'-"'.Porod(c.:..:·.. . ~»C"...+. Rizik se povecava ukoliko je tdi oblik malformacije ili bolesti 4... -... .~'1'~ Layon ...lnaktivaqij~ X hromozoma ~ -....

muskompolu). · a•najcesce .Xbromozoma. :. delimicno blokiranje ekspresije gena na X hromozomu zenske osobe koji je nasledila od oca.i inaktivise se heterohromatinizacijom. . oskudna kosmatosUica. ·. Ove metode mogu posluziti u otkrivanju 70-ak genetski uslovljenih poremecaja (poremecaji nervne cevi..· L:Klinefelterov.xxx:x.na sledeci ··nacin: mentalna·'retar'dacija : {ne mora da · bude izrazena).f. Da bi se mogla dokazati odredena genska mutacija (tackasta mutacija. Najvaznije i najcesce aberacije polnih hromozoma su: Tarrierov 'sindrom.. .< .. lndikacije za primenu prenatalne··dijagnostike su sledece: majka starija od 35 godina (veta sans a za radanje dece za trizomijama . poremecaji razvoja .tehnika Southern blot. Klinefeltermf-:: sindr. anencefalija.': XXY~ A8. fragilniX-hromozom.odreduju intenzitet fenotipa obolelih. nego u obicnoj populaciji. pri cemu je rizik 100% za dobijanje bolesnog muskog potomstva. dok su u toku spermatogeneze X i Y hromozomi inaktivni.Jnozenastati:. (75%).nervne 'cevi. ' . nerazvijene sekundarne polne karakteristike. insercija ili delecija) . porodicne hemoglobinopatije. hemofilija i dr. a duzina zivota je normalna:Jarnerov sindrom moze imati ·i svoje·mozaicne forme.". a.:-u'J:f•ll :niejotickoj'deobi majkei r mejotickoj .uglaynotn zdravo . Metodom amniocenteze (uzimanje plodove vode) koja se vrsi u 16-oj nedelji trudnoce.sindrommoze . .. lnaktivacija X hromozoma zapocinje na stadijumu blastociste (1000-2000 blastomera).:::t:. Muskarci sa polizomijom Y hromozoma {47 1 XYY) . politbmije X u zenskom polu i polizomija·Y..Humana genetika. nizak rast kose na vratu.:~ jeJ :·1000.dcibijaju . · 33 . .poremecaja. koje odreduju kolikim ce intenzitetom biti izrazen fenotip obolele zene:(maze postojati·menstruacija i·normalna razvijenost mlecnih zlezda).. stitaste grudi sa siroko razmaknutim · bradavicama. ':XXXY > 49. anomalije srca itd. fakultativnom ·heterohromatinizacijom u Barovo tela (slika .coveka.u. a i terminalnom delecijom Xp. delecijom Xq21 . Kod zena je zabelezena polizoiriija·x·hromozoma.XXX. .47. Utvrdivanje pola ima veliki znacaj kod X-vezanih recesivnih oboljenja. ·:.. 7. ' . krupni zubi i evnuhiodna grada u celini. lnaktivacija X hromozoma predstavlja genomski imprinting (otisak). nevusi · (mladezi). Pretpostavlja se da visak Y hromozoma izaziva ·asocijalno i agresivno ponasanje. .':ima::kariot!p. . spina bifida. XXXXX). ·.:u . pigmentni . .. koje ·· mogu znatno ili neznatno da uticu na fenotip nosioca. · Sindrom nastaje uslecl nerazdvajanja hromozoma u spermatogenezi. XO javlja se kod osob· zenskog pola (u nekim slucajevima i kod muskaraca) (1 :2500) i a predstavlja jedinu vijabilnu monozomiju kod . mali testisi.·: · ··· ·· I kod muskaraca i kod zena uocene su strukturne i numericke aberacije gonozoma·(X iY hromozoma).).potomstvo iako je statisticki rizik 50%. moguce je utvrditi da li plod nosi neku hromozomsku aberaciju ili gensku mutaciju.isto tako moze nastati•proksimalnom delecijom Xq11.DNK. XXX 48.avilnog:formiranjasinaptonema!nog kompleksa i prekida mejoze u profazi · · : . · sterilitet. kloniranje i formiranje oligonukleotidnih proba. autozoma).om~~:-ukoliko '. Poiizomije nastaju usled gresaka u mejozi I i 11 jednog od roditelja. zenski tip pubicne kosmatosti. XXXX 49. naboran vrat. a ponekad somatskim svojstvima karakteristicnim za Daunov sindrom. U toku oogeneze oba X hromozoma su aktivna.deobi oca: Neki autori. a javljaju sa ucestaloscu 1:1000 muskaraca. Polizomije Y hromozoma su zabelezene kod zatvorenika u veceni procentu.muskarac..i . Kod zena sa Tarnerovim sindromom ne postoji mentalna retardacija. . Bitno je napomehuti da'.:. poremeeaji. . pa zato ima odredenu prednost nad amniocentezom. Fenotip · · ' · obolelih:·se·· os!ikava ·. tako da se ovim omogucuje specificna inaktivacija X hromozoma koji je poreklom od spermatozoida. Mehanizam inaktivaCije X hromozoma 'Jnaktivacija X hromozoma podrazumeva. Fenotip polizomija ispoljava se mentalnom retardacijom.. pri cemu jedan od X hromozoma prestaje da odgovara na transkripcione faktore .<.nastaje ·zbog ·.98) . Nakon sto se X hromozom prvi put inaktivise sve celije ce pratiti matricu inaktivacije istog X 25 .y..iako .hipoplazija (nerazvijenost) noktiju. onda govorimo o 4 ili . Aberacije·polnihhromozoma.{poiizomija. navode·da. enzimopatije.. nerazvijene sekundarne polne karakteristike. · . pfl · cemu postoji vise varijanti kariotipova kod takvih zena (47. se .· .Statisticki iniaju 50% sanse da rode bolesno potomstvo.sindromu. .. pa se tako moze utvrditi da li plod boluje od neke od ovih bolesti i ako je potrebno savetovati blagovremen abortus. fenilketonurija. ~ 34.. kao i pol ploda. amenoreja (odsustvo menstruacije). Metodom uzorkovanja horionskih resica se mogu utvrditi hromozomopatije. Klinicka slika je ·sledeca: nizak·rast (nanizam--+1 00-125cm).mozaichim oblicima koji. Tarnerm• sindrom ima kariotip 45. jedan od roditelja nosilac balansirane strukturne aberacije i ukoliko je prethodno deterodeno·sa odredenom·hromozomskom anomalijom.J\Iinefelterovom:. sterilitet.biti :uzrokovan.vezani za·X-hromozom u porodici.Ucestalost ovog sindroma u muskoj populaciji :· :· :. vec u prvom trimestru trudnoce.:y . disfunkcijom ovarijuma. dugi ekstremiteti. . Klinefelterov sindroni. . .Repetitorijum je prenatalna dijagnostika. hemofilija A..kao:pbsledica:nepr.koristi se . uglavnom dobijaju ·zdravu decu.hr-omozemc:.

~ ~-~... ~r...~~t.~.i..Qx ..~· ... .~-. .8 (a ne 1:3) . .· · Diferencijacija' pola ·. .·. . . . Slika 102.. ·~ ..Diferencijacija gonad a •..· .. . : . . ~~r: .... : ~· ... ... .~~-. . ~~.~u· i ~. . centar (XI C) PAR • Si'r. • OBAVEZNO AKTIVAH: · lnak. . IC.pojedinl reglonl' na 'xp I Xq IZBEGAVA....IU .: . . :-~::.Ji...•.f_· ... " ~o.. ·• Tasti!i 1:1. ~.&iB:x. · ~ · ' . : -~ (®~i" .. YC1V=:""· : .. .JA eF· .• · -· .INAKTIVACI.· :~.. y HROMOZOM ~ . ~· ..~_:. . .~. ' ...Parcijalna inaktivacija X hromozoma . .Y hromozom.~~ · ..: · '*._ •. ~i~v ~ .~ ..·· · ·~· ·-- .. :.. -~ ~- Slika 101 -Diferencijacija polnihodvoda . Slika 100 .:~ i. - .. ·} ·7:'.......... ... aktivnlh gena •sF gen kod XXX iene: •• • ~~ lmm'"..-. ANJENA E I~SPRES I ...' .. =S.¥:~ ~ Slika 99 .. .:. . . :~.xx.· ..~.IU · dokaz· razli~::t~~· ~ xo . c. ~·-•pnrcd""' .

SRY postoji kod normalnih muskaraca i kod XY zena. I kod muskaraca' postoji DAX1 gen. momentu imaju istu konfiguraciju gonada (slike 100 i 101). Y) lokusa na kratkom kraku jednog X 26 . koji se prvi repliciraju i k~diraju antigene krvne grupe Xg i enzim steroidnu sulfatazu. ovarijumi c sei"formlrat1. Barovo tela se kasno replicira u S fazi. doslo je do reverzije pola.. a i gen za anti-Miler hormon (AMH) . razlikujemo pet'vrsta determinacije pola: geneticki. koji se. .·. jer ukoliko postoji samo jedan X (45.i ucin·a~ zavise od . gonadalni.TDF aktivirati SF1 geri. Centar inaktivacije nalazi se na proksimalnom delu q kraka X hromozoma (Xq13) i u njemu se nalazi genski lokus koji ce zapoceti inaktivaciju. zbog ·e ubrzane atrezije (propadanja) folikula. XO). Time se postize da odredene sekvence ONK dolaze u kontakt sa udaljenim transkripcionim kompleksom. neee doci do razvoja nadbubrezne zlezde. Transkribovanjerri ovog gena dobija se jako velika RNK. Ovaj stadijum se naziva stadijum indiferentnih gonada. U toku embrionalnog razvica i muski i zenski pal u jednom. To je SFt (steroidogenicfactor 1) gen koji kod_ira·transkripcioni faktor SF1 i deluje u Lajdigovim celijama . Prema n6vijim podacima im1ktivacija X hromozoma vrsi ·se pomocu metilacije DNK. XX muskarci.J:le!~ks-3.:Gnf~rmaciju . normal no formirali testisi pored SRY gena. XX (ucestalosLje 1:20._ . To su geni na lokusima Xp22.>mozom. Medutim ukoliko se na X hromozomu pojave dve kopije DAX1 gena. tako i kod Z.Humana genetika. ekspresija. Geneticka kontrola diferencijacije pola Kao i vecina osobina coveka i diferencijacija pola je uglavnom geneticki determinisana. Medutim. ali ce veliki procenat obolelih ·z.-.oslikava u multiplim anomalijama kostano-zglobnog sistema.Repetitorijum hromozoma. koji · uslovljavaju .13 i Xp22.fhigh ·mobiJity:group}. Postoji tacno determihisan· redosled ekspresije prethodno navedenih gena. 35.!ntnih gonada u ovarijume dolazi us led nedostatka SRY gena i njegovog proizvoda TDF.g3 -! savijajuci ga za BOo .an.mkcionisanje tog ·X hromozoma.000 muskih novorodjencadi). TDF protein deluje tako sto se vezuje za odredeni deo DNK lanca preko svog segnre·nta ·t<oji·je··-oznaten ~kao · HMG-.aktivirajuci ·gene ·kojr· kodiraju · enzime ·~za sintezu · test~sterona . a potom ce proizvod SF1 gena indukovati sintezu AMH i testosterona: Kod zenskog 'pola do difer~ncijadje indifer(. koji se nalazi u distalnom delu kratkog kraka Y hromozoma (slika 102) . XO muskarci i 46.SRY gen produkuje TDF (testis differentiation factor) protein. psiholoski i socijalni. Postoje tri varijante reverznog pola. da je gen koji determinise pol coveka SRY (sex determing region on Y) gen. ali karakteristicno je da X hromozom nije 100% inaktivan. Kod muskaraca koji imaju genotip 46.. br~ja kopija (doze) u kojoj se nalazi.P450 aromatazu koji omogucava · sintezu steroidnih hormona.mer:ja · f. a one su 46.17q i kodira transkripcioni faktor. us led postojanja SRY (sex de terming region . alije za riormalno fi. · -·. XY iene.diferencijaciju ovarijuma. Svaki ad ovih tipova razvi)a se samostalno ili u sklopu sa drugim poremeeajima diferencijacije pola. Kod_iena su na X hrornozomu \JSta~oyljeni specificni geni DAX1 (DSS).of. sprecava se diferencijacija testisa i determinise diferencijacija ovarijuma.ena postojef autozomalni geni koji'ucestiluju u normalnoj diferencijaciji gonada. a ne postoji kod normalnih zena. Na osnovu ispitivanja osoba koje imaju·reverziju pola doslo se do otkrica. ali ]e on suprimiran. da bi se normalno odvijao proces diferencijacije testisa. · Prvo ce se eksprimirati· SRY~ gen.fenotipski. neophodan je i SOX9 gen koji se nalazi na polozaju . Takve osobe imaju sindrom kampomeHcne displazije. despiralisuci . neophodan drugi X hromozom. Kod ·~ena je za diferencijaciju ovarijuma potreban samQjedan X h~<.zato sto njegova. koja ucestvuje u formifanju Barovog tela. · misevima pokazali su da . Medutim u odredenom momentu indiferentne ·gonade pocinju da se transformisu i diferenciraju u pravcu koji imgenotipski pal odreduje..gen za enzim . · Rezultati eksperimenata sa . koji deluje tako sto indukuje transformaciju indiferentne gonade u testis. i nalazi se na polozaju· 11 p.ukolikoje gen za SF1 deletir.ciji ce proizvod.ema biti ·sterilan.Da bi se. Kod zena takav gen je WT1. odnosno DSS dobio ime dosage sensitive sex reversal. slican TOF-u (takode sadrii HMG).p61qzaju')(p21 nalaii se DAX1 ili DSS (dosage Na ·sensitive sex reversa~ gen.31. zenski fenotip (75%) ili hermafroditizam i·kratak zivotni vek. a gonade ce se ubrzo n~kon diferencijacije degenerisati. Takvi su npr. vec postoje odredeni geni koji su aktivni (slika 99). Oa je prethodna tvrdnja tacna dokazano je kod osoba koje imaju nedostatak jednog alela ovog gena.·blokr·~ . Zato je ovajgen DAX1. Kako kod muskaraca (SF1 i SOX9). Reverzija pola Reverzija pola je potpuni nesklad {z~ razliku od hermafroditizma koji je delimicni nesklad) izmedu genetickog i fenotipskog pola. Na osnovu eksperimenata na misevima kod zenki je utvrdeno prisustvo proizvoda WT1 gena u genitalnom naboni. U sustini TDF se ponasa kao transkripcioni faktor. 36. 45. Na polozaju 9q nalazi se jos jedan gen koji je bitan za diferencijaciju pola. prek9 :svojih·j:}rodukata.. i time se transkribuju dajuci specificne produkte koji ce izvrsiti diferencijacijo testisa.

... _·: :~~~ ­ . .uTAC~ GENA ZAc::::__l! RECEPTOR ZA TESTOSTERON (Xq) 1 1 ! .' Sli~a 105 -Sindrom ~estikularne feminizacije . .:. ~ ...46. niiJ n•st. • HROMOZOMSKA KONSTITUCIJA: • GONADE: ov:uijuml • POLNJ ODVODI: 'XX. . ' . 5) • reclpro~na tran~lokacija ~-') '-. XY i:ene MUSKI PSEUDO HERMAFRODITIZAM TESTIKULARNA FEMINIZACIJA -46 0 XY • GONADE: testisi • POLNI ODVODI: odsutni ... .. -I ' i i~nski · • FENOTJP: maskuli. sterilne) ~ autozom (akroc:entrlk. ··&~.. : ': . . delecija ill tatkasta mutacija S:P.GONADE: testis! (plodnost ?) . .Adrenogenitalni sindrom ....Kllnefelteru... ---.nema Barovo telo · . .. :. infantll1zam (amenoreja.. ..POLNI ODVODI: zenskl • FENOTIP: ienskf. . ' : I HIPERPL)tZIJA (adreno~genitalnl sinilromJ: -~-~..• \ ~. ..DDII XYZENE ...Y ~.... _'.I l I I LUC~NJE M~~KIH POLNI_ HORMONA H lz uve6arie KORE NADBUBREZNE ZLEZDE . .nadoblastoma !11 Slika 103 .------___ j i .. .. .FENOTIP: t..~. .. .-. .:.ADRENALNA .mozo.!.. ' .i\l· ~ ZENSKI PSEUDO HERMAFRODITIZAM KONGENITALNA . GONADE: testlal 1 bez spermatogeneze . .:. .~~~\:·· .· 2n OSS ~ dupllkac:ija s¥9 ~ delecija xo muskarcl S~Y . P450 cito~rom) . sterilnost .~--. FENOTiP: muikl... ~ i .. . ..nepravilan crossing over u mejozl oca . . . XX i 45.ameno_reja.GONADE! ovarljumi =)DISGENEZA .1izcivan i l .. ·"..FENOTIP: z./~t. . .en:ski __=.. VAZNO: 0zbog ~. -. ": .. . ~R. . •g~nska muatclja (210H. .avlsl od autozoma '-. Y X hr.. XO muskarci Slika 104.18._~.46. : ~ XX muskarci -~ 1:2D. : Slika 106 . . _.L'._nema telesne odllke Tumerfl .-.

postoje testisi u kojima se ne vrsi spermatogeneza. a i menstrualni ciklus kod vecine pravih hermafrodita.. a na drugoj ovarijalno tkivooMedutim. koji nastaje 1. postoji i ovarifalrio Hestikularno . onda se to odnosi na pojavu da kod o individue. dok su ostale odlike slicne odlikama zastupljenim kod Klinefelterovog sindromaoZa razliku od njih 45.XY. Pseudohermafroditizam i pravi hermafroditizam · Pseudohermafroditizam je pojava da je geneticki pal (gonozomna konstitucija) i fenotipski pol (primarne i sekundarne polne karakteristike) u neskladuo Postoje muski i zenski pseudohermafroditizamo Muskarac koji je pseudohermafrodit poseduje Y hromozom u genotipu. to je procentualno cesci turner. a pal muski.nivou su: akumulacija genskih mutacija i razvoj genetske nestabilnosti. ! . maze javiti cri ciu _ chat sindromo Takode je utvrdeno da ovaj tip reverzije moze nastati usled mozaicizma. nezavisnih uzroka.~~6. a razlicitog su polaoNije ni retka pojava da pravi hermafroditi imaju mozaicon~ .kaskadu poremeeaja koji konacne vode ka tumoru)o Protoonkogeni mogu da budu aktivirani ili izazvani. .)()'.__ _ . pejednostavljeno ·receno.. koji dovodi do pojacane sinteze prekursora androgena. koji se desavaju simultano ili.a. pri cemu se i SRY lokus translocirao Heterologa Robertsonova translokacija je najcesci razlog nastanka XO muskaraca.: . ali su mu spoljasnji polni ergani nediferencirani (slika 105)0 Kod muskaraca pseudohermafrodita.X0/46.tko.karc~J<. . dok je takode moguc slucaj translokacije dela Y hromozoma 0na neki neakrocentricni hromozomo Fenotip i fertilitet 45.m?}u .o]U.<?. dok·ne postoje spoljasnji. Smatra se da svi tumori peticu od jedne maligno transformirane celije (hipoteza inonoklonskog porekla tumora)o Maligni tum·ori najcesce se pojavljuju kasno u zivotu : jedinke. . pa time i blokade njegeve .prisul'!'? spermatozoide i oocite uovotestisuo Takode postoji i uterus. ·sto sugerise da su uzrokovani serijom . ciji fenotipski pol nije uskladen sa genetickim polom. a mozese javitii Tarnerov sindromo Uoce11a je:i perzistencija (edriavanje) Milerovih kanala..~o~~t. i obr_~z~ju o~~to~stiso Pravi hermafroditi se u okq_J.0 Razvoj tumera... • •· .G?. Drugi nacin nastanka· pravog -hermafroditfzma je' polni ·himerizam. .koji indukuje pojacano lucenje ACTH (adenokortiketropnog hormona hipofize). spofjasnje genitalije su ambivalentne (nedefinisane).karakteristika.tkivo. porerileeaj se oznacava kao cista gonadalna disgenezao Ova pojava je uzrokovana delecijom dela Yp. koji su predodredeni da budu dizigotrii blizanci. pa je fenotip zenski. pri cemu ce se na jednoj strani tela nalaziti testikularno. na hiperprodukcijuo Do sad a je nadeno vise od 100 27 . Pravi hermafroditizam ·nastaje us led genskih inutacija na ·sxs genu (X hro~ozom). polnih .muski genotip (slika ·104)0 S obziom da se zenski fenotip javlja usled poremecaja ali diferencijacije testisa kod muskaraca.i~v. . Protoonkogeni i mehanjzm. pa ovi muskarci imaji muske i zenske polne odvodeo Jedan od.jedan za drugimo Sto je starija jedinka. pane dolazi do pravilnog razvijanja muskog fenotipao 37. tako·da unutrasnji polni odvodi:postoje.q%_. sto je u nekoliko slucajeva i dokazanoo Kod 46.~o-mus. znatno cesca pojava je da su ova dva tkiva pomesana .Qgajaju ok.Human a genetika . .i nji~9ye _ akt_ivacij~ . Ovaj sindrom nastaje zbog nemogucn6sti vezivanja testosterona za receptore. Ovakve iene se prepoznaju po izuzetnoj zenstvenosti ·i nedostatku aksilarne dlakavostio U slucaju zenskog ·pseudohermafreditizma. Androgeni deluju tako sto dovode do poremecaja razvica spoljasnjih ·polnih organa i formiranja ambivalentnih genitalijao Kada govorimo. XX muskaraca (slika 103)0 Ked ovih muskaraca. bez obzira na pol. Testisi nisu spusteni u skrotum i ostaju u abdorpenu. zbog nedovoljnog lucenja glikoproteinskog hormona (anti Milerov faktor) keji vrsi regresiju Milerovih kanala. pa se recimo us led tra~slokacije na 5p.re. . takode dolazi do razvitka ambivalentnih {neodredjenih) genitalija (slika·106)o Jeda~ od -primera zenskog pseudohermafroditizma je adrenogenitalni sindromo On nastaje usled debalansa hormona kortizola. koja obuhvata SRY lokus. koji se debijaju u krajnjoj liniji. . XO muskaraca zavisi od lokalizacije translokacije. .· · ·: Ova glavna tipa promena koje vode nastanku tuinora na genskom . . u kome su prisutne i XY celije. uloge u formiranju normalnih primarnih . 38.. postoji mozaicizam 45._ pravpm: hermafroditizmu.: .Repetitorijum hromozomao Ova pojava zabelezena je u 80% slucajeva 46. XY iena postoji izrazen zenski fenotip (zenski spoljasnji polni organi i odriani Milerovi kanali). : . specificnih· oblika pseudoherafroditizma kod muskaraca je sindrom testikularne feminizacije. stoji pod · genskom ·kontrolom: protoohkogena '(gena koji aklivacijom izazivaju turner ili preteinske produkte koji izazivaju . pri cemu je fenotip jako raznoliko Javlja se kript~rhizam -·{nespustanje·· te·stisa ·~u -"shotcirri] .i~uciju 46.~I~. · . XO muskarci su opi~anL u samo desetak slucajeva (slika 103)0 Javlja se usled reciprocrie translokacije izmedju Y hromozoma i nekog autozoma. • .' 11tpospadija O •(disioeiran otvor uretre).1sled spajanja dva zigota ili embrona. koja uslovljava nastanak tkiva specificnog -za suprotan pol.

..:'=:/.. :-~~."" ·_-:.u m ...sa (be: onkog&n. ·~·~?}~. ._:-.t <J Ji'h l -="'' r~ tro viru.•• II: recepfcri :o faktorc rcste sa' tirozin~kinaznom ID-Al: tiro2in-klna2e asoc.l'o#Y. sis(PDGF) fms e-rb·B : kit . _·.. tt!E:~~~= .~ ce ..Nastanak Filadelfija 'hromozoma ."!: R. . ~~- jun myb Slika 107.Viralna aktivacija protoonkogena .Qist~bucija proizvoda protoonkogena u celiji . ..\11 " ' "' · 11 integracija viralnog genoma u DNK damaiina himericni gen A.. point· mutacija tu mor Slika 108 ... Slika .-.j 0 •• Ph' qJ-1 . .JK Rcvcr71'1111 .I: faktori rosta . IV: GTP-vezujuci proteini .iranc sa membra nom oktivnoSC...A.~::oo9 ..FJ~tm !l&nom .· .o .-B: serin .lij a -~~-+ amplifikacija ' .· myc fos .. .. 1romkriptuo ~ • n.: •.Neviralna aktivaeija protoonkogena ·:. ' ~~. normclna Ce.. . >:· !.~ 09 .) / oo§. . raf mos mil _ _.treonin niAZ : citopla:zmatske protein kina:ze tircxin-kinazc -v ab/ .. . NEVIRALNA AKTIV ACIJ A PROTOONKOGENA .~ Slika 110 .

· · : · ·~ .delovati.receptore za faktore rasta su fms (receptor za koji se vezuje M-CSG). Receptori se sastoje od tri regiona: ekstracelulamog.Ras protoonkogeni... Da bi -neki Ra~-proteif1 bio . (slika·1 . :: ·~~ · .prihvataju.mene ·na.-. ' .07)?:' . nalazi se ab/-protoonkogen.. Protoonkogen se maze aktivirati neviralnim i viralnim{virusnim) putem (slike · 08 i 109) . · · ' -_ ..· . U ovom slucaju translocirani protoonkogen moze da prede u bliski odnos sa nekim drugim genom i da nagradi himericni gen. . Najpoznatiji faktori rasta su M-CSF (faktor stimulacije kolonija 'makrofaga). kit rostali. U tom slucaju protoonkogen prelazi u onkogen (tumorski gen)i razvijase tuinorsko tkivo. Jedan od najpoznatijih . . je pojava da pri odredenim struktumim hromotoniskim aberacijama (najcesce translokacije) moze da usledi razvoj .. sto znaCi da enzim tirozin•kinaza vr5i fosforilaciju tirozinskih grupa proteina i na taj nacin ih aktivira. Na poloiaju 9q43. .SP. Navedeni faktori izazivaju proliferaciju -~ svih celija ukljucujuci i maligno trimsformisane eelije. su jedami receptori. Medutim uoeena " ..: neophodno .·. Najpoznatiji protoonkogeni koji kodiraju nereb~ptoine protein kina!e·· su src. · za koji se vezuje faktor rasta. . mybr 'jun i fos (slika 107). efekta.point-niutacija.vaJi. · ·._:' "fl_ _ prenosio do jedra neophodni su produkti protoonkogena koji -kodiraju .promotorsklm:~sekvehcama :-protoonkogena usled mutacije ili delecije.:_ '::. I najzad aktivacija gena mutatora izaziva tumorogenezu. :. koji ~ada se translocira na 22q11. . segment koji nosi protoonkogen insertuje u· neku ·transknpcijski hiperaktivnu zomi (kakve su npr.'ab/.Repetitorijum protoonkogena. Kod neuroblastoma uoeena je amplifikacija' mycN protoonkogena.: tumorskog tkiva.-. .protoonkogena koji kodira faktor rasta je sis protoonkogen koji je odgovoran za kodiranje beta-lanca PDGF. amplifikaciju i _· 1 pozicici.: Cesto se navodi primer.·.procese:reprodukcije i diferenclia~ije·. kOdO~t(J~~S~protoon~·ogena ·_. Protoonkogeni koji su najpodloiniji mutacijama su. usled pozicionog efekta protoonkogena. Protoonkogeni in:taju razlicite uloge. aktivna forma. . Specifican primer se nayodi u slucaju p21 Ras proteina koji je aktivan samo kada je vezan za GTP.itd.njegova .koja menja glici11 . .· · ·.:-. Ovi specificni enzimi sada vr5e fosforilaciju odredene aminokiseline ciljnog protcina'preko hidrolize-ATP-a: Na taj naCin:dolazi do . lnaktivacija ovih gena omogucava aktivaciju protoonkogena. :take f kod ·-amplifikacije dolazi do ·kvantitativnog . translokacije 9q34:22q11 nastaje Ph' ·(Philadelphia) 'l1romozom· (slika ··110) . · . zone genskih . .proteine sa -GTP-aznorn aktivnoscu. · Protoonkogeni koji deluju kao· faktori rast~ stvaraju sign ale koji ce . dolazi . Takvi proteini su kodirani od strane Ras-familije ·protoonkogena ·(N"Ras. protoonkogena. . fuzionise se sa sekvenc~m bcr-gena i nastaje bcr!abl himericni .~k.· ·· . u · :· : · .. _ ogu da budu transmembranski proteini ili M transkripcioni faktori.da se translocirani . Poslednji u lancu prenosenja signala ·. konstitutivne aktivacije ili hiperaktivacije gena ili nemogucnost da se ekspresija gena ugasi u pravo vreme. kolorektalnog karcinoma).aberacije) . · · ..signal J:neposredno ·na·. itd.je · da · bude vezan · za GTP ·· · · (guanozintrifosfat-energetski molekul). • ·_ · · •· . dalje · . 28 .Humana genetika . Oa bi se signal.·hemijski:' aktivan..Ukoliko se desi mutacija na sekvenci . koji se nalaze na celijskoj membrani. 'neu. Neviralna aktivacija obuhvata point-mutaciju. . .f~sija pracelia 'kvantitativriim·_ef~ktom (pojac~nom transkripcijom). tlnozavaju) i dovode dopovecanja kolicine . Prema vrsti proteinskog proizvoda koji kodiraju podeljenisu na vise grupa (slika 107)..protobnkogena . Najpoznatiji protoonkogeni koli kodiraju . rezult~t je pojacana:. _ . · .· ·· odgovomih za. Ova.-_: . · tako ·sto ce vrsiti stimulaciju celije na proliferaciju.. mnogih hemijskih modifikacija ciljnog proteina. EGF (epidermalni faktor rasta). PDGF (trombocitni faktor rasta). da je u celijama ·_t~~ora_ mokraCne beSik~ dokazana ·point-m-utacij~ na_14 ~-. -pri cemu ~e 'njego~o . i pravc· ciljnog mesta.. Da bi se sad asign·al koji je uveden u celiju preneo dalje do svog ciljnog mesta neophodni su p~~dukti pr9t()onkogena koji kodiraju nereceptome protein-kinaze. Ukoliko dode do _ . Ukoliko se · protoonkogen aktivira. Pojacana ekspresija ·se -desava..dejstvo modulise _·nastavlja·kaskadni proces ·u.pojava se objasnjava mogucnoscu . _· ·"· · · transformise protoonkogen u onkogen. :yes. IGF 11 (insulinu slican faktor rasta) . K-Ras i H-Has) i imaju ulogu u prenosenju -. Skoro svi receptori iz ove grupe imaju tirozin-kinaznu aktivnost. transmembranskog i intracelularhog regiona koji vrsi uvodenje biohemijskog signala u celiju (slika 107).__ : · ·•-_ . Segmenti genoma koji nose protoonkogerie se amplifikuju· (u. -.:_. Najbolji primer nastanka himericnog gena je vezan za nastahak hron1cne ·mijeloidne leukemije. fes. .· ..u =. lnteresantno je da su protoonkogeni uglavnom_ sing/e (sekvence) geni.·.koji .. met.. ret..do·: kvalitativnog·J _kvantitativnog mimjanja· produkta.. · Najpoznatiji · protoonkogeni· koji · kodir~ju ·jedame· recepfore ·su myc. Da bi signalni faktor rasta uspostavio kaskadu koja obezbeduje stimulaciju celijske proliferacije neophodni su receptori za faktore rasta. lokusa za imunoglobuline i T-Celijske receptore) i' da time bude u preteranoj meri eksprimiran. Nasuprot njima stoje tumor-supresorski geni ciji produkti sprecavaju povecanu proliferaciju celija. a ukoliko su aktivirani uzrokuju: promenu proteinskog produkta usled mutacije gena. celijskog sign ala.nivou·:molekula DNK modulisu ekspresiju ·grupe gena '" . sto znaci da mutacija samo jednog alela moze da vodi ka aktivaciji maligniteta.·. · ..::.~ ~ i _~ . Kako kod.. cijom-hidrolizom se obezbeduje. . · r produkata ovih gena.·koja dokazuje prethodnu tvrdnju.ni · efekat (struktume hromozomske. erb-B (receptor za koji se vezuje EFG).zbog ~pro.:" · . Blokadom nekih od faktora rasta moie da se bitno umanji razvoj tumorske bolesti (npr. .

' . ... ~<~:~~ :~.- .. ./ __..! . -:..... •......• ~ ·...·· '... :.·· p53~_].._... I... -._ " !' ''. .. . -~ ·.. j •• ··. -.·: ~ .. · ' -~ ·:: "'· . ' ~ ' ·'' '!'t' ~·" ~-l . . ' . . '!'!..:c:..... - . A I' C... • Slika 114 .3 Slika 113..~ Najznacajniji tumof-supresor5ki geni kod eoveka. -- .. · . Herpesvirusi . . .. \\'T-1 · ·...•.._.H_~MANIM MALIGNITETIMA.··· ·. ..~::_ . . . .:.. : . -----· • '-.. ·~.. · . . . . Papovavirusi Papilloma· virus H"pcdnaviru:i kar-dnom ce~ksa utenJsa hepatocdularni karcinom Bul"kitt-ov limfom nazofaringealni kal"dnom Hepatitis-8 virw ..:~- . .. ::. · -· •. ..ITT? LIMFOM . . ..... ._ - :~-::.._· :! . ..... BURY. ·t ()l...: ....! .. -·: . . ..Nastanak Barkitovog limfoma Slika 112. .... ' ~ i Wilms' Jumor : .. ..·yi~0:~¥~~-~~~~~~i·~-~-... ·. .... .-. ·..~~~~~~~~: 7~~2i~~~~~~~ff:~~4k~£¥h9tl~:t _ >...~-:\: ~· ....:.- ~)£~~· : · ~ . . Epsr~in-&rr virus .. . · ..... .... RNK vin~si Retrovin~si HTLVI adultna T -C:odijska leuk£mija HIV-J Kaposi sarkom ... · ....J) Slika 111 . ' ~ mutir:cu1i -I • • ~ pr-eiivljavcnje C:elije sa oitecenim genomom ?J:.'• .:.U!~a p53 gena u onkogenezi .Onkovirusi TU MOR SUPRESORSKI GENI . •. . : .. ·. . Familit~lmlenonurtous polyposis -. ....• ..

40 . · mutacija koji se procenjuje da je neophodan za izazivanje maligne transformacije je oko 8.deluje kao··transkripcioni faktor.· uslovljava mora da bude germinativna (gametna): Kod nenasledne forme retinoblastom je unilateralan Oedno oko). Ova translokacija zabelezena je kod preko 80% bolesnika sa Barkitovim (Burkitt) limfomom (ostalih 20% ima 8:22 ili 2:8) (slika 111 ).. kritican broj mutacija. dok su osobe koje naslede ·· · germinativnu:mutacijirovog gena potpuno fenotipski normc. Na genetskom nivou . ali se generalno smatra da je etiologija kompleksna i obuhvata fizioloske. Mutacije tumor-supresorskih gena su recesivnog karaktera. Najpoznatiji onkovirusi su iz porodica Hepadnaviridae (Hepatitis-B). i mutacije koje {·do:.znatno vecu verovatnocu da podlegnu malignoj transformaciji.njega dovode su ·postzigotne ::-Lobavezno somatske. DeHujedako sto njegov ·produkt . EvoluCija maligne transformacije . npr. metabolizam.sistern . Odredene vrste virus a sposobne su da aktiviraju protoonkogen. autoreplikaciju i replikaciju naslednog materijala. se u toku duzeg vremena u jednoj celiji akumulira (nagomila) veci. mutacijom inaktivirati da bi prestali da vrse svoju normalnu funkciju. lnace mnogi viralni onkogeni imaju svoje pandame u protoongokenima eukariota. Takode jos jedan primer indukovane maligne transformacije usled strukturnih hromozomskih aberacija predstavlja nastanak reciprocne translokacije 8:14. u zavisnosti od celije i drugih mutagenih faktora. kao i ostecenja koja se na DNK molekulama desavaju upravo na onim regionima koja su odgovorna za regulaciju celijskog ciklusa. 39. Tumor-supresorski geni . sto znaci da se oba aiel a moraju. onda . n.tim. g. . pa ga celije imunog sistema ne prepoznaju kao strano tkivo ili antigen. p16. U preko 50. Pored neviralnog postoji i. tumora) se objasnjava · propadanjem (mutacijama. Tumor-supresorski geni BRCA 1 i BRCA2 imaju znacajnu ulogu u razvoju porodicnog raka dojke.na povrsini celije ili je takav da ga celije imunog sistema ne prepoznaju ili se promene.nalazi na kratkom kraku hromozoma 17 (17p).trans(ormisane celije organi4ma.NF-2. Tumor-supresorski geni. .viralni put aktivacije ·protoonkogena. Patogeneza nastaje usled ugradivanja myc-protoonkogena u transkripcijski hiperaktivnu sredimi u kojoj se iialaze lokusi za H (teske) i L (lake) lance imunoglobulina. Razni su uzroci koji dovode do maligne transformacije celija.javlja bilateralno (na oba aka} i mutacija koja ga . .menjaju svoju morfologiju (dediferentuju se).a aka poticu jz ·animalnog sveta sac-. geneticke i faktore spoljasnje sredine. dok je gen WT-1 povezan sa razvojem Vilmsovog tumora bubrega koji se obicno javlja kod osoba mlade zivotne dobi. pa ih aka poticu od virusa oznacavamo sa prefiksom v. hepatitis-C) itd (slika 112). v-s rei c-src.genom u genom domacina dovodeci do povecane ekspresije. Receptorski . Prvi otkriveni i najbolje prouceni tumor-supresorski gen je Rb1. k~je. BRCA 2 itd. WT-1. Retroviridae (HIV. · (slika 114). Broj . NF-1. Najpoznatiji tumor-supresorski geni su: Rb1.. i kodira fosfoprotein ~oji . deregulaciju mehanizama koji regulisu i kontrolisu sintezu proteina i njihovih enzima. retinoblastom. Papovaviridae (Papilloma · virusi). Ovaj defekt (germinativne mutacije p53) se naziya Li-Fraumeni sindrom.dovedu do mutacija protoonkogena i ·njegove transformacije u onkogen (kvalitativni efekat). Maligne ili neoplasticne celije su . Gen p53 se . nego sto je to ovde istaknuto. Myc-protoonkogen sad a prelazi u onkogen zato sto ·je povecana njegova ekspresija u 8-limfocitima i zato sto dolazi do kvantitativnog efekta (sinteze produkta gena) strukturne hromozomske aberacije. Kancer je cesci u starijoj populaciji. dok ce himericni proizvod imati masu 210 kD i bice karakteristican po povecanoj tirozin-kinaznoj aktivnosti. tj. Normalni produkt ab/-protoonkogena ima masu 145 kD·. modulirajuci ekspresiju drugih gena . Njegov lokus je na dugom kraku hromozoma e 13 (13q14). su oni geni ciji produkti vrse supresiju celijske proliferacije i onemogucavaju da dode do hiperproliferacije (preteranog umnozavanja) i razvitka tumora (slika 113) ~. Kancer se i danas smatra sistemskom bolescu sto znaci 29 . pracen multiplim malignitetima: Ukoliko je retinoblastom nasledan.se tumor:... s. zatq slo.aktivira· inhibiciju celijskog ciklusa (uz pomoc produkta gena WAF1) na kontrolnom punktu . onkogeneza (stvaranje . p53.stojrnaju . G1/S: . na kontrolnom punktu G1/S. Jsto -tako mogu da . koji ima ulogu u kontroli celijskog ciklusa. Znacajna je slicnost datih · protoonkogena · i njhova uloga u stvaranju tu mora mnogo veca. . .Humana genetika . APG1 BRCA 1. kvantitativno i kvalitativno · (:elijsku proliferaciju.:~lne. te ·dobijaju CSposobnost da naseljavaju i razvijaju se u drugim tkivima i. · nakupljanjem mutacija) u genima ili delovima DNK (naslednog materijala) :koji regulisu .% svih karcinoma utvrdene su ·ml!tacije gena p53. . kvantitativnog efekta. Ukoliko se ovaj gen inaktivise razvija se karcinom nerv"nog tkiva reline. na taj nacin sto ugraduju svoj .organima. pri tome ·. Produkt ovog gena je nuklearni fosfoprotein.Repetitorijum gen.

. ..kod coveka .... RAZVOJ KOLOREKTALNOG KARCINOMA .. !: .. . ' . .Evolucija maligne transformacija na modelu kolorektalnog karcinoma "' :::~ :~:. ...h-1r- Slika 116. . . -~ ··. ... . COOH .... ~~~~f/-·. HOOC ·. antigen-vezujuce mesto .. . .ih ·. ' ~ t~=~.• ·.·... .-:···· '\. -~~- liOOC laki lanae· ieski la-nae_..Plan grade arititela .'.~. _.:.· ~.r: · < •• ~-- t ~~~~ smrt inficirane cefije . ... Slika 111 . ._·.: ._ .Tipovi imunog odgovora ... . Sq gubitak 12(1 aktivacija ISq gubitak 17p APC I K-r DCC: . . . ·- patogen ..: . I ·r I gubitak non alttracijt -~~::~f~:~~ Slika 115 ... ·..... . celljski odgovor T celija :r: . _ _ ·-ii.

. Metastatska bolest je posledica . Za oba su odgovorni limfociti i to za humoralni tzv. · ·· .k. · · . gastrointestinalnog trakta itd. pa cak ukoliko dode i do daljih mutacija odredenih gena. Nasuprot antigenu. : . 8.ulogu. demdriticne celije koi. T~citotoksicni limfoeiti) koje su zaduzene za imuni odgovor preko signalnih molekula (citokini). 41. polisaharidi.mnogo faktora da bi ·se malign a celija razvila.vezujuca mesta na vrhovima molekula (slika 117). kompleksovani molekuli itd. humoralni tj. kako se to danas zove metastatske bolesti. nakon ulaska :u·tela bude preuzet od ·prezentujuCih celija.dugotrajne cirkulacije malignih celija kroz organizam i pokusaja istih da negde zapocnu umnoi. T limfociti mogu. stoji novostvoreno antitelo koje moze da ima ·. Teski lanci imaju 100 AMK za varijabilni deo i oko 300 AMK za konstantni.i: . Aktivirana· plazma celija sada zapocinje stvaranje antitela. odnosno. Vezivanje ·antigena omogu6uje antigen--vezujuce mesto {TCR) antigenskog receptora ili antitela i naziva se antigena determinanta.oSlane. makromolekuli itd.i!iJetalne jetre._.se '. · • .tako sto razaraju . takode.Human a genetika. T limfociti iz timusa a 8 limfociti iz. Najjednostavnije antitelo podseca svojom strukturom na slovo Y I ima dva identicna · antig·en.lnih regiona oba tipa lanaca odredena je sa 3 mala hipervarijabilna regiona u svakcim lanct.efektome. . nakon susreta sa antigenom i zapocinju stvaranje antitela. dok se limfni i cvorovi. Postoje dva tipa imunog odgovora. Nakon aktivacije (kontakta sa antigenom) oba tipa celija . . ·obraden i zatim . ·o .T-citotoksicne ::celije deluju . skoro svi·proteini. a za celijski T-limfociti ·{slika: 116). Ovi organi se nazivaju i primarni limfoidni organi. . cak i do 2000 molekula u sekundi. da bi ocuvao normalnu :tunkciju koja mu obeibecu]e ph:iziv1javanje> To se postii. Da bi maligni proces otpoceo najcesce se prvo desi mutacija (ili delecija) na hromozomu 5 i inaktivise APC tumor-supresorski gen. imunoglobulina. nazivaju sekundarni limfoidni organi. poslat na povrsinu celijske ' membrane.:infidrane · celije i sprecavaju da se infekcija prosiri na veci deo organizma.sr:Zi. Najbolji primer evolucije maligne transformacije je razvoj kolorektalnog karcinoma (slika 115). da aktiviraju -direktno.prezentuje drugim celijama imunog sistema (T. region. · . do pojave metastaziranja (sirenja kancerogenog tkiva po celom organizmu). dolazi . koje vrse fagocitozu antigen a.limfociti.e imunim odgovorom. Svaka ·s celija ima oko 10s antigenih determinanti (receptora). Ako nakon toga dode do smanjenja intenziteta metilacije DNK. razvija se adenom klase Ill (kasni adenom). Raznolikost varijabi.. sto za posledicu ima povecan rast epitela debelog creva (hiperproliferatiyni epitelijum). makromolekula i patogenih mikroorganizama. · aktiviraju6i u momentu vezivanja antigena za receptor. razvija se benigni turner (adenom klase 1). gde Prezentujuce. celije.·veliki molekuli. T limfocitidirektno reaguju sa antigenom koji su im prethodno prezentovani (prikazani) od strane prezentujucih celija. opada imuni sistem i stvaraju se uslovi za razvoj metastatske bolesti.. BJimfocitLu . makrofagi i 8 limfociti. · · • Antigen moze da bude svaki strani molekul ili ageils. Genska osnova imunog odgovora Jedna od najvaznijih spobosnosti organizma je da se brani od iiwazije stranih cestica. celijama). Ukoliko nakon toga dode do mutacije Ras gena (hromozom 12).·celije su: dendriticne celije. nego da u njegovoj etiologiji mora da se poklopi .Repetitorijum da ne same ima posledice po ceo organizam.T i 8 Jimfociti transformisu se ~ . T i 8 limfociti dobili su naziv prema organima iz kojih poticu. Tek po dobijanju odredenih signala i teske intoksikacije organizma usled tumora. · 'J 30 • • • I ..avanje. s tim sto dendriticne celije imaju samo ovu . adenom klase I.· : T limfociti se dele ·u ·T-helper-celije ·i T-citotoksicne ·celije-: :T~helpei ·vrse . Na ovaj nacin se formira kolorektalni karcinom. Drugim recima strani agens (antigen). Ako potom dode do delecije oba alela DCC tumor-supresorskog gena (hromozom 18).).aktivaciju· ostalih' celijskih populacija (8-limfociti.. Oba tipa lanaca imaju varijabilne sekvence na N~terminalnim krajevima i konstantne sekvence na C-termina!nim krajevima. krupne imune 6elije .: 8 limfociti se transformisu u plazma limfocite (plazmocite). koji predstavlja specificni mehanizam preko koga se organizam brani od antigena (mikroorganizmi. Antitelo se sastoji od dva laka i dva teska lanca koji zajedno formlraju antigen-vezuju6e mesto. ·• ·: · _· :. odgovor antitelima i celijski. Da bi doslo do maligne alteracije neophodno je da se dogode delecije oba alelap53 tumor-supresorskog gena. a T limfociti u T-helper i!i T-citotoksicne limfocite. slezina.·makrofagi. unutarcelijski signal. Laki lanae ima varijabini region duzirie oko 110AMK i 110 za konstantan region . napreduje u adenom klase 11 (intermedijarni adenom). Svaki receptor je vezan transmembranskim proteinima 'za citoplazmatske strukture. Premaligne celije nekada postoje i po deset godina ~ok se konacno ne oforme kao maligne. plazmcicite. proteinskih molekula koje spadaju u klasu .e.:.makrofage.razlicite strukture.

0.. •. B c':elije .. ~~i?: __:. ...' ~ r:· .. ~~ Yr) ~._tiJ:· .. ·.:_ . ~._ ~--~ l ®@ memorijske celije.. ~ ' I ..~~~: c~ ·_:~~"-. razl1c1te._:. antigen . r~tifKY ~- <ID _@D·· ©©. celije . . • 0 Slika 119.. ..·'·.'~·::.. .."":" antitela . .'·"' r.S-' 1 ANTIGEN SE VEZUJEZA SPECIFICNU B CELIJU efektorske 8 celije jednog klona PROLIFERACIJA I DIFERENCIJACIJA ·~ ::.: - drugi kontakt sa· antigenom · efektorske celije ~~.Klonalna selekcija B-limfocita :. ·:::. .!lo~~~-~~t~::. ~l -·(~ PROLIFERACIJA I DIVERZIFIKACIJA PROGENITORSKIH CELIJA .. ~_:Zn\> C{<. @·© memorijske . \..Reakcija posle pivog i drugog kontakta sa antigenom.~ ~ prvi kontakt sa antigenom · I I naivna : celija . ?~Z~~-~-~~-.7 ~.s.-.::..:61 neaktivirane · ..·'i~: .-~~~ Slika 118 ._.. ·.•-."""".. '~1 :·:: . :~ ..-· . / . ~ .·""·~·-. •.' --~- o--..·~~·4t~: -~_.r='· '#... • -~ ..-~ .

se:podelina·Jri.zavisno~ti. kojisire kr. ~-·. . . koja omogucava da ..~::.:.kbjf.· eelije'B... . . mlecne. : . _gena ·koji kodir~ ju.· · . :. .200) Ymnogo manji hrOj gena toji '.je genetski determinisana.._ .{ima .udje ·u~teliju.ae11a'~oo~·sadr... .~HiT. Geni za imuiioglobuli_ne.·J.\'~.ce ·.mogu dugo . Takvr:limfociti.u . . .. uz pomoc .· . p~akticno svaki antigen koji postoji (1 012 varijanti) i ako pre toga nikad nije stupila ukonta~t s njim.izazvace:i-sekundarnu~: imunti.. i imaju mnogo .teskb~H}i~'iai1t:i-i~~. sto predstavlja preimuni repertoar antitela. .. Kada T limfocit dode u kontakt sa svojim prepoznaje. -.·/_ neophodno:. koja za sebe vezuje antigen i stvara kompleks antigen-antitelo. ·. ·. :• · prvi put. tj...·. _ _.. . .-:~-: .._stvore·j~d.prepoznatljivim:. Po nekim shvatanjima meinorijske :Celije~~e. · rii ': ··genskih segmenata:· V (variable). __ .. pri cemu ce se dobiti klonovi (umnoZice·se isti tip limfocita u velikom broju da bi mogao da unisti antigen). S obzirom da su imunoglobulini po hemijskoj prirodi p~ote_in_i) njitiova :sinteza ...antigened(ao.~·~ ·~·:~.· . tela kao i onih koji dolaze ii spoljasnje sredine. Prviodgovorde stvar.~"i}~::~·apoptozcim·nakonmbavljenog--posla:(imune-:qdbrane':organizma)..· vazodilatatore (histamin). Svaki T limfocit za vreme sazrevanja. lgD i lgM se nalaze na . · .cjtokina koji sustil!skfpaje..sretnu .aktivirani i selektivno :umnoi:eni._... pljuvaene i zlezde u intestinalnog i respiratomog trakta. . · _ · -· Somatska rekombinacija koja spaja Vi J segmente_ lakih larya_ca i V.:. ..: ·~}. .1emelji istvaranje:vakeina.{poqn~-:Laki :la_nci 'mogu·hiti A~laki .s'usreta-sa:antigenom:·Zatim stupaju na scemi B... · ·suda u infiamatomo mesto. Karakteristika imunoglobulina je. . .Jmi. Ova vrsta imunog odgovora naziva·s·e sekundamiimuni odgovot:Na njemuse. Svaki limfocit prepoznaje samo jedan specifican antigen.ili . Ova pojava je oznacena kao klonalne selekcije (slika ·118). ..llroj":~ena .gion -~lakih·.· : . -. .~to st/aemdriticne ceiije i makrofazi.Re-petitorijum · ·Kod sisara postoji 5 klasa antitela: lgA. ..-prvaiazanastaje·~ad~. · · · .memorijske celije. ·· (va_ rijabilni) region '(ima ih ·oko .: ·. "·¥' ·Rekombinacija zapocinje skracivanjem.kodifiiju:-C·..ece samci·.p : ~egmente teskih lanaca nazivase V (D) J ""r .ih' 5kVarijab11ni :· · deo polipeptidnog lanca je kodiran .imunoglobulina ..i:f.. ...~ ":·-' ·._g'~:~:2.J1:maca kodiranje DNK sekvencom koja nastaje spaj'!rijem dva tipa.)±::s::" .' --· _ __..membranama B-limfocita i oinogucavaju njegovo sazrevanje.antigen do_ membrane fagocitirajucih leukocita i ._ -.lgE ahtitela koja se vezuju .~e:_odr:eagoyatf. najcesce onom koji je najblize mestu infekcije ili kontakta sa antigenom.· obezbeduje VDJ rekombinacija. .-.~-· · za membrane mastocita i ·bazofila indukujuci .ogu stvara~itokqm ce!o_g ~iv?ta je~!~~e.-:sve.nakon:syegamekoliko'sati:-od.nazivaj.koji ·. · · . . sto je istaknuto. ._._ :\~:. velika raznovrsnost.:·. 42.. .·. : .Ze "·:ve1iki .· D (ima ih-27) 1-J 'Uunctipn) :s. . .tako ~veljki : broj antigena zahvaljujuci i tome sto stvara ogroman ·broj razlicitih .~'~:1~il~ki~Xl} :ij"f. · ·6::rb:J. Tu nauci da raspoznaje svoje od stranog..~4 .):_.l na 'prezeiitujC(cOj terrtstra·ni ·'arifigen.J :{juncfionf geria {ima .s·a.njega :btce :mnogo :bumJJa tbrzamego kada:. : limfocita:ga prepoznaju:·. od :ekspresije ·specificne -·:gru-peS9e~~:~:{?r.da .~:~~-:\::.ili . To sirenje omogucavaju.·proliferis. izuzetno dugotrajan. •. njihovu ·degranulaciju.se.u_pe rfa!TliHia %'}.._ J. Hu~ana genetika.faze~.h :s). : imunoglobulina~tokusi ovih ·gena · •sc'~raspor~q~ni ·~na~~vise : ~roJl]cizoma:":.genskih segmeriata:. kao. biti.. · Ogromnu · raznovrsnost varijabilnih·· region a · .: : .. .' '. .desava. . ·. pri cemu ..celijaje : .. ga kao takvog i ne pocinje · prolite·racij<fcelifa·:'Meoutim.limfociti:.~. Drugim recima postoje limfociti koji mogu .. .. .~«":. . lgA imunoglobulini se nalaze u sekretima egzokrinih zlezda kao st_o su s· zne.norri··i:traju ~ceo zivot~.celije-:.__ .--. rekombinacija.__ ____ ____________ __ . Proliferacija izabranog limfocita se desava usekundamom limfoidnom organu.a preziv. memorijske C:elije .·.da bi ..samo.. Na_~on tog~ lgG nasi. . ·Znaci .:_J.._ · • ~ ·· · .1 ~.. sposobnost odgovora na antigen.cpa:Seilrug~~_ij~:. <· : 31 .hrlruge~:: irriune!~r~akcije .mirujui-sve ·dok ne ·doau·:U: ·kontakt . · .y segmtimtima i J segmentima.::tzv:~primamprrrimunom..da bi leukociti~dijapedezom lakse dospeli iz lumena krvnog .antigen. nespecificniju ulogu u imunom odgovoru organizma:: '.. : .egrtJe~_t..kodiraju V . •..Ukoliko:'antigen po drugi put ude u organizam·.Danas ·je"poznato~tla ·: !i~.K~Iaki.vne sudove. i C· domen ·imunoglobulina..19)~ · :ZivoLovih-.\i:22. lgD...1 .2.ane:.telo:~ Ova·reakcija:se. . ._:_ • . se memo~jske celije n. :'": :.-::_: . dok se razvija _u timusu· dolazi u kontakt sa svim mogucim potencijalnim antigenima svog sopstvenog.. ·': . D segmentima.~. Jfl. ·. Kada ant1gen po drug1 put ude ·u Jedan orgamzam.~·-i. .umreti :.tri :tip a.·: ::.··''· -.da pamte susrersa antig€mom·.. .}.. ·.:..iJTiunoglo bu linfjer-najveca:Jarililij~·igena' ~~d:. · Organizam· uspeva da odgovori na'.~DJ ili -.ce .Ukoliko postop.:::~~. ·.oni oslobadaju .. . lgG i lgM.. jedinka maze _da odg~vori -na. ali.reakcijom .rreakdjti::::-:Nak·om<pcver. lgG arititela su glavna klasa _ imunoglobulina.··Kad prepozna.~. .svaki :! e. ·_· . '.~:.::koji J<odirajti'polipeptidnu :sekvencu koja · ' · povezuje V..infekcija. lgE.-~--~'.medijatore citokine jfl....:.U sustini :imuni odgovor mogao~bi :da .signale (alarm) :daje uorganizam stig\o.je. a svaki region teskih lanaca kodiran je sekvencom koja nastaje spajanjem tri tipa·gen~kih segmenata: V.~t:_'..~~ve_ka. . . .~. neophodno je sirenje ki'Vnih sudova..moglobulina su:detemlinisani od ·strane _sopstve~e-:gene_t5~e_grupe.:ahtigenom•·(slika ..la~ca._ .-..(qonsfanO:region.:.oni s·limfociti koji mogu specificno da se vei:u za · antigen.. _ .varijabil_ :Janac :. .:spajanje . _ · ~-. ·.. indukuje destrukciju antigena.reakCIJa ·na .:· ·. Familija ..anje.-zapocinje ··inten~vnu· proiiferadju.tl-pe :.·' · · ·· · Za razliku od 8 1Tlimfocita kojivrlci specificno· prepoznaju"antigen fjed~n··antigen-jedan limfocit koji ga prepoznaje) · postoje i imune celije koje nespecificn'o reaguju"na.~. · ' H: ~· · . Jimfocita (sarazlicitim receptorimana :povl"Sinicelije). ..-. ~· . . ---.. nazvani.bio ·kodiran. ·He·· strano . _ permut'!cijoin :segm~nata · nukleotida (uz pomoc ..

:... MHC klasa I _.. .. i ..._ .J. :----·--· -·---. _ _ _ _ _ _ _ _-·=-..... .TA ...· · ..::_:::.. . CETIRI OSNOVNA MEHANIZMA DIVERZIFIKACIJE ANTlTELA. .-~~_.. ~·~.· •· L .. -.--· ..ioi~ . ..-·._ _ _ _ __. ...KOMBINOVANJE TESKIH I LAKIH LANACA ' · '---:---~"---.... ---· ·· .J ' HLA kompleks ----:-. ..· '· ....:.· - . . L· ~--~ ·.... ···' ···. . . ------"'-T-·~ . . }~1r~· .~~ . -------··----·--·.·· -------- SLUC::AJNE DE)-ECIJE IINSERCIJE NUKLEOTIDA NA SPOJEVIMA GENSKIJ:l'l ..' . . ..fpop~lapij~.. - .. .. . .- . Jedinke se ukrstaju i daju p1odno p_ot~mstvo • .- KOMBINA...~!:..-·.... '. . .· :' ·.~~~~~~-r~t:e koja naseljava odredjeno staniste.. ..-...... .. _______ ._ _ _ _ . _·..CiJE Slika 120 . . ·. - -... . ··.Putevi diverzifikacije antitela Slika 121. ::: .. -~------:: ' .. ... ·.••.. -'~· . SEGMENA....----. --·-· . :~~ . . .....____ . ..-~-~-~..· ..J . •:.. :_~-~~\~~ . .. -. .... . ..: ~ -·' ..· · . ·~ -----..-------.----------. . .· ---~ SOM~ TSt-:E HiPERMUT... :· : ~··: ···-{--.. . .TOR NO POVEZIVANJE GENSKIH SEGME~A .HLA fokus t- ·. · · .. · ..-.-.. . i .~---..··. ._. . "": s1ii<·~ 123 ~ SvojstV.:.. ~~-· :.. : ' -~_:} ' . I .: : . .. : · .:: PoPtn~~i~~~ -s~~p~ jr-~in~~ . . --·--··-.._... .. •· .. : : .) MHC ldasa 11 .. -.. •• .o.. .. T {' '·· : ~: i . . . . ......·:...

HLA-B. amitura od po tri grupe. Geneticka struktura popuiatijE( · ·· · Populacija predstavlja skup jedinki iste vrste. vec varira: Homozigoti AA nastaju oplodenjem jajne celije A sa spermatozoidom ' 32 .SU transmembranski ' ·· .HLA-C .. HLA genski lokus se nalazi na polozaju 6p21-23.determinisu dominanti i recesivni aleli A i a. potomstvo maze biti homozigot ili heterozigot (AA. Unutar populacije svi genski lokusi za ovo monogensko svojstvo ce imati dominantni ili recesivni alel~pA+qa~100%. pri cemu od oba roditelja postoji . Myastenia gravis. Poste se ]edinke slobodno ukrstaju odnos ho'mozigota i heterozigota ne stoji u mehdelskom odnosu 1:2:1. sposobnost osecanja ·PTC i neosecanja PTC kao gorke substance. sto znaci da svaki B-limfocit.. Sve humane populacije ·sadrie A2 alel.·. a jedna za teske. _(t i ~ 11) . Posto se gen·etski fond n_asleduje od roditelja.progresivan rast afiniteta antitela prema antigenu.ekstracelularni matnks i ·· · ' · . i obuhvata 128 gena i 96 pseudogena (slika 121 ). MHC ..lokus je.i ocevih i majcinib grupa. ukoliko o se posmatra frekvencija alela za neko monogensko svojstvo koje se.·heterodimeri (sastoje se .aleli Aw43 i Bw42javljaju same u populacijama cmacke rase.svih . Ova sposobnost razlikovanja sopstvenih celija od antigena naziv~ :S~ imunokompetencija. a ked coveka on se naziva HLA (human !eukocyte antigen) lokus. pa je vazno da se napravi razlika izmedju antigena i celija sopstvenog organizma. koji se pruzaju u. Primera radi. itd. ··. Dve grupe su za.. · . kada se rusi prethodno navedeno pravilo. pa se zato B-limfociti oznacavaju kao· mMospecificni. (spermatozoidi.~ sistema. transmembranski·. Njegova duZina iznosi 3.. uzajamne interakcije sa biotickim i. se .!\:.. aa ili Aa}.·11· sudakode transmembranski proteini sa ekstracelularnim domenom i · sastoje se od alfa i beta polipeptidnog lanca. makrofagi.rlacije podrazumeva ·se ucestalost genskih ale la i njihovih kombinacija u odredenom trenutku vremena.:Antig'e'riir. :: :c.lake. Da bi se utvrdile slicnosti i razlike izmedju npr. jer u toku sazrevanja ·ne uspevaju :da sintetisu regularan imunoglobulin. kontrolisu sintezu.imunoglobulina koje · se sintetisu. sadrii 6 genskih grupa. • '. cime se postize reorganizacija kodirajuce sekvence. Svaki imunoglobulin koji ce proizvesti jedan B-limfocit imace isto antigen-vezujuce mesto. za)sebe·vezuju antigen · koji . Posebna porodica gena. neprekidno kretanje.A-A. genLfll. Svaka popuiaeija poseduje fond gena koji podrazumeva skup · gena svih jedinki koje cine populaciju. ··.n faktorima i geneticku strukturu koja je vremenski specificna .malaze'na·:" rnembranama•. · · 43.··• · Postoje dve ·klase· antigena': HLA. Ova pojava uzrokuje ranu smrt B-limfocita u kostanoj sr:Zi. kicmenjaka.Repetitorijum rekombinaza koje kodiraju rag geni). koje reaguju sa antigeriom (slika 122). T-helper limfocit preusmerava sintezu na lgA. a . ali cesto usled nepravilne reorganizacije maze doci do stvaranja nefuhkcionalnog imunoglobulina. dve humane populacije · potrebno 'je izvrsiti uporedivanje frekvencije genskih aiel a na velik_m sh. Antigeni:klase . Taj genski lokus naziva se MHC' (major hystocompatibility complex) lokus ili glavni sistem tkivne podudarnosti.proteini koji. · Klasa ILantigena se sastoji.(lambda i kapa). Geni HLA lokusa stoje u kodominantnom odnosu i. pri cemu su p i q oznake za ucestalost pojedinih alela. uopsten naziv kod svih.od produkata gena HLA-DP. coveka ~ . birajuci g izmedu lambdaJkapa . · ·· ·· · 44. Pod terminom sazrevanje afiniteta se podrazumeva . slobodno se ukrstaju i daju plodno potomstvo (slika 123).·: klaseerr~sse·~. koje zive na odredenom prostoru (a real). .: Sv~ka populacija ima odredene karaktenstike kao sto su: polimorfnost. cine.HEA~DGP i:i HLA-DRJ-.' · . · ·. abiotickii.Human a genetika . onda ta svojstva . Gedna od najvecih) obezbec)uje sintezu proizvoda koji omogucavaju razlikovanje antigen a i normalnih celija.celija. Prilikom sazrevanja 8-limfocita zapaia se promena klasa·. I . . npr.ce·.·spedficnim ·celijama ·.i njihovi produkti su · :se: . koji..5 kbp i predstavlja najpolimorfniji genski lokus kicmenjaka... monociti. Pod pojmom geneticka ·struktura ·popi. pa se u razlicitim populacijama pored istih javljaju i specificni aleli HLA lokusa. . Antjgeni koji pripadaju klasi 11 se nalaze samo na membranama celija . prezentov~tiYT~Iimfocitima. javlja u dva oblika. l. jer ga svi imaju.nalaze na plazma membrani svake celije. Uvek ce se prvo sintetisati lgM i lgD. tkivnih antigen a.). Sazrevi:mje ·afiniteta nastaje zbog kumulovanja point-mutacija u okviru kodirajucih sekvenci V regiona L i H lanaca. pa se ova pojava naziva alelsko iskljucivanje.Klasu . u suprotnom mogu nastati odredene bolesti imunskog sistema (Hodzkinova bolest. · HLA lokus Funkcija imunog odgovora usmerena je prema eliminisanju strane cestice (antigena).nalaze\ma.. Ova pojav'! se objasnjava time sto svaki B-limfocit stvara jedan V laki region i jedan V teski region. od :dva razlicifa polipeptidna lanca~alf(! i beta~2). lgG i lgE (sinteza nak'?n kontakta sa antigenom~sekundarna klasa antitela).dok se npr:. kako bi imuni sistem normal no funkcionisao.Proteini klase.icajnom uzorku. ukupno sest Uocenoje da svaki B-limfocit transkribuje dve grupe od sest.· B-limfociti i epitelne celije). ·. s obzironi·da je diploid ne gamiture. nakon prvog kontakta sa njim (slika 120).Jance .

.. .....q .. : .. . .. ">'1 - .... . ·- ·-· . : A a ucestalost heterozigota ucestalost recesivnih homozigota aa Slika 124. ~ .. . ~.·-..PopulaCija u ra~hotezi {idealn~ populacija) .~ .<" • ' ..JEDNAiq=:ERTII.! _- . . Slika 125....Hardi-Vajnbergov zakon '·. ·-.. .. .. : ·:. .·:-- : J... ~ . . .. .~:r~.·· ucestalost dominantnih homozigota . .. .._. . : ~ · VREDNOS:J:~-(:.ITET· I.. "' .. ~- . • .. ·· .· I .. v ~ · ~: .. . ''.... .. ·_ .IMAJU PODJEDNAKU 'ADAPTIVNU~t:~·:-... · ·: . VJJABILITETH ~ .'. ... __ .~..· .o.. .I~ ../ '.. ::'i..JEDINKE.

zbog razlicite prednosti u oplodenju i prei:ivljavanju nosioca odredenog gena. Populacija je u ravnotezi. . selekcija. nije ni postojala na evropskom tlu. ·· · . Populacija koja je u ravnotezi je e dovoljno velika. geneticki drift i inbriding. Ukoliko se na nekom genu dogode mutacije koje uvek rezultuju promenom . · lnbriding se u veterini koristi za dobijanje odreoenih rasa zivotinja i isticanja ·njihovih osobina: npr. kao npr. Kada se izvrsi ?inteza svih nav~denih formula. lnbriding predstavlja ukrstanje dve jedinke suprotnog pola koje · su u bliskoin srodnickom· odnosu. Prirodna selekcija je put u toku koga se pomocu faktora eliminacije odredeni genotipovi odstranjuju iz populacije. a faktori koji remete populaciju na nju ne deluju. One mogu biti spontane i indu~ovane (izazvan·e nekim agensom) i uglavnom predstavljaju stetnu pojavu. Selekcija maze biti prirodna ili vestacka. ali postoje· slucajevi.da ce se eksprimirati stetni recesivni geni. ili svinje sa vecim procentom masnog tkiva itd. M broj mutantnih fenotipova. Ova definicija vazi samo za populaciju u ravnotezi (slika 125).1 (100%). dok je uocena jedna ·populacija lndija~aca koja ima A krvnu grupu u vecoj frekvenciji nego bilo koja druga humana populacija.. Ako odredenf organiiam zaobide selekcioni pritisak onda se kaze da se on adaptirao. krave koje daju vise mleka.osobina. Kako migracife i ·mutacije. naime nasledili su gene koji su predstavljali isticanje osobina njihovih roditelja. Medutim posto postoji mogucnost da spermatozoid A oplodi jajnu celiju a. :w. gde je U. dovodeci do evolucije ljudske. Najbolji primer efekta migracija na geneticku strukturu populacije je zastupljenost 8 krvne grupe u Aziji i Evropi. Ovakva populacija naziva se idealnom mendelskom populacijom i naravno ne postoji.da svoje gene prenesu na potomstvo i organizmi koji su favorizovani selekcijom (prirodnom ili vestackom) imaj0 veliku adaptivnu vrednost. On povecava selekcioni pritisak na racun drugih organizama.povecati frekvencija homozigotnosti. lsto vazi i za recesivne aa hom'ozigote. usled delovanja genetickog drifta.postoji. . sparivanje jedinki se odvija po principu slucajnosti (panmiksija). · · · · 45. sto je znacajno za ekspresiju stetnih retkih gena. vec se teoretski koristi kao model u populacionoj genetici. za A80-sistem krvnih grupa onda obrazac glasi (p+q+r)2:. Ona se izrai:ava obrascem U:. Ukoliko adaptivnu vrednost predstavimo.MfN. ili spermatozoid a oplodi jajnu celiju A onda ·sledi~pq+fq:. a ad istocne ka zapadnoj Evropi se postepeno smanjuje do manje ad 10%. Svi ovi faktori deluju na skoro sve humane populacije i znatno menjaju geneticku strukturu populacije. Geneticka ravnoteza populacije i faktori koji je remete Geneticka ravnoteza u populaciji je idealizovan prikaz populacije koja n.Human a genetika . Pokazano je da je ucestalost 8 krvne grupe u Aziji 25%. u genotipu potomstva ce se . Geneticki drift se desava u svim populacijama. Geneticki drift (geneticka slucajnost) je znatna promena postojece geneticke strukture populacije koja dovodi do remecenja njene ravnoteze. ali s~ .1 00%. dobice se da je u populaciji odnos genotipova p2 + 2pq + q = 100% dobijen iz obrasca (p+q)b100% i ovaj obrazac se naziva Hardi-Vajnbergov zakon (slika 124). Ukoliko dode do braka dva bliska srodnika {konsangviniteta).Repetitorijum A~p x p :. kada su deca rodena iz braka srodnika imala prednost. q2. ako zbir njenih alela odgovara 100% datih alela. Najveci broj lndijanaca Severne Anierike ima 0-krvnu grupu. pa i svake druge vrste.. Vestacka selekcija (ili antropogena) je poseban vid ·selekcije koju covek vrsi. tako i selekcija utice na geneticku strukturu populacije.la budu izvor :novih gena. Mutacije deluju na taj nacin sto evolutivno dovode do zamene jednih gena drugim. ali u· retkim slucajevima mogu <. Faktori koji remete geneticku strukturu populacije su: mutacije. kao npr. Selekcija predstavlja povecanje ili smanjenje ucestalosti odredenog gena ili genotipa.poP. odnosno ·zbir frekvenca svih gena (alela) u homozigotima i heterozigotima iznosi p+q:.rekvencija hromozomske ili genomske mutacije. Ukoliko se prate tri alela.u malim . pa krajnja formula glasi p2+q2+r2+ 2pq+2pr+ 2qr-fOO%. sa a selekcioni koeficijen( (selekcioni pritisak) koji predstavlja stepen smanjenja adaptivne vrednosti genotipa sa Sonda sledi da je W+S=1 (slika 126). • • : • ~ f ~ 33 . onda se one nazivaju rekurentne mutacije i mogu znatno da uticu na frekvenciju alela u populaciji putem mutacionog pritiska. i javlja se u svim ·stadijumima zivota. migracije._ : • . Ova pojavase objasnjava seobama Mongola koji su se ukr5tali sa lokalnim evropskim stanovnistvom i time vrsili introdukciju (uvodenje) ·8 krvne grupe :na _evropsko tie. .ulacijama. koji ·nastaju oplodenjem jajne celije a i spermatozoida a~q x.q:. p2.gena u isti alelni oblik. Ucestalost mutacija u populaciji se odreduje preko broja mutanata (nosilaca I"((Utacija) u populaciji. najbolje tiocava . Adaptivna vrednost genotipova zapravo predstavlja sposobnost jedinki . koja pretpostavlja se. zbog sve vece mocl narusavanja odnosa u prirodi. sve jedinke imaju ujednacen vijabilitet i fertilitet. a smanjuje u svoju korist (medicina). a N broj ispitanih jedinki. insekti. Bitno je napomenuti da selekcija obezbeduje i eliminaciju stetnih dominantnih i stetnih recesivnih gena. Sto je veci stepen srodstva to je veca sans a. Efekat inbridinga je skoro uvek negativan.2pq. Migracija je f 'pojava kada jedna populacija menja i:ivotni area! i kombinuje geneticki:materijal sa drugom populacijom uzrokujuci protok gena.

.

.

. I ~._·~--_i_____ · · ... · ~-~-~-_.:CiJE S .:D'CHC3JENT SELEgr.vrednosti genotipa · ... :.s Slika 126...predstavlja stepen smanjenja adaptivne . · · J ~~------------ = J ·. KADA SU PLODNOST I PREZIVLJAVANJE GENOTIPOVA U POPULACIJI RAZLICITI~>. : KADA SU PLODNOST I PREZIVLJAVANJE SVIH GENOTIPOVA U POPULACIJI JEDNAKI- .· : : . I • ! ______A_·_D_A_F_T_i_V_N_"A ~_ __1 R_E_D_· _N_o_s_T_·_(_ .··.• . ·· -.. . . . ' ~ .r ·• •. . ·. .-: w = 1. . • . .Adaptivna vrednost genotipova i ~ -~.